导读:本文包含了铁氧还蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:CRISPR-Cas9文库,奥西替尼,非小细胞肺癌,铁氧还蛋白1
铁氧还蛋白论文文献综述
陈晨,彭培佩,王健,黄芳,王芃[1]（2019）在《利用NCI-H1975细胞筛选对奥西替尼耐药的铁氧还蛋白1基因及其功能鉴定》一文中研究指出目的利用非小细胞肺癌细胞研究对奥西替尼潜在耐药基因及其分子机制。方法首先利用CRISPR-Cas9全基因组文库在人非小细胞肺癌细胞NCI-H1975中筛选奥西替尼潜在耐药基因,并且分别敲除潜在耐药基因铁氧还蛋白1(FDX1)和一个对照基因腺相关病毒整合位点1(AAVS1),建立敲除了FDX1和AAVS1稳定细胞,简称sg-FDX1细胞和sg-AAVS1细胞。提取sg-FDX1细胞基因组并且PCR扩增出sgRNA序列两侧的DNA序列,连接到T载体后进行测序;Western印迹法检测sg-FDX1和sg-AAVS1细胞中FDX1蛋白表达水平;将构建的sg-FDX1和sg-AAVS1细胞分别与奥西替尼0,30,50和100 nmol·L-1培养30 h,Western印迹法检测细胞中切割后的聚(ADP-核糖)聚合酶(c-PARP)蛋白表达水平,表皮生长因子受体(EGFR)和细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化水平。采用平板克隆实验,当克隆生长到约为10个细胞时加入奥西替尼12 nmol·L-1作用10 d,显微镜下计数≥10个细胞的克隆数;细胞用奥西替尼0～30 nmol·L-1作用72 h,或30 nmol·L-1作用3,5和7 d后,CCK8法检测肿瘤细胞的存活率。结果测序结果表明,sg-FDX1细胞中的FDX1基因发生缺失,同时FDX1在蛋白表达水平被有效敲除;和sg-AAVS1细胞相比,奥西替尼50 nmol·L-1处理的sg-FDX1细胞中c-PARP表达水平显着降低(P<0.01);奥西替尼在sg-FDX1细胞中对EGFR和ERK蛋白磷酸化表达抑制作用相对于sg-AAVS1细胞显着降低(P<0.01)。克隆形成和CCK8实验表明,相对于sg-AAVS1细胞,奥西替尼对sg-FDX1细胞的克隆形成率和增殖抑制作用显着降低(P<0.05)。结论 NCI-H1975细胞敲除FDX1,减弱了奥西替尼诱导细胞凋亡功能,可能是FDX1参与NCI-H1975细胞对奥西替尼耐药机制之一。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2019年04期）
许兰,陈思航,田瑞莹,尚书凤[2]（2019）在《人铁氧还蛋白表达载体构建》一文中研究指出目的为了将人铁氧还蛋白(adrenodoxin,FDX)在293T细胞中表达,扩增FDX的ORF,将FDX的ORF插入到哺乳动物细胞表达载体pcDNA的NotI/KpnI,构建表达载体。方法以GeneBank报道的FDX的mRNA序列(NM_004109.5)为模板设计引物,在5'和3'分别引入限制性酶切位点NotI和KpnI,从HepG2的cDNA中扩增FDX的ORF,将FDX的PCR产物和空载体pcDNA3.1用NotI和KpnI双酶切4 h,酶切产物用DNA回收试剂盒回收。将FDX的PCR酶切产物分别连接到空载体NotI/KpnI,连接产物转化DH5α,培养过夜。挑单克隆,用PCR鉴定阳性克隆并测序。结果经1%琼脂糖凝胶电泳和EB染色,观察到一500 bp条带,阳性克隆的测序结果与GeneBank报道的核酸序列一致。结论应用常规分子克隆方法已成功构建了FDX的真核表达载体pcDNA-FDX。(本文来源于《科技创新导报》期刊2019年07期）
