导读:本文包含了杂交型人工肝支持系统论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:血浆,支持系统,生物,支架,纤维,材料,论文。
杂交型人工肝支持系统论文文献综述
张世昌[1]（2008）在《人工肝支持系统杂交型叁维立体式生物反应器的研究》一文中研究指出肝功能衰竭是各种严重肝病的终末期表现,肝移植是肝功能衰竭治疗的最有效手段,但供肝来源的紧缺限制了肝移植的广泛使用。以培养肝细胞为材料的体外生物人工肝支持系统有望为肝功能衰竭患者等待肝移植或通过自身肝再生恢复提供过渡的“桥梁”。迄今为止,几种新型的生物人工肝已进入Ⅱ～Ⅲ期临床试验,并取得了令人鼓舞的结果。生物人工肝的叁大要素是生物反应器、肝细胞和体外装置,其中,生物反应器是生物人工肝的核心部分,其性能直接关系到生物人工肝支持治疗的效果和作用。故生物反应器的设计和构建在生物人工肝研究与临床应用中具有重要的意义。随着生物人工肝研究的不断深入,围绕着为肝细胞提供良好的生长、代谢环境和为肝功能衰竭患者血液或血浆与肝细胞相互作用、进行物质交换提供理想的场所两大基本功能,在传统中空纤维型生物反应器的基础上,一些新的生物反应器不断出现,归纳起来主要为四大类:中空纤维型、灌流式/支架型、细胞包裹/悬液型、平板式生物反应器。其中中空纤维型生物反应器具有较强的免疫阻隔和物质传输作用,但肝细胞培养效果较差,灌流式/支架型生物反应器具备良好的肝细胞培养效果,而缺乏免疫阻隔和灌流不均。如果能够将灌流式/支架型与中空纤维型生物反应器有效结合,可扬长避短,这种杂交型生物反应器尚未见研究报道。本实验设计和构建杂交型生物反应器,力求实现肝细胞培养、物质传输、免疫阻隔叁者的完美结合,提高生物反应器的性能和肝支持效果,为生物人工肝治疗肝功能衰竭提供新的实验依据。本实验选择有代表性的6种半透膜材料进行肝细胞(L02细胞)培养,通过检测细胞LDH漏出量和DNA Ladder细胞凋亡评价膜材料的细胞毒性,观察各种膜材料上L02细胞的贴壁率、细胞活性、DNA总量、总蛋白合成和CYP1A2活性等,筛选出肝细胞相容性最佳的半透膜材料用于中空纤维制备。利用非对称性冷却成型技术制备单内皮层PES平板膜和中空纤维,采用多种显微镜观察制备的平板膜和中空纤维结构,着重分析L02细胞在PES平板膜和中空纤维上的形态、生长曲线、白蛋白合成、LDL摄取、生物转化等功能,以评价制备的PES平板膜和中空纤维对肝细胞粘附、生长、增殖和功能表达的支持效果。应用一步发泡技术制备聚氨酯多孔支架材料,并与商品化的壳聚糖、聚乳酸-聚羟乙酸酯叁维支架材料对比,根据材料的肝细胞相容性、孔隙率、孔径、和物理特性等,确定用于生物反应器构建的叁维支架材料,在此基础上,进一步采用鼠尾胶原或纤维蛋白凝胶进行优化培养,以提高该支架材料对肝细胞培养的支持效果。在上述研究的基础上,构建PES中空纤维和聚氨酯多孔支架杂交的叁维立体式生物反应器。利用血浆循环评价该反应器的物质传输能力;通过纤维蛋白凝胶进行反应器内肝细胞的凝胶化培养,观察反应器内培养肝细胞的形态和分布,检测凝胶化反应器内肝细胞功能的表达,以评价反应器的性能;采用体外人工肝实验评价生物反应器对重型肝炎病人血浆的肝支持作用。本实验的主要研究结果如下:1.在各种膜材料上培养L02细胞的LDH漏出量与对照组无显着差异,提取的细胞DNA电泳未见DNA Ladder。细胞在PES膜上的贴壁率显着高于CA、PVDF、PP、CNA膜,与对照组和PSF膜无显着差异,PSF膜显着低于对照组;PES膜上贴壁细胞数明显较CA和CNA膜多,形态典型。PES和PSF膜上细胞DNA总量与对照组无显着差异,显着高于CA、PP、CNA膜,PVDF膜上细胞DNA总量显着低于对照组;在7天的培养时间内,PES膜上和对照组的细胞活性最高,显着高于CA、PVDF、PP、CNA膜。PES膜上培养L02细胞合成的细胞总蛋白与对照组无显着差异,显着高于其它膜材料;各种膜材料上培养L02细胞CYP1A2活性均高于对照组。2.