导读:本文包含了灭活因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:因子,灭活,病毒,凝血,血浆,分枝,杆菌。
灭活因子论文文献综述
黄娟,李德款,武志强,宋春雷,李成[1]（2019）在《重组人凝血因子Ⅷ病毒灭活/去除工艺验证》一文中研究指出目的验证重组人凝血因子Ⅷ(recombinant human coagulationⅧ,rhFⅧ)病毒灭活/去除工艺。方法采用S/D法作为rhFⅧ病毒灭活工艺,纳米过滤(20 nm孔径)作为rhFⅧ病毒去除工艺,分析病毒灭活/去除两步工艺对rhFⅧ活性的影响;分别以伪狂犬病毒(pseudorabies virus,PRV)、水疱性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)、小鼠白血病病毒(xenotropic murine leukemia virus,X-MuLV)及小鼠细小病毒(murine minute virus,MMV)作为指示病毒,对上述工艺进行病毒灭活/去除效果验证。结果 S/D灭活工艺中,3批制品的活性收率分别为96. 2%、100. 4%和103. 2%;(24±2)℃处理180 min后,指示病毒PRV、VSV和X-MuLV滴度降低量(Log10)虽然均<4,但盲传3代,仍未检出病毒。纳米过滤工艺中,3批制品蛋白回收率均大于98%,活性回收率均大于90%,纳米过滤120 min,MMV滴度降低量(Log10)> 4。结论建立的rhFⅧ病毒灭活/去除工艺,可有效灭活/去除病毒,保证制品的质量和安全。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年12期）
郭芸芸,张雪寒,刘茂军,王警,牛家强[2]（2019）在《猪肺炎支原体纤毛黏附因子P97和F7-CTB对O型口蹄疫灭活疫苗的免疫增强作用》一文中研究指出旨在研究猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,简称Mhp)纤毛黏附因子P97以及F7鞭毛蛋白(flagellin,简称F)-霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit,简称CTB)2种重组蛋白对口蹄疫(foot-and-mouth disease,简称FMD)灭活疫苗的免疫增强作用。通过体外表达获得pCold-F7-CTB、pET32a-P97-R1 2种重组蛋白,用间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA)方法检测pCold-F7-CTB蛋白的生物学活性,将重组蛋白分别与口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,简称FMDV)灭活抗原、口蹄疫灭活疫苗混合制备,皮下或腹腔接种Balb/c小鼠,共免疫2次,间隔3周。分别于免疫前、免疫后21、35、49 d采血,49 d后无菌摘取脾脏。采用阻断ELISA的方法检测小鼠血清口蹄疫O型病毒免疫球蛋白(IgG)抗体滴度,用流式细胞术检测脾淋巴细胞亚型比例,以评估免疫效力。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western Blot)分析结果表明,2种重组蛋白成功表达。用GMl(神经节苷脂)-ELISA方法验证pCold-F7-CTB的生物学活性,发现融合蛋白F7-CTB保留了与GMl的结合能力。小鼠免疫试验结果表明,经皮下注射接种后,单独口蹄疫病毒灭活抗原组没有产生明显的抗体水平,而F7-CTB免疫增强剂组比单独口蹄疫病毒灭活抗原组的IgG滴度更高。在试验中发现,当重组蛋白与口蹄疫灭活疫苗联合使用时,血清中的IgG滴度明显增高,CD3~+CD8~+T淋巴细胞比值上升;P97和F7-CTB混合使用对口蹄疫灭活疫苗的免疫增强效果最佳。可以初步得出,免疫增强剂P97和F7-CTB具有协同作用,皮下注射可显着提高FMD的特异性IgG水平,CD3~+CD8~+T淋巴细胞比值升高,显示其具有良好的应用前景。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年11期）