王磊,刘彬,于大禹[3]（2018）在《光合系统铁氧还蛋白-NADP氧化还原酶的辅因子特异性改造》一文中研究指出蓝细菌光合系统通过铁氧还蛋白:NADP氧化还原酶(FNR)将还原力特异性地传递给NADP,产生NADPH用于推动CO2固定和其他生命过程。蓝细菌胞内的高NADPH/NADH比率限制了外源代谢途径在蓝细菌中的应用。改变FNR的辅因子特异性,使光合系统还原力合理分配,调整NADPH/NADH比率,将有助于提高光合作用效率和设计先进的光自养生物系统生产生物燃料分子和化学品。我们开发了一种偶联NAD(P)H再生体系的显色筛选策略,筛选具有NAD活性系列FNR突变型。结合FNR序列信息及文献数据对FNR进行系列定点突变,将FNR由NADP特异性突变为同时识别NADP和NAD,并确定了叁个突变热点。这一工作为光细菌辅因子调控提供了高效的功能元件,为进一步开发改造FNR奠定了基础。(本文来源于《中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集》期刊2018-10-25）
景艳军[4]（2017）在《嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁氧还蛋白基因fdⅠ和fdⅡ的克隆及其重金属抗性研究》一文中研究指出嗜酸氧化亚铁硫杆菌是一种应用性很强的工业微生物菌种,鉴于其较好的重金属抗性,可用于贵金属的浸提、环境污染的治理等领域。铁氧还蛋白作为一种广泛存在并参与嗜酸氧化亚铁硫杆菌新陈代谢过程诸如铁硫簇组装等重要环节的蛋白质,研究其结构和功能对了解嗜酸氧化亚铁硫杆菌的代谢过程、电子传递及重金属抗性具有重要意义。本研究的内容和结果如下:(1)从甘肃省兰州市、白银市和陇南市3个典型矿区采集的样品中分离出四株嗜酸氧化亚铁硫杆菌,一株氧化亚铁钩端螺旋菌。选取生长周期短、菌体富集量大的菌株BYSW1进行后续的研究。首先选取温度、pH值、接种量、能源种类利用单因素实验对其生长条件进行优化。在pH为2,于30℃下接种10%的菌液,BYSW1生长最好,葡萄糖和蛋白胨会明显抑制其生长。(2)在NCBI数据库中找出铁氧还蛋白基因序列(fdⅠ、fdⅡ),在BYSW1中扩增出目的片段,连接到pET-32(a),转化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)DH5α。自BYSW1扩增出的铁氧还蛋白基因序列(fdⅠ、fdⅡ)与数据库汇总的序列一致性分别为83.92%和85.59%,编码的蛋白与数据库中的序列一致性分别为89.47%和85.59%。(3)重组的质粒转化表达宿主E.coli BL21(DE3)。选取温度、时间、IPTG浓度进行单因素实验,优化重组蛋白的表达条件,并用蛋白质印记法进行验证。用镍离子亲和层析柱对重组蛋白进行纯化。FdⅠ和FdⅡ分别在25℃下加入0.5 mM IPTG诱导6 h、25℃下加入0.3 mM IPTG诱导6 h表达效果最佳。FdⅠ和FdⅡ分别可用100 mM咪唑和50 mM咪唑自亲和柱中洗脱下来。(4)挑取五种重金属(Cd2+、Cu2+、Mn2+、Ni2+、Zn2+),对其重金属抗性进行研究;对重金属(Cu2+和Cd2+)驯化前后的嗜酸氧化亚铁硫杆菌的菌体形态和基因组变化、重组蛋白表达差异、宿主菌体的生长情况进行了研究。结果表明:BYSW1具有较强的重金属抗性,分别在0.04 mol/L Cd2+、0.04 mol/L Cu2+、0.15 mol/L Mn2+、0.08 mol/L Ni2+和0.08 mol/L Zn2+存在时生长良好,但是高浓度(大于0.04 mol/L)的Cu2+和Cd2+会明显抑制BYSW1的生长。Cu2+和Cd2+胁迫后,BYSW1的菌体细胞明显变小,且表面粗糙,但基因组仍然能保持完整。不同浓度、不同种类的重金属胁迫前后,铁氧还蛋白的表达存在显着差异,且Cd2+对嗜酸氧化亚铁硫杆菌生长的影响比Cu2+显着;不同浓度、不同种类的重金属对于重组蛋白的表达宿主菌体生长影响不同,0.25 m M的Cu2+和Cd2+能明显抑制宿主菌体的生长。(本文来源于《兰州理工大学》期刊2017-06-12）