制备的PES平板膜和中空纤维的横截面由大量纵向排列的指状孔构成,指状孔开口于外表面形成有大量微孔的粗糙面,封闭于的内表面形成致密层和光滑面。PES膜上L02细胞的生长曲线典型,在8d的培养时间能增殖6至7倍,中空纤维上培养的L02细胞可长满中空纤维表面;细胞在PES膜和中空纤维上粘附呈多细胞聚集生长,可覆盖材料表面,部分细胞延伸入表面微孔内。PES膜和中空纤维上培养细胞LDH漏出量与对照无显着差异。PES膜和中空纤维上培养L02细胞的白蛋白合成量持续升高,在第8天反超对照组细胞;在DiI-Ac-LDL摄取实验中,PES膜和中空纤维上培养L02细胞内红色荧光强度与对照无明显差异,在戊醚试卤灵转化实验中,PES膜和中空纤维上培养L02细胞内红色荧光强度比对照组高。3.制备出高孔隙率和有弹性的聚氨酯多孔支架材料,壳聚糖易塌陷变形,聚乳酸-聚羟乙酸酯质地较硬,提示聚氨酯更容易与中空纤维组合。L02细胞在聚氨酯和壳聚糖支架材料内的细胞接种率显着高于聚乳酸-聚羟乙酸酯,壳聚糖内的细胞接种率最高;L02细胞在聚氨酯和聚乳酸-聚羟乙酸酯内均粘附微孔壁生长,在聚氨酯内分布更均匀,在壳聚糖内呈多细胞聚集生长;聚氨酯和壳聚糖内培养L02细胞的活性和白蛋白合成量显着高于聚乳酸-聚羟乙酸酯,聚氨酯和壳聚糖之间无显着差异。鼠尾胶原被覆组和对照组的L02细胞均在聚氨酯材料微孔内贴壁生长,鼠尾胶原被覆组的贴壁细胞数量明显高于聚氨酯对照组,纤维蛋白凝胶组培养的L02细胞均匀分布在材料微孔内,呈多细胞球形体生长;纤维蛋白凝胶组L02细胞的活性在7d内显着升高,在3、5、7d均显着高于聚氨酯对照组和纤维蛋白凝胶组;纤维蛋白凝胶组L02细胞的白蛋白合成量逐渐升高,在培养的第5和7d显着高于鼠尾胶原被覆组和聚氨酯对照组。4.以单内皮层PES中空纤维和聚氨酯材料为骨架构建出杂交型叁维立体式生物反应器。在物质传输实验中,杂交型生物反应器内外腔总胆红素和白蛋白浓度达到平衡分别需10min和15min,与对照组无明显差异,凝胶化杂交型反应器内总胆红素和白蛋白浓度达到平衡较对照组延缓5min,但30min内能完全达到平衡,提示构建的反应器具有良好的物质传输能力,凝胶化对反应器物质传输的无显着影响。凝胶化培养反应器内肝细胞呈球形体生长,较对照组分布更均匀;反应器凝胶化培养可恢复肝细胞CYP3A4和UGT1A mRNA的表达;凝胶化反应器内肝细胞的白蛋白合成、尿素合成、氨清除率均持续稳定上升,在培养后期显着高于对照组,LDH漏出量较对照组更低,有较强的CYP1A2活性;凝胶化反应器内重型肝炎病人血浆循环实验发现,经6h的体外循环,病人血浆中总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、总胆汁酸、氨等的含量均显着降低。在循环病人血浆中ALT、ALP、GGT等酶无显着影响,但AST和LDH持续升高。以上结果提示:①在PES、PSF、CA、PVDF、PP、CNA等半透膜材料中,PES是肝细胞相容性最佳的半透膜材料,适宜用于生物反应器中空纤维的制备。②制备的PES平板膜和中空纤维具备单内皮层、指状孔、外表面粗糙、内表面光滑、非对称性的特点,能够较好的支持肝细胞的粘附、生长、增殖和功能的表达。③制备出高孔隙率有弹性的聚氨酯支架材料,与肝细胞有较好的细胞相容性,纤维蛋白凝胶能有效优化聚氨酯材料内肝细胞培养条件,提高培养肝细胞活性和功能的稳定表达。④成功的构建出杂交型叁维立体式生物反应器,该反应器具有良好的物质传输能力,凝胶化生物反应器能够培养大量、高密度、合成功能和生物转化功能稳定的肝细胞,该反应器能有效清除重型肝炎病人血浆内胆红素、氨、胆汁酸等。据此推测,该生物反应器有可能对重型肝炎患者的治疗具备一定的肝支持效果。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2008-05-01）
