论文摘要
GRF （growth regulating factor）是一类植物特有的转录因子,其参与调节植物生长、发育以及抗逆等过程。本研究以高粱BTx623为材料,以cDNA为模板扩增全长SbGRF4基因,并对其进行生物信息学及原核表达分析。结果表明,SbGRF4全长1 221bp,编码406个氨基酸,蛋白理论分子大小约为44kDa,蛋白质等电点为7.05。进化树分析表明,SbGRF4与玉米GRF4的亲缘性较高;蛋白质序列分析表明,SbGRF4蛋白为亲水性蛋白,定位在细胞核中;二级结构预测发现其α螺旋和无规则卷曲占比最高,分别达到25.37%和64.04%。为获得SbGRF4可溶性蛋白,构建了pET-28a-SbGRF4重组质粒进行原核表达,分别对表达菌株、诱导温度以及IPTG诱导浓度进行优化。结果显示,SbGRF4最佳表达菌株为JM109 （DE3）菌株,最佳诱导温度为25℃,最佳IPTG诱导浓度为0.6mmol/L,最后用Western blot对表达的SbGRF4蛋白进行验证。本研究为进一步研究高粱SbGRF4蛋白的结构和功能奠定基础,通过对该基因的表达研究,可为后续研究高粱GRF转录因子提供一定的科学基础。
论文目录
文章来源
类型: 国内会议
作者: 陈俊,屈志广,陈美晴,蒋君梅,李向阳,谢鑫
关键词: 高粱,基因克隆,转录因子,原核表达
来源: 中国植物保护学会2019年学术年会 2019-10-23
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学,生物学,农作物
单位: 贵州大学农学院贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室
分类号: S514;Q943.2
页码: 299-311
总页数: 13
文件大小: 1870k
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