露水草甾酮论文_王秋军

导读:本文包含了露水草甾酮论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:露水,羟基,核磁共振,高效,色谱,光谱,激素。

露水草甾酮论文文献综述

王秋军[1](2014)在《露水草HMGR基因的克隆分析及20-羟基蜕皮甾酮生物合成调控研究》一文中研究指出20-羟基蜕皮甾酮(20-hydroxyecdysterone,20E)是露水草(Cyanotis arachnoideaC. B. Clarke)植株中的主要甾酮活性成分,它不仅被广泛应用于蚕桑业,而且具有许多药理活性,能够有效促进哺乳动物多种组织和器官的核酸与蛋白质的合成,促进糖代谢和脂类代谢,改善高血糖症和高血脂症,调节免疫功能和中枢神经系统,改善和治疗缺氧和缺血性脑损伤,因此受到了世界各地科学研究工作者的广泛重视。然而,由于其结构复杂,化学合成不能用于商品生产,其天然来源匮乏问题始终制约着该化合物在农业、医药业上的应用。20E属于植物甾酮类化合物,3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase,HMGR)被认为是甾酮合成中的关键限速酶,是细胞中类异戊二烯生物合成途径中的关键调控点,所以研究HMGR对了解植物甾酮的生物合成及其调控具有重要的理论意义。我们首先从露水草植株中克隆出露水草HMGR基因(CaHMGR),其基因全长为2037bp,由91bp的5,非翻译区(untranslated region,UTR)、1800bp的开放阅读框(open reading frame,ORF)以及146bp的3,非翻译区组成。开放阅读框编码一条含有599个氨基酸的多肽,预测其等电点和分子量分别为7.25与64.0kDa。在NCBI数据库上对CaHMGR进行检索比对,我们发现CaHMGR与已报道的许多其他植物的HMGR的氨基酸序列十分相似。对推导出的多肽序列进行生物信息学分析,发现其含有两个3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)的结合域(ELPIGFVQLP和TTEGCLVA)和两个烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADPH)的结合域(DAMGMNM和GTVGGGT)。通过利用Swiss-Modeling对CaHMGR进行基于同源性的叁级结构模型分析,结果表明CaHMGR蛋白具有错综复杂的空间结构,其催化结构域包括L-结构域、N-结构域和S-结构域,与其他植物的HMGR的结构域十分相似。这暗示CaHMGR与其他植物的HMGR存在一定的催化相似性,而且CaHMGR是一个有功能的还原酶。根据CaHMGR及其他植物、真菌、昆虫及动物的HMGR构建系统发生树,结果表明HMGR都来自于一个共同的祖先并且逐渐进化成四个分支,其中CaHMGR属于植物HMGR这一分支,与阳春砂HMGR的亲缘关系最为接近。这些都说明CaHMGR属于植物HMGR超家族。我们建立了CaHMGR的绝对荧光实时定量PCR的检测方法,并调查了茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对CaHMGR表达模式的影响。我们设计了基因特异性引物CaHF和CaHR,荧光实时定量PCR的熔解曲线只有单个峰,特异性产物熔解曲线峰Tm为82.5℃,表明引物特异性良好。同时,我们将质粒标准品10倍梯度稀释成不同浓度为模板进行反应,根据获得的Ct值及基因拷贝数拟合曲线,得到标准曲线方程为y=-3.1116x+37.05,曲线拟合度R2达到0.9974,说明曲线线性关系良好,可用于准确的定量。计算获得的荧光实时定量PCR的扩增效率为102.6%,同样符合荧光实时定量PCR的要求。CaHMGR在根、茎及叶中都有表达,在各组织表达的情况各异,其中在茎中表达最高,其次为根,再次为叶。MeJA对CaHMGR有明显的诱导上调作用。MeJA处理组根和叶中HMGR的表达为对照组的两倍左右,而茎中HMGR的表达与对照组相比没有显着性差异。以上结果表明,CaHMGR是一个诱导响应型基因,可被诱导子如MeJA有效诱导。采用MeJA、酵母诱导子(yeast elicitor,YE)及硝酸银(AgNO3)叁种诱导子刺激露水草悬浮细胞培养体系,当施加0.2mM MeJA处理悬浮细胞时,测得细胞中20E含量为80.95μg/g DW,为对照组的8倍,而AgNO3(25μM)处理组的含量为对照组的6倍,YE(100mg/L)处理组的为对照组的2倍,说明这叁种诱导子均能明显提高悬浮细胞中的20E的含量,为采用大规模生物反应器生产20E提供基础研究。采用之前建立的荧光实时定量PCR方法检测露水草悬浮细胞中HMGR的表达水平,结果表明叁种诱导子均能明显提高CaHMGR的表达水平。我们的结果显示CaHMGR可被诱导子诱导高表达从而更多的甲羟戊酸可被合成进入类异戊二烯生物合成途径用以合成萜类或植物甾体化合物。在本文中,我们首次从露水草中克隆出HMGR基因,对其进行了生物信息学分析以及表达模式分析并调查了MeJA、YE及AgNO3叁种诱导子对露水草悬浮细胞中20E生物合成的调控作用,为采用露水草悬浮细胞大规模生产20E奠定理论基础。(本文来源于《苏州大学》期刊2014-04-01)

