导读:本文包含了几丁寡糖论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:丙烯酰胺,脂肪酸,紊乱,生物防治,糠醛,黑糖,饮食。
几丁寡糖论文文献综述
毛志强,辛雪成,周繁,龙惊惊,崔顺艳[1]（2019）在《叶面喷施几丁寡糖对辣椒的生长发育和品质的影响》一文中研究指出以辣椒为试验材料,探究了叶面喷施不同浓度的几丁寡糖对辣椒生长发育和品质的影响。试验采用盆栽方式,设置CK(水溶肥溶液)、J-1(喷施1 mg/L几丁寡糖水溶肥溶液)、J-10(喷施10 mg/L几丁寡糖水溶肥溶液)3个试验处理。结果表明,叶面喷施不同浓度的几丁寡糖对辣椒的生长发育和品质产生显着的影响:(1)处理J-1和J-10能够显着提高植株的地上部鲜重和地下部的干鲜重(P<0.05),株高和根冠比也有一定程度的增加,但未达到显着差异水平;(2)J-1和J-10处理的辣椒果长、果肉厚和单果重显着提高(P<0.05),但果径和果形指数未表现出显着差异水平;(3)经过喷施几丁寡糖后,辣椒果实的维生素C含量、可溶性蛋白、硝酸盐含量、可溶性糖含量、游离氨基酸含量显着增加(P<0.05),且处理J-10增加的幅度大于处理J-1;而类黄酮和总酚的相对含量、辣椒素含量和二氢辣椒素含量则显着减少(P<0.05),处理J-10减少的幅度大于处理J-1;(4)辣椒品质的相关性分析结果表明,可溶性蛋白、可溶性总糖、蔗糖、果糖与Vc含量呈极显着正相关(P<0.01);辣椒素、二氢辣椒素与可溶性蛋白、可溶性总糖、Vc含量呈极显着负相关。综合以上分析:叶面喷施浓度为10 mg/L的几丁寡糖水溶肥溶液效果更为显着,能够促进辣椒果实的生长发育,提高辣椒的单果重,改善辣椒的果实品质。(本文来源于《中国土壤与肥料》期刊2019年05期）
潘梦妍,徐显皓,刘延峰,李江华,吕雪芹[2]（2019）在《甲壳素酶Chisb的定向进化及生物转化合成几丁寡糖》一文中研究指出甲壳素酶具有广泛的工业应用前景,如可将虾壳、蟹壳和其他甲壳废物降解成以几丁寡糖为主的高附加值产品,但野生型甲壳素酶催化效率低,大大限制了几丁寡糖的生产。笔者在前期研究中表达了一个具有较高效催化效率的甲壳素酶Chisb,并对其酶学性质进行了初步研究。为进一步提高甲壳素酶Chisb的催化效率,以R13NprB-C-SP-H为亲本,采用易错PCR(Error-pronePCR)技术构建随机突变体文库,对甲壳素酶Chisb进行定向进化。经过96孔板初筛和摇瓶复筛,获得了两个催化效率进一步提高的突变体C43D和E336R。对突变体的酶学性质进行分析, C43D和E336R的最适催化温度为55℃, C43D的最适pH为5.0,E336R的最适pH为9.0;其催化效率相比对照分别提高了1.35倍和1.57倍;而E336R和C43D催化产几丁寡糖的含量分别为2.53 g/L和2.06 g/L,相比对照(0.89 g/L)分别提高了2.84倍和2.31倍;底物转化率分别为84.3%和68.7%,相比对照(29.7%)分别提高了54.6%和39%。研究表明,通过易错PCR引入随机突变的方法能够有效提高甲壳素酶Chisb的催化效率。上述研究获得的催化效率提高的正向突变体及其酶学性质分析对生物转化合成几丁寡糖具有重要研究意义和应用价值。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年09期）