齐心欣,顾忠民,姚雯[3]（2018）在《雾化吸入灭活草分枝杆菌对脓毒症急性肺损伤大鼠Toll样受体4及核因子-kappa B表达的影响》一文中研究指出目的:分析脓毒症急性肺损伤大鼠以雾化吸入灭活草分枝杆菌治疗后,其Toll样受体4(TLR4)、核因子-kappa B(NF-κB)水平表达情况。方法:选取健康清洁级Wistar大鼠48只随机分为对照组和观察组,每组24只,其中对照组5ml生理盐水雾化吸入+盲肠结扎穿刺行脓毒症急性肺损伤造模,观察组大鼠雾化吸入草分枝杆菌F. U. 36注射液后造模,于术后1d、2d取大鼠肺组织以RT-PCR法对TLR4、NF-κB进行检测,比较两组大鼠不同时间段内TLR4、NF-κB水平变化差异。结果:观察组术后1d、2d TLR4相对表达量高于对照组(P <0. 05);术后1d、2d观察组NF-κB相对表达量低于对照组(P <0. 05)。结论:脓毒症急性肺损伤时大鼠TLR4、NF-κB表达增强,雾化吸入灭活草分枝杆菌后NF-κB表达降低,提示此药通过影响炎症信号通路蛋白表达,从而减轻患者病情。(本文来源于《医学理论与实践》期刊2018年23期）
李刚,刘怡,吴润晖,陈振萍[4]（2018）在《血浆热灭活处理在Nijmegen法检测遗传性凝血因子Ⅷ抑制物中的应用》一文中研究指出目的评价血浆样本热灭活处理在Nijmegen法检测遗传性凝血因子Ⅷ(FⅧ)抑制物中的应用价值。方法同时应用Nijmegen法及增加热灭活步骤的Nijmegen法检测52例中、重型血友病A(HA)患儿血浆中FⅧ抑制物滴度。以抑制物滴度≥0.60BU判为阳性结果,对两种方法检测结果的阳性率及抑制物滴度水平进行分析。结果两种方法的抑制物阳性率检测差异无统计学意义(P>0.05),但有2例中间型HA患儿的血浆用原方法检测为阴性但热灭活处理后检测为阳性。两种方法检测的抑制物滴度水平呈显着的正相关(r=0.990 8,P<0.000 1)。在两种方法检测均为抑制物阴性的患儿中,血浆热灭活处理组的抑制物滴度[0.37(0.17,0.48)BU]明显高于无热灭活处理组[0.12(0.02,0.34)BU],差异有统计学意义(P<0.01);而在抑制物阳性组,两种方法的检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论待测血浆样本热灭活处理在Nijmegen法检测FⅧ抑制物检测中的结果可信,且检测前增加血浆热灭活处理步骤可提高检测的灵敏度。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2018年16期）
李冬梅,是翡,郭慧,吴玮,吴晓文[5]（2018）在《干热法对人血浆血管性假血友病因子冻干品中病毒灭活效果的观察》一文中研究指出目的探讨干热灭活法(dry heat treatment)对血管性假血友病因子(von willebrand factor,v WF)中猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)和脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)的灭活效果。方法以PPV或EMCV作为灭活指示病毒与v WF混合,并分别在(80±1)℃4、8、12、24、36、48、72 h,(90±1)℃4、12、24、36、48 h以及(99±1)℃5、15、30 min进行干热灭活处理。将在干热灭活前以及干热灭活后不同温度时间段的v WF样品接种ST细胞(swine testis)或Vero细胞培养,观察细胞病变(cytopathic effect,CPE),用Reed-Muench法计算残余PPV和EMCV的病毒滴度。对无CPE的样品进行盲传3代培养,验证其灭活效果,并检测干热处理前后的v WF活性。结果v WF中EMCV滴度在(80±1)℃、(90±1)℃以及(99±1)℃灭活条件下,均下降超过4.0 lg TCID_(50)/0.1 m L,v WF中PPV的滴度下降也均超过4.0 lg TCID_(50)/0.1m L。干热法灭活后v WF的活性下降<20%,质量稳定。结论干热法可以灭活v WF中的PPV以及EMCV,且对样品的活性影响在允许范围之内。(本文来源于《微生物学免疫学进展》期刊2018年03期）