吴晓佩[5]（2017）在《文心兰离体培养优化及转化铁氧还蛋白基因研究》一文中研究指出文心兰(Oncidiumhybridum)为兰科(Orchidaceae)文心兰属植物,被插花界誉为切花"五美人"之一,具有较高的经济价值。文心兰在栽培过程中极易感染病害,尤其是由欧文氏菌(Erwinia spp)引起的软腐病(Soft rot)更是文心兰产业的毁灭性病害,但至今却仍无特别有效的防治方法,因此选育抗软腐病的文心兰品种是文心兰育种的重要方向。铁氧还蛋白(Ferredoxin,FD)作为一个大的基因家族在植物中普遍存在,现已证实Fd基因可帮助水稻、烟草、拟南芥以及文心兰在内的许多植物获得广谱抗性。本研究以文心兰'小樱桃'为材料,利用兰花基因组数据,通过RT-PCR以及RACE技术克隆获得2条文心兰抗软腐病相关的铁氧还蛋白基因,并通过实时荧光定量PCR以及转化文心兰原球茎的研究,对这两个基因进行初步的功能验证。本研究的主要结果如下:1文心兰离体培养优化以文心兰'小樱桃'的PLBs为材料,研究不同添加量的香蕉泥对文心兰PLBs增殖的影响,结果表明:以1/2MS+1 g/L活性炭+50g/L香蕉泥时增殖系数最高,高达5.41,且原球茎颜色鲜绿,长势紧密均一没有出现分化的情况;研究不同激素种类、激素浓度、自然添加物以及接种量对原球茎分化的影响,结果表明:1/2MS+50g/L苹果泥,接种量为8团/瓶分化效果最好,分化率达到100%。可见添加物对文心兰'小樱桃'的PLBs的分化以及细胞的增殖有明显的促进作用。2文心兰与OnFd与OnFNR基因的克隆与生物信息学分析铁氧还蛋白已被证实可以帮助许多植物获得广谱抗性,本研究基于兰花基因网站通过构建进化树,得到了 7条与Fd基因亲缘关系较近的基因序列,长度分别为 244、505、452、616、933、209 和 270 bp,其中 505、452、616以及933这四条基因含有完整的ORF序列。以文心兰'小樱桃'健康与感染软腐病的植株为材料,通过实时荧光定量PCR发现其中有两条基因在感染软腐病植株中的相对表达量呈极显着上升与下降。因此利用RT-PCR结合RACE技术克隆得到这两条基因的全长序列,分别命名为OnFd(GenBank 登录号为 KX461907)与OnFN(GenBank登录号为KX461908)。生物信息学分析表明:文心兰OnFd含有一个典型的[2Fe-2S]结构域,而OnFNR却包含有FAD结构域和NADP+结构域。这两个基因具有相似的磷酸化位点和空间构象等,但理化性质和跨膜结构差异明显,推测这两个基因的功能可能存在差异性。3文心兰OnFd与OnFNR基因表达模式分析以文心兰'小樱桃'健康植株为材料,利用实时荧光定量PCR检测OnFd与OnFNR基因在文心兰的根、假鳞茎、叶和花中均有表达。其中OnFd在花中的表达量最高,说明OnFd可能参与了植株的开花调控;而OnFNR在根中的表达量最低,而在叶中的表达量最高,其表达量约为根表达量的100倍,可见,OnFNR属于光合型的LFNR。通过对文心兰'小樱桃'健康植株进行不同激素和非生物胁迫处理,发现 OnFd与 OnFNR对 IAA、ABA、GA、SA、NaCl 以及 PEG均有响应。在IAA、GA、SA、ABA以及NaCl的处理下OnFNR呈上调趋势,只有在PEG的处理下呈下调趋势;而OnFd在IAA、SA、ABA、NaCl的处理下呈现下调趋势,在GA和NaCl的处理下表达量呈现上调趋势。无论是外源激素还是非生物胁迫均影响着OnFd与OnFNR的表达量,而这种影响可能与ROS的积累有着密切的关系。