丛枝菌根菌丝桥介导脱落酸(ABA)信号在番茄植株间的传递

丛枝菌根菌丝桥介导脱落酸(ABA)信号在番茄植株间的传递

论文摘要

干旱是影响植物生长发育最主要的逆境胁迫之一。与此同时,植物在长期的进化和抵抗逆境过程中,形成了一系列的抗逆机制,其中脱落酸(abscisic acid,ABA)在植物应对干旱等非生物胁迫中发挥信号中枢的作用。课题组以往的研究表明,植物根系间广泛存在的丛枝菌根菌丝桥可以介导植物间抗病和抗虫信号的传递,然而,丛枝菌根菌丝桥能否介导脱落酸(ABA)信号在番茄植株间的传递仍然不清楚。事实上,植物及时而有效地感知周围环境的干旱等非生物胁迫对植物抵御干旱等胁迫至关重要。本研究采用分室隔板法,以番茄为材料,利用丛枝菌根真菌(arbuscular mycorrhizal fungus,AMF)根内根生囊霉(Rhizophagus irregularis)在番茄植株间建立菌根菌丝桥(Arbuscular mycorrhizal network,AMNs),对供体番茄喷施脱落酸处理,然后检测受体番茄植株抗旱性的变化,并检测包括生长发育指标(株高和干重)、叶片气体交换参数(净光合速率Pn、气孔导度gs、胞间CO2浓度Ci和蒸腾速率Tr)、保护酶活性(超氧化物歧化酶SOD和过氧化物酶POD)、渗透调节物质(脯氨酸Pro和可溶性糖)、膜脂过氧化物质(丙二醛MDA)以及脱落酸合成和信号传导途径关键基因表达等方面的变化,初步揭示丛枝菌根菌丝桥可介导脱落酸信号在番茄植株间进行传递。主要研究结果如下:(1)丛枝菌根真菌接种到供体番茄植物根系35 d后,通过台盼蓝染色、WGA-488荧光染色以及菌根侵染率统计分析,在供体和受体番茄根系中均检测到丛枝、泡囊、菌丝等结构,且菌根侵染率均达到38%以上,说明供体和受体番茄间已经成功建立丛枝菌根菌丝网络;(2)供体番茄喷施100μM ABA 24 h后,处理组A受体番茄植株(与供体有菌根菌丝网络连接)的气孔导度(gs)、胞间CO2浓度(Ci)和蒸腾速率(Tr)均显著下降,植物水分利用效率(WUE)显著提高,这可能是由于A受体番茄通过菌丝桥感知到AMNs介导传递的干旱胁迫信号,进而调节叶片气孔关闭,减少水分的耗散,提高水分利用率利用效率;而处理组A受体番茄植株(与供体有菌根菌丝网络连接)除了在24 h时的POD活性会显著高于B、C、D处理组之外,各处理组受体之间的SOD活性、MDA含量及可溶性糖含量均没有显著性差异,也就是说供体植株喷施ABA对受体植株没有很明显的直接诱导作用;供体番茄喷施100μM ABA后,相较于B、C、D处理组,处理组A受体番茄植株(与供体有菌根菌丝网络连接)根系中ABA合成途径基因SlAO和SlDXR显著被诱导。(3)供体番茄喷施100μM ABA后,再对受体番茄进行缺水干旱处理,发现处理组A受体番茄的抗旱能力明显增强,与其他对照相比,整株植物比较挺立,生长正常。处理组A受体番茄植株(与供体有菌根菌丝网络连接)的保护酶POD和SOD活性能迅速升高并显著高于B、C、D处理组,而丙二醛含量(MDA)则显著低于B、C、D处理组,说明供体番茄喷施ABA后干旱信号通过AMNs传递到受体番茄后,会诱导受体番茄处于防御警备状态,最终提高受体番茄应对干旱胁迫的能力;本论文揭示了植物可以借助菌根菌丝网络在植物之间进行干旱信号传递的自然奥秘,由于该网络在土壤与植物群落中广泛存在,这使植物能够提前感知到周围环境中的干旱胁迫信号,促使植物提前做好抗旱准备,进而提高植物的抗旱能力。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 前言
  •   1.1 植物抗逆性研究进展
  •   1.2 脱落酸生物合成及功能
  •   1.3 丛枝菌根真菌与植物的抗旱性
  •   1.4 菌根菌丝网络的生态学功能
  •   1.5 本项目的研究意义
  •   1.6 试验技术路线
  • 第二章 材料与方法
  •   2.1 试验材料
  •   2.2 主要试剂及仪器
  •     2.2.1 主要试剂
  •     2.2.2 主要仪器
  •   2.3 试验设计
  •     2.3.1 菌根菌丝桥的建立
  •     2.3.2 实验设计
  •   2.4 AMF菌种的扩繁及实验材料的种植
  •     2.4.1 AMF菌种的扩繁
  •     2.4.2 试验材料种植容器的加工
  •     2.4.3 番茄的种植
  •   2.5 菌根侵染率的观察和计算方法