卜跃华,张晓笛,国无双[2](2013)在《HPLC法测定露水草胶囊中蜕皮甾酮》一文中研究指出目的用RP-HPLC测定露水草胶囊中蜕皮甾酮的量。方法样品用甲醇超声提取1 h,微孔滤膜过滤进样,采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温30℃;流动相为乙腈-水(30∶70);体积流量1 mL/min;紫外检测波长242 nm;进样量5μL。结果蜕皮甾酮在0.001~0.02 mg/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,回归方程为A=6.876×104C+25.71(r=0.999 9)。结论确立的方法能准确、快速地对露水草中的蜕皮甾酮进行定量检测,可用于该制剂的质量控制标准。(本文来源于《中成药》期刊2013年10期)

谭成玉,孔亮,李铣,李伟,李宁[3](2011)在《云南露水草中的一种新植物甾酮的分离与分析》一文中研究指出云南植物露水草富含植物甾酮类成分。为了研究其中的生物活性成分,采用多种色谱分离方法(氧化铝柱色谱、硅胶柱色谱、常压反相C18柱色谱、制备薄层色谱及反相高效液相色谱等)相结合,从露水草中分离得到一种新植物甾酮。综合一维和二维核磁共振光谱以及电喷雾质谱数据分析,确定该化合物的结构为3β,4α,14α,20 R,22 R,25-hexahydroxy-5α-cholest-7-en-6-one,为一种较为少见的具有5α-H的植物甾酮。(本文来源于《色谱》期刊2011年09期)

谭成玉,王金辉,李霞,孟大利,李铣[4](2001)在《露水草中的植物甾酮类成分》一文中研究指出为研究露水草 (CyanotisarachnoideaC .B .Clarke)中的化学成分 ,将露水草的乙醇提取液经中性Al2 O3 柱色谱 ,制备性薄层色谱 ,高效液相色谱分离得到 3种植物甾酮类成分 ,根据理化常数和波谱数据分析进行结构鉴定 ,3个化合物分别为罗汉松甾酮C(podecdysoneC) (1) ,土克甾酮(Turkesterone) (2 ) ,β 蜕皮甾酮 (β ecdysone) (3)。其中化合物 1、2为从该植物中首次分离得到。(本文来源于《沈阳药科大学学报》期刊2001年04期)

王锦亮,阮德春,程治英,杨崇仁[5](1996)在《露水草中20-羟基蜕皮甾酮的动态变化》一文中研究指出采用HPLC技术对云南产鸭跖草科分属于3个族10个属的13种植物中的20-羟基蜕皮甾酮进行分析,结果表明20-羟基蜕皮甾酮广泛存在于已分析的该科植物中,但含量除露水草外均甚微,不具有化学分类学的意义。20-羟基蜕皮甾酮在不同产地和不同生长季节的露水草中的含量变化,则与蝶类昆虫的活动显示有一定的相关性,从而提示20-羟基蜕皮甾酮有可能是露水草与蝶类昆虫协同进化过程中的具有化学生态学意义的代谢产物(本文来源于《云南植物研究》期刊1996年04期)

聂瑞麟,邱明华[6](1987)在《露水草工业生产蜕皮激素弃渣内的蜕皮甾酮》一文中研究指出我们曾报道从露水草(Cyanotis arachinoidea C.B.Clarke)中分离鉴定了β-蜕皮激素(β-ecdysone)(1)和它的2位乙酸酯(2-acetate of β-ecdysone(Ⅱ)云南、贵州产露水草一般含β-蜕皮激素达植物干重的2%左右,资源十分丰富,且我所已家化栽培。因此它是工业生产蜕皮激素十分理想的原料。由于蜕皮激素在调节桑蚕生长发育和增丝上具实用价值,十年来该产品已在全国蚕区广泛应用,获得很大的社会经济效益。(本文来源于《云南植物研究》期刊1987年02期)

露水草甾酮论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的用RP-HPLC测定露水草胶囊中蜕皮甾酮的量。方法样品用甲醇超声提取1 h,微孔滤膜过滤进样,采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温30℃;流动相为乙腈-水(30∶70);体积流量1 mL/min;紫外检测波长242 nm;进样量5μL。结果蜕皮甾酮在0.001~0.02 mg/mL范围内峰面积与浓度呈良好的线性关系,回归方程为A=6.876×104C+25.71(r=0.999 9)。结论确立的方法能准确、快速地对露水草中的蜕皮甾酮进行定量检测,可用于该制剂的质量控制标准。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

露水草甾酮论文参考文献

[1].王秋军.露水草HMGR基因的克隆分析及20-羟基蜕皮甾酮生物合成调控研究[D].苏州大学.2014

[2].卜跃华,张晓笛,国无双.HPLC法测定露水草胶囊中蜕皮甾酮[J].中成药.2013

[3].谭成玉,孔亮,李铣,李伟,李宁.云南露水草中的一种新植物甾酮的分离与分析[J].色谱.2011

[4].谭成玉,王金辉,李霞,孟大利,李铣.露水草中的植物甾酮类成分[J].沈阳药科大学学报.2001

[5].王锦亮,阮德春,程治英,杨崇仁.露水草中20-羟基蜕皮甾酮的动态变化[J].云南植物研究.1996

[6].聂瑞麟,邱明华.露水草工业生产蜕皮激素弃渣内的蜕皮甾酮[J].云南植物研究.1987

论文知识图

色谱图露水草植株A:无菌苗B:野生苗(图片...

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