罗二平[2]（2002）在《杂交型人工肝支持系统治疗重型肝炎的临床研究》一文中研究指出目的 通过对杂交型人工肝支持系统治疗重型肝炎的临床研究，探讨其临床治疗价值、适应症、组合模式。 方法 研究对象分为对照组、血浆置换组、杂交型人工肝治疗组。对照组仅接受综合基础疗法；血浆置换组接受综合基础疗法+血浆置换；杂交型人工肝治疗组分治疗1组、2组，按组合模式不同分别接受综合基础疗法+血浆灌流十生物型人工肝、综合基础疗法+血浆置换+血浆灌流+生物型人工肝。记录分离出的肝细胞的数量和活性，观察患者临床表现的改变及转归，检测治疗前后BIL-T、BIL-D、PT血氨等指标。 结果 每只乳猪收获肝细胞100～150g，细胞数为0.76～1.14x10~(10)，活细胞占92％，体外培养12小时后活细胞占90％，治疗结束后活细胞占80％。 杂交型人工肝治疗组、血浆置换组患者在治疗后临床症状明显好转；血氨下降，昏迷程度减轻，杂交型人工肝治疗组肝性脑病苏醒率(50％)高于其它二组。杂交型人工肝治疗组、血浆置换组在治疗后患者肝功能好转(血清BIL-T、BIL-D、TBA低于治疗前，P＜0.05)；PTA治疗后高于治疗前，P＜0.05。其中杂交型人工肝治疗2组血清BIL-T治疗后明显低于治疗前，P＜0.01，与治疗1组相比，P值=0.03BIL-D／BIL-T治疗后高于治疗前，P=0.02，；杂交型人工肝治疗2组凝血酶原活动度明显增高(治疗前后比较P＜0.01)，与对照组组间相比P=0.08；杂交型人工肝治疗2组晚期重型肝炎存活率40.0％，高于杂交型人工肝治疗1组(20.0％)、血浆置换组(25.0％)、对照组(0％)。 结论 1．以生物型人工肝为核心的杂交型人工肝支持系统具有肝脏的生物合成、代谢、解毒等功能；2．由血浆置换、血浆灌流和生物人工肝组成的杂交型人工肝支持系统的组合模式能充分替代肝脏功能，治疗过程安全有效，能提高晚期重型肝炎患者的存活率。(本文来源于《苏州大学》期刊2002-04-01）
杂交型人工肝支持系统论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 通过对杂交型人工肝支持系统治疗重型肝炎的临床研究，探讨其临床治疗价值、适应症、组合模式。 方法 研究对象分为对照组、血浆置换组、杂交型人工肝治疗组。对照组仅接受综合基础疗法；血浆置换组接受综合基础疗法+血浆置换；杂交型人工肝治疗组分治疗1组、2组，按组合模式不同分别接受综合基础疗法+血浆灌流十生物型人工肝、综合基础疗法+血浆置换+血浆灌流+生物型人工肝。记录分离出的肝细胞的数量和活性，观察患者临床表现的改变及转归，检测治疗前后BIL-T、BIL-D、PT血氨等指标。 结果 每只乳猪收获肝细胞100～150g，细胞数为0.76～1.14x10~(10)，活细胞占92％，体外培养12小时后活细胞占90％，治疗结束后活细胞占80％。 杂交型人工肝治疗组、血浆置换组患者在治疗后临床症状明显好转；血氨下降，昏迷程度减轻，杂交型人工肝治疗组肝性脑病苏醒率(50％)高于其它二组。杂交型人工肝治疗组、血浆置换组在治疗后患者肝功能好转(血清BIL-T、BIL-D、TBA低于治疗前，P＜0.05)；PTA治疗后高于治疗前，P＜0.05。其中杂交型人工肝治疗2组血清BIL-T治疗后明显低于治疗前，P＜0.01，与治疗1组相比，P值=0.03BIL-D／BIL-T治疗后高于治疗前，P=0.02，；杂交型人工肝治疗2组凝血酶原活动度明显增高(治疗前后比较P＜0.01)，与对照组组间相比P=0.08；杂交型人工肝治疗2组晚期重型肝炎存活率40.0％，高于杂交型人工肝治疗1组(20.0％)、血浆置换组(25.0％)、对照组(0％)。 结论 1．以生物型人工肝为核心的杂交型人工肝支持系统具有肝脏的生物合成、代谢、解毒等功能；2．由血浆置换、血浆灌流和生物人工肝组成的杂交型人工肝支持系统的组合模式能充分替代肝脏功能，治疗过程安全有效，能提高晚期重型肝炎患者的存活率。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
杂交型人工肝支持系统论文参考文献
[1].张世昌.人工肝支持系统杂交型叁维立体式生物反应器的研究[D].第叁军医大学.2008
[2].罗二平.杂交型人工肝支持系统治疗重型肝炎的临床研究[D].苏州大学.2002