  •     2.5.1 菌根侵染率的观察
  •     2.5.2 菌根侵染率的计算方法
  •   2.6 生物量测定
  •   2.7 气体交换参数的测定
  •   2.8 ABA、丙二醛、脯氨酸和可溶性糖含量测定方法
  •     2.8.1 ABA含量的测定
  •     2.8.2 丙二醛含量的测定
  •     2.8.3 脯氨酸含量的测定
  •     2.8.4 可溶性糖的测定
  •   2.9 酶活性测定方法
  •     2.9.1 酶液的制备
  •     2.9.2 超氧化物歧化酶活性的测定
  •     2.9.3 过氧化物酶活性的测定
  •   2.10 基因相对表达量
  •     2.10.1 番茄总RNA的提取
  •     2.10.2 cDNA的合成
  •     2.10.3 荧光定量
  •   2.11 数据处理及统计方法
  • 第三章 结果与分析
  •   3.1 菌根染色结果
  •     3.1.1 供体番茄和受体番茄根系菌根侵染率
  •     3.1.2 台盼蓝及WGA-488 荧光染色检测番茄根系菌根侵染情况
  •   3.2 ABA处理供体植株对供体植株的影响
  •     3.2.1 AMNs对供受体植物生长的调节作用
  •     3.2.2 ABA处理供体植株对供体植株叶片气体交换参数的影响
  •     3.2.3 ABA处理对供体植株保护酶活性的影响
  •     3.2.4 ABA处理供体植株对供体植株ABA含量的影响
  •     3.2.5 ABA处理供体植株对供体植株渗透调节物质的影响
  •   3.3 ABA处理供体植株对受体植株的影响
  •     3.3.1 ABA处理供体植株对受体植株叶片气体交换参数的影响
  •     3.3.2 ABA处理供体植株对受体植株保护酶活性的影响
  •     3.3.3 ABA处理供体植株对受体植株渗透调节和膜脂过氧化物质的影响
  •     3.3.4 ABA处理供体植株对受体植株ABA含量的影响
  •     3.3.5 ABA处理供体植株对受体植株ABA合成途径基因表达的影响
  •     3.3.6 ABA处理供体植株对受体番茄根系水孔通道蛋白基因表达的诱导
  •     3.3.7 ABA处理供体植株对受体番茄根系独角金内酯(SLs)合成途径基因表达的诱导
  •   3.4 ABA处理供体植株对受体植株耐旱性的影响
  •     3.4.1 对受体番茄植株缺水干旱后表型的影响
  •     3.4.2 对受体番茄植株保护酶活性的影响
  •     3.4.3 对受体番茄植物渗透调节物质的影响
  •     3.4.4 对受体植株SPAD的影响
  • 第四章 讨论与结论
  •   4.1 讨论
  •   4.2 结论
  •     4.2.1 丛枝菌根真菌能在供体番茄和受体番茄间建立菌根菌丝网络
  •     4.2.2 ABA处理供体番茄植株可产生诱导抗旱反应
  •     4.2.3 供体喷施ABA对受体番茄胞间CO2浓度降低和水分利用率升高
  •     4.2.4 供体喷施ABA对受体番茄叶片膜脂过氧化及渗透调节物质的影响
  •     4.2.5 供体喷施ABA对受体番茄叶片保护酶活性的影响
  •     4.2.6 供体喷施ABA对受体番茄激素途径基因和水通道蛋白基因表达的影响
  •     4.2.7 受体番茄再次干旱胁迫后其复水的表型
  •   4.3 展望
  •     4.3.1 创新之处
  •     4.3.2 进一步深入的问题
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间的学术论文与研究成果
  • 致谢
  • 附录
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 刘婷婷

    导师: 宋圆圆

    关键词: 丛枝菌根菌丝网络,脱落酸,信号传递,根内根生囊霉,番茄

    来源: 福建农林大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,园艺

    单位: 福建农林大学

    分类号: S641.2;Q935

    总页数: 71

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