TFPI-2对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性及机制的研究

TFPI-2对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性及机制的研究

论文摘要

目的:研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)对缺氧大鼠星形胶质细胞生物学特性的影响,探讨其对大鼠星形胶质细胞缺氧保护的机制。方法:从大鼠脑组织中分离培养星形胶质细胞,将细胞作缺氧处理,分别采用qRT-PCR和Western blot法检测星形胶质细胞中TFPI-2表达水平。在星形胶质细胞中转染TFPI-2 siRNA后,采用qRT-PCR和Western blot法检测TFPI-2基因沉默效果,MTT检测星形胶质细胞增殖,流式细胞术检测星形胶质细胞凋亡情况,qRT-PCR检测星形胶质细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、c-myc、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)mRNA表达水平。结果:Hypoxia组星形胶质细胞中TFPI-2 mRNA水平和蛋白水平明显高于Control组星形胶质细胞,转染TFPI-2 siRNA后,si-TFPI-2组星形胶质细胞中TFPI-2 mRNA和蛋白表达水平明显低于si-control组细胞,差异有统计学意义(P<0. 05)。缺氧星形胶质细胞存活率降低,细胞凋亡率升高,细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,与正常培养的星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。对缺氧星形胶质细胞敲减TFPI-2后,细胞存活率升高,细胞凋亡率和细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3蛋白水平降低,与缺氧星形胶质细胞比较,差异有统计学意义(P<0. 05)。结论:下调TFPI-2可以促进缺氧星形胶质细胞增殖,抑制细胞凋亡,其作用机制与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 星形胶质细胞培养
  •     1.2.2 细胞转染和分组
  •     1.2.3 qRT-PCR检测星形胶质细胞中TFPI-2mRNA表达水平
  •     1.2.4 Western blot检测星形胶质细胞中TFPI-2蛋白表达水平
  •     1.2.5 MTT测定星形胶质细胞增殖
  •     1.2.6 流式细胞术测定星形胶质细胞凋亡率
  •     1.2.7 qRT-PCR检测细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3 mRNA表达水平
  •   1.3统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 缺氧星形胶质细胞中TFPI-2的表达
  •   2.2 转染后星形胶质细胞中TFPI-2表达水平
  •   2.3 沉默TFPI-2增加缺氧星形胶质细胞增殖作用
  •   2.4 沉默TFPI-2降低缺氧诱导的星形胶质细胞凋亡
  •   2.5 沉默TFPI-2对缺氧星形胶质细胞中β-catenin、c-myc、Bax、Cleaved Caspase-3表达的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 程春郁,任占军,黄丹华,刘莹,陈舒,蒋丽艳

    关键词: 星形胶质细胞,增殖,凋亡

    来源: 中国免疫学杂志 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 齐齐哈尔医学院附属第三医院神经内六科

    分类号: R329.2

    页码: 1047-1052

    总页数: 6

    文件大小: 1003K

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