黑龙江中医药大学佳木斯学院154007
【摘要】目的：研究复方烫伤膏对兔深Ⅱ度烫伤模型创面治疗的作用机制。方法：恒温水浴法建立兔深Ⅱ度烫伤模型，造模后外用不用剂量的复方烫伤膏，每天一次连续用药20d。结果：复方烫伤膏可提高家兔烫伤创面愈合时间、创面愈合率、降低烫伤创面不同时相点的组织含水量；降低兔烫伤组织TNF-α和IL-1水平。结论：复方烫伤膏对兔深Ⅱ度烫伤具有良好的治疗作用，能提高创面愈合率，降低烫伤组织含水量，具有镇痛作用，其作用机制可能与降低烫伤组织中TNF-α，IL-1等炎症因子有关。
【关键词】：深Ⅱ度烫伤;I型胶原蛋白;TNF-α;IL-1
1材料与方法
1.1材料
1.1.1选取清洁级大白兔24只，5-7个月龄雌雄不限，体重（2500±500）g，实验前单只分笼标准动物饲养（实验动物由有多多药业提供）。
1.1.2试剂、仪器
复方烫伤膏，由本实验室按配方自制；TNF-α、IL-1酶联免疫检测试剂盒，上海基免实业有限公司;数显恒温水浴锅，国华电器有限公司;精密电子天平，上海天平仪器厂；低速自动平衡离心机，长沙湘仪离心机有限公司。
1.2方法
1.2.1实验动物分组与设计
大白兔36只，每只兔背部脊柱左右两侧分别做五个烫伤模型，右侧3个创面为实验组（A组）；左侧2个创面为模型对照和阳性药物组（B组）。
1.2.2兔深Ⅱ度烫伤模型的建立
兔背以脊柱为两侧对称轴，术前一天先用10%硫化钠制剂背部脱毛，兔背部脊柱用龙胆紫画线，第二天造模时用2%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉后固定。将直径5cm铁棒置入沸水中15min，取出后用纱布擦干，轻压接触皮肤，烫15秒经病理片检验制成深Ⅱ度创面。
1.2.3给药
术后A组为复方烫伤膏高、中、低剂量治疗组(每克烫伤膏含生药0.4，0.3，0.2g)，B组为阳性药物对照组和模型对照组，阳性药物为京万红烫伤膏，模型对照组为生理盐水，外用绷带稍加压包扎固定，每日换药一次，用药后用纱布包扎。
1.2.4创面含水量测定
分别在烫伤后1、3、8、15、20d时相点，每组各取创面全层皮肤各200mg，滤纸吸干血液，电子天平称湿重后放于70℃烤箱烘烤24h，取出称干重，干湿法计算组织含水量。组织含水量=(组织湿重-组织干重)/组组织湿重×100%。
1.2.5组织创面愈合率测定
分别在烫伤后1、10、15、20d时相点采用描记称重法测定，并按下列公式计算创面愈合率：愈合率=(原始创面面积-未愈合创面面积)/原始创面面积。
1.2.6创面愈合时间测定
创面愈合时间定义为创面完全上皮化所需的时间，肉眼观察。
1.2.7TNF-α、IL-1含量测定
水平分别在烫伤后1、5、10、15、20d时相点取皮肤组织300g用组织匀浆机进行匀浆匀浆，制成50%匀浆液，于4℃下3000r/min离心20min，取上清，采用ELISA法测定TNF-α、IL-1含量，具体步骤按试剂盒说明书进行。
1.2.9采用SPSS21.0软件进行分析，应用重复测量的方差分析方法，对组内及组间表达差异进行分析。
2结果
2.1复方烫伤膏对大鼠烫伤创面组织含水量的影响
烫伤后第1天,各组烫伤组织组织含水量与模型组相比无明显差异;第3天,其他各组的组织含水量明显降低而模型组含水量下降不明显；第8天，阳性药物组和复方烫伤膏组含水量继续下降，而对照组含水量仍较高；第15天，给药组含水量仍低于对照组；20天基本愈合时，含水量继续下降但不明显，,复方烫伤膏组与模型组比较差异有显著性。
2.2复方烫伤膏对兔烫伤组织创面愈合率的影响
伤后第1天各组烫伤组织创面愈合率与模型组相比无明显差异，随着时间延续，各用药组兔创面愈合率在烫伤后呈上升趋势，复方烫伤膏中、高剂量组、京万红烫伤膏组在烫伤后第,10天创面愈合率明显升高；与模型组比较差异有显著性。表明复方烫伤膏能明显促进创面愈合，并具有一定的量效时效关系。
2.3创面愈合时间表1可见，三个剂量的复方烫伤膏均具有对创面愈合具有促进作用。
2.5复方烫伤膏对白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响表3可见，阳性药物与烫伤膏组与对照组比较TNF-a含量下降更明显差异显著。表4可见，烫伤后1d用药组IL-1含量均比正常对照组低，随着治疗的进行各组IL-1含量均下降但阳性药物组与复方烫伤膏高剂量组下降更多，与对照组比有显著性差异。
3讨论
烧烫伤为日常见的伤害，由于其多发于皮肤表面外治法直接作用于创面，起效快。本文用中国传统膏剂药物作用于兔深二度烫伤创面模型研究烫伤膏对深二度烫伤兔的抗痛、抗炎症、抗水肿、促进创面愈合的能力[1]，实验结果证明复方烫伤膏具有“活血化淤”、消炎止痛、抗感染、促进创面愈合作用。
参考文献：
[1]刘利兵,于军,张学策,等.新西兰兔烫伤模型的建立[J].第四军医大学学报,2009,30(1):86-88.