刘位位[6]（2018）在《转录因子T-bet/GATA-3对哮喘小鼠Th1/Th2调节作用及灭活草分枝杆菌的干预研究》一文中研究指出目的探讨雾化吸入灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠T-bet/GATA-3表达的影响,了解草分枝杆菌的免疫调节作用。方法将24只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组(A组)、哮喘组(B组)、治疗组(C组),每组8只。哮喘组和治疗组于第0天、第7天和第14天用25μgOVA和1mg氢氧化铝混合于PBS中的0.2ml混悬液腹腔注射小鼠,第21至27天用2%OVA·PBS雾化激发小鼠,每天30min,治疗组在第28天至第32天雾化吸入1支灭活草分枝杆菌稀释于10ml的生理盐水中,每日1次。对照组则用生理盐水代替腹腔注射和雾化激发,哮喘组用生理盐水代替灭活草分枝杆菌雾化治疗,雾化过程中观察小鼠的行为及活动情况等变化。最后一次雾化12h内测小鼠气道反应性,24h内将小鼠处死,支气管肺泡灌洗液(BALF),左肺组织病理切片行HE染色和PAS染色观察小鼠肺内炎症改变,参照文献方法行病理半定量评分,明确各组小鼠气道炎症严重程度;肺组织病理切片行免疫组化观察T-bet和GATA-3的表达量;ELISA法检测BALF中IFN-γ和IL-4表达水平;实时荧光定量PCR检测肺组织中T-bet、GATA-3、STAT1、STAT6mRNA水平;流式细胞术检测肺组织单个核Th1、Th2细胞占CD4~+T细胞百分比。结果哮喘组小鼠在雾化激发过程中出现典型的哮喘表现症状。哮喘组在12.5mg/ml、25mg/ml以及50mg/ml浓度Mch激发后sRaw明显高于对照组(p<0.05),同时也高于治疗组(p<0.05),治疗组在25mg/ml以及50mg/ml浓度Mch激发后sRaw明显高于对照组(p<0.05)。肺组织HE染色发现,治疗组与哮喘组对比,支气管周围炎症细胞浸润减少,PAS染色发现治疗组管腔中杯状细胞较哮喘组明显减少;免疫组化发现哮喘组中的T-bet明显低于对照组,GATA-3明显高于对照组,治疗组中的T-bet明显高于哮喘组,GATA-3明显低于哮喘组,差异均具有统计学意义(p<0.05);哮喘组中IFN-γ、肺及脾组织中T-bet、STAT1 mRNA表达水平和Th1细胞百分比与对照组相比明显降低(p<0.05),IL-4、GATA-3及STAT6 mRNA表达水平和Th2细胞百分比较对照组明显升高(p<0.05);治疗组IFN-γ、肺组织中T-bet、STAT1mRNA表达水平和Th1细胞百分比较哮喘组明显升高(p<0.05),IL-4、GATA-3及STAT6 mRNA表达水平和Th2细胞百分比较哮喘组明显降低(p<0.05)。相关性分析发现,小鼠肺组织中T-bet mRNA与Th1细胞百分比呈明显正相关(r=0.70,p<0.01),GATA-3 mRNA与Th2细胞百分比呈明显正相关(r=0.76,p<0.01)。结论T-bet在哮喘中表达水平降低,GATA-3在哮喘中的表达升高,提示T-bet/GATA-3参与哮喘小鼠的发病过程,哮喘小鼠Th1/Th2失衡可能与转录因子T-bet/GATA-3失衡有关。雾化吸入灭活草分枝杆菌可以减轻哮喘小鼠气道炎症,通过调节转录因子水平,增加T-bet mRNA而降低GATA-3mRNA表达,进而抑制Th2细胞因子分泌。