宋文杰,方睿御[3]（2018）在《探讨添加碳酸钙、几丁聚糖和几丁寡糖对黑糖饼干中丙烯酰胺生成的影响》一文中研究指出以不同丙烯酰胺(acrylamide)含量的黑糖作为原料,分别添加几丁寡糖、几丁聚糖或碳酸钙,探讨对饼干中丙烯酰胺生成的影响。结果显示原料中丙烯酰胺含量越高,其饼干中丙烯酰胺生成量也越高,且使用以上3种添加物无法降低饼干中丙烯酰胺生成,推测黑糖中多酚类物质影响了美拉德反应的进行,同时,添加物的比例过低,无法有效减少丙烯酰胺生成。在羟甲基糠醛测定部分显示,使用砂糖组别的羟甲基糠醛含量低于黑糖组,且几丁寡糖会使羟甲基糠醛含量上升。这是由于黑糖中还原糖含量高于砂糖,且黑糖中含有丙烯酰胺和羟甲基糠醛,经烘烤加热时,易经由美拉德反应产生较大量丙烯酰胺。同时,经焦糖化反应产生羟甲基糠醛。在饼干外观及色差方面可以发现,添加黑糖的饼干L值较低,其中添加几丁寡糖组别的颜色较焦黑,推测添加几丁寡糖会使美拉德反应和焦糖化反应更加剧烈。为了顾及喜欢黑糖风味的消费者族群,应谨慎选择丙烯酰胺含量较低的黑糖作为原料,避免成品含有过多不良产物。(本文来源于《中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集》期刊2018-11-07）
[4]（2018）在《美国豁免脂质几丁寡糖SP104在食品中的最大残留限量》一文中研究指出近日,据美国联邦公报消息,美国环保署发布通报,豁免脂质几丁寡糖(Lipochitooligosaccharide)SP104在食品中的最大残留限量。据了解,本次豁免申请由孟山都公司按照美国《联邦食品、药品与化妆品法案》的要求提交。美国环保署就其毒理性、致癌性等方面进行了风险评估,得出结论认为,脂质几丁寡糖SP104对普通人群、婴儿和儿童的健康无影响,因此豁免其最大残留限量要求。(本文来源于《食品与生物技术学报》期刊2018年04期）
易凡琪[5]（2017）在《几丁寡糖对脂肪酸代谢紊乱的抑制作用及分子机制研究》一文中研究指出目的:探讨几丁寡糖(Chitin oligosaccharide,NACOS)对机体脂代谢紊乱的抑制作用及其潜在的分子机制。方法:体外细胞学实验:(1)MTT法筛选用药浓度:分别采用浓度梯度的PA(0、25、50、100和200μM)预先作用24 h,MTT法用酶标仪检测HepG2细胞增殖的OD值,计算细胞存活率,判断最适PA浓度。将HepG2细胞经NACOS(0、50、100μg/ml)预处理12 h后,加入PA处理24 h,MTT法检测细胞存活率,判断最适NACOS浓度。(2)油红O染色法:HepG2细胞经NACOS(0、50、100μg/ml)预处理12 h后,再用PA刺激24 h。倒置显微镜观察HepG2细胞形态学,以此评价NACOS对PA诱导所致的HepG2细胞中脂质沉淀的影响以及NACOSA抑制HepG2细胞活化的最适浓度。(3)实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR)检测HepG2细胞经PA刺激不同时间后过氧化物酶体增殖体受体共激活因子-1α(PGC1α)、炎症因子IL-1β、乙酰辅酶A1(ACC1)、细胞色素氧化酶亚单位-5b(Cox5b)、中链酰基辅酶A脱氧酶(Mcad)的转录表达水平,以评价PA对HepG2细胞的最适处理时间;将HepG2细胞经NACOS(100μg/m L)预处理12 h后,加入PA处理24 h,检测过PGC1α、Il-1β、ACC1、Cox5b、Mcad的转录表达水平,以评价NACOS对PA诱导HepG2细胞脂代谢紊乱的抑制作用。(4)免疫印迹法(Western b Lot)检测HepG2细胞经PA不同时间刺激后MAPKs及PI3K/Akt通路中相关蛋白激酶p-p38、ERK1/2、Akt的蛋白磷酸化水平的变化,以评价PA对HepG2细胞的最适处理时间;将HepG2细胞经NACOS(0、50、100μg/ml)预处理12 h后,再用PA刺激0.5 h,检测MAPKs及PI3K/Akt通路中相关蛋白激酶p-p38、p-ERK1/2、p-Akt的蛋白水平的变化,以评价NACOS对PA诱导HepG2细胞脂代谢紊乱的抑制作用。体内实验雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(n=5),即正常对照(normal control group,NCD)组、高脂饮食(high fat diet,HFD)组、NACOS组、NACOS+HFD组,造模20周,乙醚麻醉杀死小鼠,提取肝脏组织进行检查,用于制备组织匀浆。主要检测方法如下:(1)考察高脂模型C57BL/6小鼠在给予NACOS后各项生理指标的的变化,如体重、饮水、饮食上的变化。(2)RT-PCR方法检测肝脏组织中过氧化物酶体增殖体受体共激活因子-1α、白介素因子1-β、乙酰辅酶A1、细胞色素氧化酶亚单位-5b、中链酰基辅酶A脱氧酶的转录表达水平的变化。(3)Western blotting方法检测MAPKs及PI3K/Akt通路中相关蛋白激酶p-p38、p-ERK1/2、p-Akt的蛋白水平的变化。结果:体外细胞学实验:(1)MTT细胞活性实验表明,PA在25-200μM范围内对HepG2细胞的活力没有明显的抑制作用,表明PA在该浓度下没有细胞毒性,可在此浓度以下进行体外药效学实验;NACOS 100μg/m L可略微增加HepG2的活力,但没有统计学差异,且NACOS与PA联合进行药物处理时亦没有表现出细胞毒作用。(2)油红O染色实验显示,PA处理后则细胞浆中的红色脂肪颗粒呈显着聚集趋势。与PA单相比,NACOS预处理可明显抑制PA诱导所致的HepG2细胞中脂滴的形成。(3)RT-PCR实验结果表明,HepG2细胞经PA 100μM处理3-24 h后,PGC1α、IL-1β、ACC1、Cox5b、Mcad均表现出不同程度的升高(P<0.05或0.01),并在作用6 h后达峰值。(4)Western blotting结果显示,HepG2细胞经PA 100μM刺激后,丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen activated protein kinases,MAPKs)及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(Phosphoinositide 3-kinase,PI3K;Proteinkinase B,Akt)通路中的p38、ERK1/2、Akt激酶迅速激活,其磷酸化水平在0-1 h内呈时间依赖性增加。其中,p-ERK1/2及p-Akt在0.5 h时达峰值(P<0.05,vs对照组),而p-p38则在1 h时达最高水平(P<0.01,vs对照组)。体内实验结果表明:(1)与给予基础饲料的正常对照组(NCD)小鼠比较,高脂模型组(HFD)小鼠的平均体重显着增加(P<0.01)。相反,当高脂小鼠同时给予NACOS(1 mg/ml)处理时,可显着抑制其体重的增加(P<0.05或0.01)。高脂饲料和或NACOS均对小鼠的采食量及饮水量没有明显影响。(2)RT-PCR实验结果表明,HFD组小鼠较NCD组小鼠肝脏组织中PGC1α、ACC1及Mcad显着升高(P<0.05或0.01),炎症因子IL-1β亦增加明显(P<0.05),但HFD处理对Cox5b的转录表达无显着影响。