目的探讨灭活草分枝杆菌对哮喘小鼠γδT细胞的影响,了解草分枝杆菌的免疫调节作用。方法将24只雄性Balb/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、治疗组,每组8只。哮喘组和治疗组于第0天、第7天和第14天用25μg OVA和1mg氢氧化铝混合于PBS中的0.2ml混悬液腹腔注射小鼠,第21至27天用2%OVA·PBS雾化激发小鼠,每天30min,治疗组在第28天至第32天雾化吸入1支灭活草分枝杆菌稀释于10ml的生理盐水中,每日1次。对照组则用生理盐水代替腹腔注射和雾化激发,哮喘组用生理盐水代替灭活草分枝杆菌雾化治疗,雾化过程中观察小鼠的行为及活动情况等变化。24h内将各组小鼠处死,取肺及脾组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),左肺组织病理切片行HE染色和过碘酸-雪夫染色(PAS染色)观察小鼠肺内炎性细胞浸润情况及杯状细胞增生情况,明确各组小鼠气道炎症严重程度;ELISA法检测BALF中IFN-γ和IL-4表达水平;流式细胞术检测肺组织单个核细胞IFN-γ、IL-4细胞占γδT细胞百分比。免疫磁珠法分选纯化哮喘组小鼠脾γδT细胞,分为空白对照组(A组)、OVA组(B组)和草分枝杆菌干预组(C组),48小时后收集细胞,流式细胞术检测γδT细胞的IFN-γ及IL-4表达情况。结果哮喘组小鼠在雾化激发过程中出现典型的哮喘表现症状。肺组织HE染色发现,与哮喘组相比,治疗组支气管周围炎症细胞浸润减少,PAS染色发现治疗组管腔中杯状细胞较哮喘组明显减少。ELISA结果显示,哮喘组BALF中的IFN-γ表达降低,IL-4表达升高,与对照组相比,其差异均有统计学意义(p<0.05);治疗组BALF中的IFN-γ表达水平明显升高,IL-4明显降低,与哮喘组相比,其差异均有统计学意义(p<0.05)。流式细胞术检测发现,哮喘组肺组织中的γδT细胞表达IFN-γ明显降低,IL-4明显升高,与对照组对比,差异有统计学意义(p<0.05);治疗组肺组织中的γδT细胞表达IFN-γ明显升高,IL-4明显降低,与哮喘组对比,差异有统计学意义(p<0.05)。体外实验显示,B组γδT细胞表达IL-4增多,IFN-γ降低,与A组相比,差异具有统计学意义(p<0.05);C组γδT细胞表达IL-4减少,IFN-γ增多,与B组对比,差异具有统计学意义(p<0.05)。结论致敏小鼠γδT细胞表达IL-4增多,IFN-γ减少,表明γδT细胞同样存在γδT1/γδT2失衡,并呈γδT2优势表达。灭活草分枝杆菌可通过γδT细胞促进IFN-γ表达,抑制IL-4表达,调节γδT1/γδT2失衡。(本文来源于《广西医科大学》期刊2018-05-01）
杨梅[7]（2017）在《亚甲蓝病毒灭活血浆制备方法及对凝血因子的影响研究》一文中研究指出目的:探讨亚甲蓝病毒灭活血浆制备方法及对凝血因子的影响。为临床使用病毒灭活血浆治疗提供剂量及安全使用依据。为病毒灭活血浆推广提供理论基础。方法:选取100份全血分离制备的血浆进行病毒灭活前后留样,制成新鲜冰冻血浆后融化,采用亚甲蓝光化学法检测灭活前后各成分及凝血因子活性的变化。结果:灭活前纤维蛋白原为(2.24±0.12)mg/m L、凝血VIII因子为(0.78±0.09)IU/m L、凝血酶原时间为(14.02±2.63)S,活化的部分凝血活酶时间APTT为(34.62±4.76)S。残留白细胞计数(3.0±2.1)×10~6/L灭活后纤维蛋白原为(2.10±0.14)mg/m L、凝血VIII因子为(0.71±0.10)IU/m L、凝血酶原时间为(14.14±2.75)S,活化的部分凝血活酶时间(APTT)为(34.88±4.86)S。残留白细胞计数(7.4±1.4)×104/L,经过数据统计学分析发现,采用亚甲蓝光法病毒灭活血浆后纤维蛋白原、凝血VIII因子、凝血酶原时间等指标无显着的变化。残留白细胞计数明显降低。结论:采用亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对凝血因子活性影响在合理范围之内,病毒灭活后血浆临床使用比较安全、有效。(本文来源于《中国医疗器械信息》期刊2017年22期）