与HFD组比较,小鼠经NACOS处理后,其肝脏组织中脂代谢调控因子PGC1α、Mcad及ACC1的转录水平均不同程度地得到抑制(P<0.05或0.01),炎症因子IL-1β亦显著降低(P<0.05或0.01),Cox5b转录表达水平变化不明显。(3)Western blotting结果显示,与NCD组小鼠相比,HFD组小鼠肝脏的p-p38、p-Akt蛋白的表达水平显着增高(P<0.05),而p-ERK1/2则无明显差别。与HFD组相比,MACOS可显着抑制高脂饮食喂养所致p-p38及p-Akt的激活(P<0.01或0.05)。此外,NACOS亦可降低p-ERK1/2的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:(1)体外细胞学实验结果表明:NACOS与PA联合进行药物处理时没有表现出细胞毒作用NACOS预处理明显抑制PA诱导所致的HepG2细胞中脂滴的形成;NACOS抑制PA刺激引起的HepG2细胞脂代谢的紊乱及相关炎症因子的过表达;NACOS预处理显着抑制p-p38、p-ERK1/2及p-Akt的表达水平。(2)体内实验结果表明:高脂小鼠同时给予NACOS(1 mg/ml)处理时,可显着抑制小鼠体重的增加,高脂饲料和或NACOS对小鼠的采食量及饮水量没有明显影响;NACOS处理可有效逆转高脂饮食喂养所致的小鼠肝脏脂代谢紊乱;NACOS抑制高脂饮食造成的脂代谢紊乱可能是通过抑制MAPKs通路的激活,下调炎症反应的发生,从而预防脂代谢紊乱的发生。(本文来源于《西南医科大学》期刊2017-05-01）
刘星[6]（2017）在《几丁寡糖联合顺铂对肺癌A549细胞及其移植瘤的影响》一文中研究指出目的:1.通过体外细胞实验及体内动物实验,分析中药降解产物几丁寡糖单独应用及与顺铂联合应用对肺腺癌A549细胞增殖、迁移、凋亡能力的影响以及对裸鼠移植瘤的作用,探讨两药联合在抗肿瘤作用方面是否具有良好的协同效果,为未来几丁寡糖在抗肿瘤治疗领域中的开发应用及临床转化,提供实验基础及理论依据。材料与方法:本研究采用叁组药物(几丁寡糖组、顺铂组、几丁寡糖联合顺铂组)作用于人肺腺癌A549细胞系,通过MTS实验、细胞划痕实验、transwell小室迁移实验及流式细胞凋亡实验,对比观察各药物组对肺腺癌A549细胞增殖、迁移及凋亡等生物学行为的影响;同时应用肺腺癌A549细胞对裸鼠进行皮下移植瘤造模,待造模成功后,按照给药的不同将裸鼠随机分为四组,分别为空白对照组、几丁寡糖组、顺铂组和几丁寡糖联合顺铂组,先利用HE染色的方法镜下观察各组肿瘤组织的形态学变化,再应用免疫组织化学的方法,观察各组肿瘤组织中Ki67、P53及TTF-1的表达水平,通过对比各组药物对Ki67、P53及TTF-1表达水平的影响,分析其对裸鼠移植瘤的作用并探讨肿瘤的预后。结果:1.中药降解产物几丁寡糖具有抑制肺腺癌A549细胞增殖和迁移的作用,其效果随着浓度的增加而增大。几丁寡糖对肺腺癌A549细胞作用24h的IC50为6.840mg/mL,后续实验均以7mg/mL为浓度参数。2.几丁寡糖作用于A549细胞24h、48h、72h及96h后的增殖抑制率分别为49.80%、55.90%、71.30%和73.50%,顺铂对肺腺癌细胞的增殖抑制率分别为25%、47.4%、61.7%和71.2%,而两药联合对A549细胞的增殖抑制率分别为52.4%、73.7%、86.8%和87.4%。药物作用24h后,几丁寡糖联合顺铂组对肿瘤细胞的抑制率与几丁寡糖组相比,差异无统计学意义(P>0.05),但与顺铂组相比抑制率明显增高,差异具有统计学意义(P<0.05);药物作用48h、72h和96h后几丁寡糖联合顺铂组对肿瘤细胞的抑制率与几丁寡糖组和顺铂组相比均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。