宋春明,李晓华,王文经,刘奎民,郑婷婷[8]（2017）在《病毒灭活新鲜冰冻血浆二次冻融前后凝血因子的变化》一文中研究指出目的探讨病毒灭活新鲜冰冻血浆(病毒灭活FFP)二次冻融前后,凝血因子间的差别,为规范临床操作,指导科学合理的安全输注血浆制品提供依据。方法随机抽取30份病毒灭活FFP,37℃水浴融化后,于0h、6h、12h、24h 4个时间段置于-50℃血浆速冻柜冰冻,测定二次冻融前后凝血指标和类凝血因子[凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、凝血酶时间(TT)、凝血因子Ⅷ(FⅧ)]变化情况。结果病毒灭活FFP经各时段二次冻融前后,凝血指标中PT、TT、FIB变化不大,而APTT时间平均延长5.8%;FⅧ因子活性随着融化时间的推移,数值下降明显(P<0.01)。结论为保证凝血因子活性,临床科室应按照输血指征要求合理预定病毒灭活FFP,一旦水浴融化,应当立即进行输注,避免二次冻融。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2017年09期）
刘芳[9]（2017）在《病毒灭活新鲜冰冻血浆制备前后凝血因子变化研究》一文中研究指出目的研究病毒灭活制备新鲜冰冻血浆前后凝血因子差异,为以后制备血浆制品奠定基础。方法依据处理方式不同将某医院自2015年12月—2016年12月期间收治的42份新鲜冰冻血浆随机分为两组,即为参照组(n=21)与实验组(n=21),予以常规处理样本数据作为参照组,实行病毒灭活制备新鲜冰冻血浆样本作为实验组,对两组样本经不同干预之后组建数据差异予以分析。结果实验组样本资料在凝血酶原时间(14.23±2.31)s、血浆纤维蛋白原(2.41±0.68)g/L、凝血酶时间(22.65±6.35)s等方面对比参照组数据,差异无统计学意义(P>0.05)。实验组样本资料在凝血因子VII(85.64±10.21)%、活化部分凝血酶原时间(58.65±5.23)s等指标与参照组数据进行对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论病毒灭活制备新鲜冰冻血浆虽然降低了凝血因子含量,但是也仍然超过国家标准,这种病毒灭活方式制备之后可以确保提升注射安全性,可以根据临床实际情况合理选择。(本文来源于《中国卫生产业》期刊2017年23期）
郭乾鹏[10]（2017）在《益生屎肠球菌活菌和热灭活菌调节仔猪小肠黏膜紧密连接蛋白、细胞因子以及相关的Toll样受体的研究》一文中研究指出屎肠球菌是仔猪生产中常用的益生菌,但是其作用机理尚不清楚。为了更充分地了解屎肠球菌对仔猪小肠黏膜先天防御屏障功能的影响,本研究用屎肠球菌活菌和热灭活菌对新生仔猪进行试验,并研究它们对猪肠上皮细胞的影响。动物试验选用窝产仔数和体重相近、胎次和出生时间相同的9窝仔猪,随机分为3个组,每组3窝仔猪。从出生开始,对照组、活菌组和灭活菌组仔猪就分别灌服10%的脱脂乳溶液、含益生屎肠球菌活菌(1×10~8cfu/mL)的10%脱脂乳溶液和含热灭活屎肠球菌(1×10~8cfu/mL)的10%脱脂乳溶液各10 mL,每天一次,连续6天,仔猪7日龄开始饲喂教槽料,21日龄断奶。记录仔猪出生、7日龄以及21日龄体重,并统计教槽前和断奶前的腹泻率,并在7日龄饲喂教槽料之前,每窝选择一头中等体重的仔猪屠宰,采集肠粘膜样本,分析相关指标。细胞试验采用猪空肠上皮细胞系IPEC-J2细胞,设5个处理,每个处理6个重复。细胞培养在37℃,5%CO_2恒温培养箱中,在IPEC-J2细胞生长交汇后,对照组、LPS组、活菌组、灭活菌组和细胞壁组分别在无抗无血清培养基中加入PBS、LPS(1 ng/mL)、益生屎肠球菌活菌(1 × 10~8cfu/mL)、热灭活屎肠球菌(1×10~8cfu/mL)和细胞壁(100μg/mL),与 IPEC-J2 细胞共孵育 12 h,分别在1、3、6和12 h收集细胞培养上清和细胞裂解液,并测定相关指标。