几丁寡糖联合顺铂能够明显抑制肺腺癌A549细胞的增殖能力,其作用大于单独应用几丁寡糖或顺铂。3.细胞划痕实验结果显示,当几丁寡糖药物浓度为1mg/mL时,24h、48h相对划痕宽度分别为82.33%、42.68%,当几丁寡糖药物浓度为3mg/mL时,24h、48h相对划痕宽度分别为83.46%、60.52%,而空白对照组分别为:84.78%、21.79%,差异具有统计学意义(P<0.05)。几丁寡糖可以抑制肺腺癌A549细胞的迁移能力,且抑制作用随几丁寡糖药物浓度的增加而增大。当几丁寡糖药物浓度为7mg/mL时,24h、48h相对划痕宽度分别为81.79%、62.21%,当顺铂药物浓度为3μg/mL时,24h、48h相对划痕宽度分别为83.23%、55.91%,几丁寡糖和顺铂联合应用时,24h、48h相对划痕宽度分别为83.91%、69.67%,而空白对照组则分别为:84.11%、23.09%,各组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。几丁寡糖联合顺铂组与几丁寡糖组及顺铂组相比,可以更加显着的降低肺腺癌A549细胞的迁移能力。4.Transwell小室迁移实验计算A549细胞的迁移数量,空白对照组578±26、几丁寡糖组462±21、顺铂组423±28、几丁寡糖联合顺铂组236±23,几丁寡糖联合顺铂组与顺铂组、几丁寡糖组和空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。几丁寡糖联合顺铂可以明显抑制肺腺癌A549细胞的迁移能力,其作用大于单独应用几丁寡糖或顺铂。5.细胞凋亡实验显示几丁寡糖组作用于肺腺癌A549细胞株24h后,早期凋亡率和晚期凋亡率分别为11.8%和5.3%(总凋亡率17.1%),顺铂组早期凋亡率和晚期凋亡率分别为5.3%和4.5%(总凋亡率9.8%),几丁寡糖联合顺铂组早期凋亡率和晚期凋亡率分别为6.7%和8.0%(总凋亡率14.7%),而空白对照组则分别为3.4%和2.8%(总凋亡率6.2%)。两药联合组与几丁寡糖组相比,差异无统计学意义(P>0.05),但分别与顺铂组和空白对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。中药降解产物几丁寡糖及与顺铂联合应用均能够诱导肺腺癌A549细胞凋亡。6.对裸鼠移植瘤组织进行HE染色镜下观察发现,空白对照组、几丁寡糖组及顺铂组肿瘤组织的形态学表现基本相同,即癌细胞呈弥漫性分布,且异型性明显,可见病理性核分裂像,肿瘤组织内部可见点状坏死;而几丁寡糖联合顺铂组镜下观察肿瘤组织,除了有上述表现以外,还可见局灶性坏死,并有细胞核破碎、固缩及染色质边集。7.对裸鼠移植瘤组织进行免疫组织化学染色结果显示,空白对照组、几丁寡糖组、顺铂组、几丁寡糖联合顺铂组各组之间Ki67免疫积分中位数分别为9、5、5、1,即Ki67的表达水平分别为强阳性(+++)、阳性(++)、阳性(++)和弱阳性(+),各用药组与空白对照组相比,表达量均显着降低,差异有统计学差异(P<0.05);其中,几丁寡糖联合顺铂组与其他两单药组及空白对照组相比,表达量降低更为显着,差异有统计学差异(P<0.05)。P53免疫积分中位数分别为2、1、1、1,即P53的表达水平均为弱阳性(+),各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。TTF-1免疫积分中位数分别为3、1、1、0,即TTF-1的表达水平分别为弱阳性(+)、弱阳性(+)、弱阳性(+)和阴性(-),联合用药组与空白对照组及两单药组之间比较差异有统计学意义(P<0.05),两单药组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。中药降解产物几丁寡糖联合顺铂能够明显下调裸鼠肺腺癌A549细胞移植瘤中Ki67、TTF-1的表达水平,其作用大于单独应用几丁寡糖或顺铂。结论:1.本研究从体外细胞学水平及体内动物模型上证明中药降解产物几丁寡糖联合顺铂在抑制肺腺癌A549细胞增殖、迁移以及诱导细胞凋亡方面具有良好的协同效果,其抑制增殖和迁移的作用优于单独应用几丁寡糖或顺铂。2.中药降解产物几丁寡糖联合顺铂可能是通过下调Ki67、TTF-1的表达水平,尤其是Ki67的表达水平,来促进肿瘤细胞的坏死,改善预后。(本文来源于《辽宁中医药大学》期刊2017-03-01）
易凡琪,郑军平,李琼瑜,焦思明,杜昱光[7]（2017）在《几丁寡糖对脂肪酸代谢紊乱的抑制作用及分子机制》一文中研究指出旨在从细胞学实验及整体动物水平探讨几丁寡糖(NACOS)对机体脂代谢紊乱的抑制作用及其潜在的分子机制。在细胞学实验中,HepG2细胞被分为4组,即对照组、棕榈酸(Palmitic acid,PA)组、几丁寡糖(NACOS)组、NACOS+PA组。在体内实验中,将雄性C57BL/6小鼠随机分为4组(n=5),即正常对照(NCD)组、高脂饮食(HFD)组、NACOS组、NACOS+HFD组,实验共20周。主要检测方法如下:采用油红O染色检测细胞脂质沉积,RT-PCR方法检测脂代谢调控分子及炎症因子的转录表达水平,Western blotting方法检测MAPKs及PI3K/Akt通路中相关蛋白激酶的蛋白磷酸化水平。细胞学实验表明,NACOS对HepG2没有明显的细胞毒性作用,并能显着降低细胞内脂滴颗粒的沉积,下调肝细胞及小鼠肝脏组织中脂代谢相关调控因子(PGC1α、Cox5b及Mcad)及炎症因子IL-1β的转录表达水平(P<0.05或0.01),抑制肝细胞及肝脏组织中p38、ERK1/2及Akt蛋白激酶的激活(P<0.05或0.01)。基于上述研究,NACOS可抑制肝脏线粒体脂肪酸氧化和脂质从头合成途径,阻断炎症反应的发生,从而预防脂代谢紊乱的发生。(本文来源于《生物工程学报》期刊2017年04期）
谢晓兰,翁文婷,吕凤娇,高平章,廖丽娜[8]（2015）在《蜗牛酶降解虾壳制备几丁寡糖的工艺条件》一文中研究指出以虾壳降解产物几丁寡糖含量为指标,单因素法考察温度、酶浓度、pH、时间对蜗牛酶降解虾壳的影响,确定蜗牛酶降解虾壳的大致条件.在此基础上,进一步采用正交试验法确定蜗牛酶降解虾壳的最佳工艺条件.采用TLC方法检测降解产物,结果表明:蜗牛酶降解虾壳的最佳工艺条件是温度40℃,pH 3.8,酶浓度5mg/mL,时间为4h,酶解产物主要是几丁叁糖.(本文来源于《泉州师范学院学报》期刊2015年02期）
姚艳平,王建明,张作刚,李友莲[9]（2013）在《几丁寡糖在木霉菌生物防治中的作用》一文中研究指出木霉菌是重要的植物病害生防菌,在与植物病原真菌的拮抗过程中可产生一种特殊的化合物——几丁寡糖,几丁寡糖在木霉菌生防中具有多种生物功能。从真菌细胞壁和节肢动物外骨胳中分离的几丁寡糖,可充当化学激发子、诱导植物产生抗性、激发植物的防御系统、提高植物的抗病性。(本文来源于《山西农业科学》期刊2013年02期）