主要试验结果如下:1.益生屎肠球菌活菌及其热灭活菌都不影响哺乳期仔猪的体增重,但都能大幅度降低仔猪的腹泻率,而且活菌组脾脏指数下降显着(p<0.05)。益生屎肠球菌活菌显着上调空肠和回肠黏膜的Zo-1基因表达(P<0.05),不影响occludin基因表达;但空肠黏膜的occludin和Zo-1基因表达不受热灭活菌影响,回肠黏膜的这两种紧密连接蛋白显着下调(p<0.05)。Western blot结果显示,益生屎肠球菌活菌与热灭活菌都可提高空肠和回肠黏膜occludin和claudin的蛋白表达。与IPEC-J2共培养3h内,屎肠球菌活菌、热灭活菌以及其细胞壁都能上调zo-1、occludin的表达水平(p<0.05),活菌和灭活菌还上调了共孵育1h的clauaine表达水平(p<0.05),当共培养时间长达6h以上时,紧密连接蛋白的表达都下调(p<0.05),而LPS对这叁种紧密连接蛋白的基因表达即使在共培养3h内也基本都是显着下调作用(p<0.05)。Western blot结果显示,在3h内,屎肠球菌活菌可上调occludin和claudin的蛋白表达水平,热灭活菌和细胞壁组在lh内上调claudin的蛋白表达量,3h时与对照组相比差异不显着,6h时活菌与热灭活菌的紧密连接蛋白表达量都趋于下降,而LPS组从lh开始就下调occludin和claudin的蛋白表达水平,蛋白表达与基因表达基本一致。2.屎肠球菌活菌显着上调仔猪空肠黏膜的il-1、il-6、il-8、tnf-α和tgf-βmRNA表达水平(p<0.05),但是显着下调仔猪回肠黏膜的il-1、il-6、il-12和tgf-β的表达水平(p<0.05),不影响空肠黏膜的i1-12和回肠黏膜的il-8和tnf-α的表达量。与活菌不同,热灭活菌组的空肠黏膜的i l-1、il-6、i1-8、i1-12、tnf-α 和回肠黏膜的 il-6、1l-8、il-12 mRNA表达水平都显着下调(p<0.05),而空肠黏膜的tgf-β和回肠黏膜的il-1、tnf-α、tgf-β的表达量则不变。屎肠球菌活菌和热灭活菌对仔猪小肠黏膜细胞因子分泌的影响也有差别。活菌显著促进空肠黏膜和回肠黏膜TGF-β以及回肠黏膜IL-8的分泌(P<0.05),不影响空肠黏膜IL-8、空肠和回肠黏膜IL-10和TNF-α的分泌量。而热灭活菌组的空肠黏膜IL-10和TGF-β的分泌量都明显增加(p<0.05),回肠黏膜IL-8、TNF-α和TGF-β的分泌量却都显著下降(p<0.05),但是空肠黏膜IL-8、TNF-α和回肠黏膜IL-10的分泌量不受影响。与IPEC-J2共培养lh时,屎肠球菌活菌显着上调il-1、il-8、tn-α和tgf-βmRNA的表达量(p<0.05),但il-6和il-12mRNA的表达水平被显着抑制(p<0.05);热灭活菌只显着上调了 il-6、i1-8和tgf-βmRNA的表达水平(p<0.05),而il-1、il-12和tnf-α都不受影响;细胞壁仅仅显着下调了 i1-8和tnf-α mRNA的表达量(p<0.05),对il-1、il-6、i1-12和tgf-β不影响。当共培养时间达到3h时,屎肠球菌活菌则显着上调il-1、il-6、il-8和tnf-α mRNA的表达量(p<0.05),热灭活菌显着促进1l-1、i1-6、il-8和il-12的表达(p<0.05),细胞壁使得i1-6和il-12 mRNA的表达量显着增加(p<0.05),但是却显着抑制tnf-α的表达(p<0.05)。不管共孵育1h还是3h,屎肠球菌活菌都显着刺激工PEC-J2细胞分泌TGF-β,但却显着抑制IL-8和IL-10的产生,不影响TNF-α的浓度。而热灭活菌与IPEC-J2共孵育时,只是显着增加1h的TGF-β分泌量,但对3h的没有影响,并显着减少共孵育1h和3h的工L-8和IL-10产量,对TNF-α也没有影响。3.