黄刚良[10]（2010）在《具有重要生理活性几丁寡糖的固相合成》一文中研究指出几丁寡糖可以作为植物功能调节剂,促进植物生长,激活植物防御体系,因而又被称为新型的植物抗性诱导剂和新型生物农药.目前几丁寡糖的的制备主要是通过化学、物理和酶降解几丁质叁类途径.高聚合度的寡糖是发挥活性的主要成分,几丁质的降解实验中因为过程不易控制,得到的寡糖在溶液内被进一步降解,形成大量单糖和二糖.因此,提高适宜聚合度的寡糖的含量是几丁寡糖产品开发中的重要一环这激励我们继续探讨新的方法来制备几丁寡糖.该文报道了几丁寡糖的固相合成,该方法能高效合成特定结构的几丁寡糖.(本文来源于《有机合成创新—产业化的新动力——中国化学会全国第叁届有机合成化学与过程学术讨论会论文摘要集》期刊2010-10-18）
几丁寡糖论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
甲壳素酶具有广泛的工业应用前景,如可将虾壳、蟹壳和其他甲壳废物降解成以几丁寡糖为主的高附加值产品,但野生型甲壳素酶催化效率低,大大限制了几丁寡糖的生产。笔者在前期研究中表达了一个具有较高效催化效率的甲壳素酶Chisb,并对其酶学性质进行了初步研究。为进一步提高甲壳素酶Chisb的催化效率,以R13NprB-C-SP-H为亲本,采用易错PCR(Error-pronePCR)技术构建随机突变体文库,对甲壳素酶Chisb进行定向进化。经过96孔板初筛和摇瓶复筛,获得了两个催化效率进一步提高的突变体C43D和E336R。对突变体的酶学性质进行分析, C43D和E336R的最适催化温度为55℃, C43D的最适pH为5.0,E336R的最适pH为9.0;其催化效率相比对照分别提高了1.35倍和1.57倍;而E336R和C43D催化产几丁寡糖的含量分别为2.53 g/L和2.06 g/L,相比对照(0.89 g/L)分别提高了2.84倍和2.31倍;底物转化率分别为84.3%和68.7%,相比对照(29.7%)分别提高了54.6%和39%。研究表明,通过易错PCR引入随机突变的方法能够有效提高甲壳素酶Chisb的催化效率。上述研究获得的催化效率提高的正向突变体及其酶学性质分析对生物转化合成几丁寡糖具有重要研究意义和应用价值。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
几丁寡糖论文参考文献
[1].毛志强,辛雪成,周繁,龙惊惊,崔顺艳.叶面喷施几丁寡糖对辣椒的生长发育和品质的影响[J].中国土壤与肥料.2019
[2].潘梦妍,徐显皓,刘延峰,李江华,吕雪芹.甲壳素酶Chisb的定向进化及生物转化合成几丁寡糖[J].生物工程学报.2019
[3].宋文杰,方睿御.探讨添加碳酸钙、几丁聚糖和几丁寡糖对黑糖饼干中丙烯酰胺生成的影响[C].中国食品科学技术学会第十五届年会论文摘要集.2018
[4]..美国豁免脂质几丁寡糖SP104在食品中的最大残留限量[J].食品与生物技术学报.2018
[5].易凡琪.几丁寡糖对脂肪酸代谢紊乱的抑制作用及分子机制研究[D].西南医科大学.2017
[6].刘星.几丁寡糖联合顺铂对肺癌A549细胞及其移植瘤的影响[D].辽宁中医药大学.2017
[7].易凡琪,郑军平,李琼瑜,焦思明,杜昱光.几丁寡糖对脂肪酸代谢紊乱的抑制作用及分子机制[J].生物工程学报.2017
[8].谢晓兰,翁文婷,吕凤娇,高平章,廖丽娜.蜗牛酶降解虾壳制备几丁寡糖的工艺条件[J].泉州师范学院学报.2015
[9].姚艳平,王建明,张作刚,李友莲.几丁寡糖在木霉菌生物防治中的作用[J].山西农业科学.2013
[10].黄刚良.具有重要生理活性几丁寡糖的固相合成[C].有机合成创新—产业化的新动力——中国化学会全国第叁届有机合成化学与过程学术讨论会论文摘要集.2010
论文知识图