屎肠球菌活菌组仔猪空肠黏膜的TLR-2和TLR-4以及回肠黏膜的TLR-9基因表达都显着上调(p<0.05),但是空肠黏膜的TLR-9以及回肠黏膜TLR-2和TLR-4基因的表达水平都不受影响;而热灭活菌组仔猪空肠黏膜和回肠黏膜的TLR-4以及回肠黏膜的TLR-9基因表达都显着下调(p<0.05),但是不影响空肠和回肠黏膜TLR-2以及空肠黏膜的TLR-9基因的表达。与IPEC-J2共培养3h时,屎肠球菌活菌组和细胞壁组的TLR-2表达量都显着增加(p<0.05),但TLR-9的表达不受影响,而热灭活菌组和LPS组则都显着减少TLR-9的表达量(p<0.05),但不影响TLR-2的表达;活菌组、热灭活菌组以及LPS组都促进TLR-4的表达(p<0.05),但是细胞壁却显着抑制TLR-4的表达(p<0.05)。结论:益生屎肠球菌的活菌和热灭活菌有相似的益生作用(减少仔猪腹泻),但是它们对仔猪小肠黏膜先天防御屏障的调节作用不完全一样:活菌增强仔猪小肠黏膜(包括猪肠上皮细胞)紧密连接蛋白的表达,并活化小肠黏膜(包括猪肠上皮细胞)的TLR2,4,9,诱导以耐受为主导的免疫应答;而热灭活菌只能促进猪肠上皮细胞表达紧密连接蛋白和TLR-4,但是也能诱导仔猪小肠黏膜产生耐受为主体的应答。(本文来源于《广西大学》期刊2017-06-01）
灭活因子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
旨在研究猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,简称Mhp)纤毛黏附因子P97以及F7鞭毛蛋白(flagellin,简称F)-霍乱毒素B亚基(cholera toxin B subunit,简称CTB)2种重组蛋白对口蹄疫(foot-and-mouth disease,简称FMD)灭活疫苗的免疫增强作用。通过体外表达获得pCold-F7-CTB、pET32a-P97-R1 2种重组蛋白,用间接酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,简称ELISA)方法检测pCold-F7-CTB蛋白的生物学活性,将重组蛋白分别与口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,简称FMDV)灭活抗原、口蹄疫灭活疫苗混合制备,皮下或腹腔接种Balb/c小鼠,共免疫2次,间隔3周。分别于免疫前、免疫后21、35、49 d采血,49 d后无菌摘取脾脏。采用阻断ELISA的方法检测小鼠血清口蹄疫O型病毒免疫球蛋白(IgG)抗体滴度,用流式细胞术检测脾淋巴细胞亚型比例,以评估免疫效力。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,简称SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western Blot)分析结果表明,2种重组蛋白成功表达。用GMl(神经节苷脂)-ELISA方法验证pCold-F7-CTB的生物学活性,发现融合蛋白F7-CTB保留了与GMl的结合能力。小鼠免疫试验结果表明,经皮下注射接种后,单独口蹄疫病毒灭活抗原组没有产生明显的抗体水平,而F7-CTB免疫增强剂组比单独口蹄疫病毒灭活抗原组的IgG滴度更高。在试验中发现,当重组蛋白与口蹄疫灭活疫苗联合使用时,血清中的IgG滴度明显增高,CD3~+CD8~+T淋巴细胞比值上升;P97和F7-CTB混合使用对口蹄疫灭活疫苗的免疫增强效果最佳。可以初步得出,免疫增强剂P97和F7-CTB具有协同作用,皮下注射可显着提高FMD的特异性IgG水平,CD3~+CD8~+T淋巴细胞比值升高,显示其具有良好的应用前景。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
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