4文心兰OnFd与OnFNR基因在不同感病阶段的表达分析以感染软腐病文心兰'南茜'植株为材料,进行软腐病病菌分离,通过引物Y1/Y2得到一条与欧文氏杆菌(Erwinia carotovoraa)果胶酶基因(J03673.1)相似度高达99%的病原菌DNA序列,说明引起本试验所用文心兰发病的主要病原菌为欧文氏杆菌。用所得到的软腐病病原菌对健康的文心兰'小樱桃'进行侵染,并以感染软腐病后1d、3d、6d、9d、12d以及健康植株的根、假鳞茎、下端叶和上端叶为材料,通过荧光定量分析发现,文心兰感病后各个部位的OnFd表达量均呈上升趋势,尤其是接种部位假鳞茎在接种病原菌1 d后表达量便表现出极显着上调(P<0.01),并且在5个感病阶段的表达量是健康植株的2.83～3.98倍。但OnFNR在接种病原菌后上端叶、下端叶以及接种部位假鳞茎的表达量均呈现下降趋势,而根却出现了上调趋势,并在第12d达到最高值,其表达量约为对照组的4.5倍。因此无论是OnFd还是OnFNR对软腐病菌均有显着的响应,说明这两个基因可能在文心兰响应抗软腐病过程中具有重要作用。5文心兰OnFd与OnFNR蛋白的亚细胞定位分析在获得OnFd与OnFNR的全长序列的基础上,构建融合绿色荧光1302-GFP蛋白的表达载体,并且通过农杆菌介导法使其在烟草中异位表达,观察蛋白的定位情况。结果表明:OnFd与OnFNR均定位于叶绿体。6文心兰OnFd与OnFNR基因转化文心兰构建35S:OnFd与35S:OnFNR植物过表达载体;构建以PJM007为中间载体的OnFd RNAi与OrnFNR RNAi植物抑制表达载体,并利用农杆菌介导法将其转入文心兰原球茎。结果发现转基因PLBs在抗性培养阶段生长状态不好并且颜色偏黄,但进入分化培养后颜色开始变绿并且PLBs的体积较非转基因的大。在过表达OnFd与OnFNR的PLBs中OnFd与OnFNR的表达量均呈显着上升,在抑制OnFd表达的PLBs中OnF与OnFNR的表达量均呈极显着下降,但在抑制OnFNR表达的PLBs中OnFNR的表达量虽呈极显着下降,而OnFd的表达量却显着提高。用软腐病菌侵染经过人为切伤的转基因PLBs发现,过表达OnFd与OnFNR的PLBs较抑制OnFd与OnFNR表达的PLBs抗软腐病能力更强,这可能是因为在过表达OnFd与OnFNR的PLBs中OnFd与OnFNR的表达量均上升了。SOD与铁氧还蛋白之间有着密切的关系,因此本试验通过以转基因PLBs为材料,对SOD相关基因进行实时荧光定量发现,在过表达OnFd与OnFNR的PLBs中,Cu/ZnSOD以及FeSOD的表达量均出现显着下调;当抑制OnFd与OnFNR表达时,Cu/ZnSOD的表达量出现极显着上调,而FeSOD的表达量却均出现下调情况;只有MnSOD的表达量在OnFd与OnFNR超表达以及抑制表达后均呈现显着上调情况。SOD相关基因表达量的变化可能与OnFd与OnFNR参与了植物体内的氧化还原反应有关。(本文来源于《福建农林大学》期刊2017-06-01）
吴晓佩,谢礼洋,白玉,叶炜,林争春[6]（2017）在《文心兰铁氧还蛋白基因克隆定位及表达分析》一文中研究指出采用RACE-PCR法,从‘小樱桃’文心兰中克隆到一个全长989bp的铁氧还蛋白基因cDNA序列,命名为OnFd(登录号KX461907)。OnFd基因开放阅读框长为465bp,预测可编码154个氨基酸;gDNA和cDNA序列比对结果显示OnFd基因不含内含子。生物信息学分析表明,OnFd具有1个典型的[2Fe-2S]结构域;同源分析显示,OnFd与玉米Fd3的相似度最高(64.29%)。蛋白亚细胞定位结果显示OnFd定位于叶绿体。实时荧光定量PCR检测发现:OnFd基因在花中表达量最高,其次是叶与根,在假鳞茎中表达量最低;接种病原菌研究显示,文心兰感染软腐病后,各个部位的OnFd基因表达量均呈上升趋势,尤其是接种部位假鳞茎在接种病原菌1d后表达量便表现出极显着上调,并且在5个感病阶段的表达量是健康植株的2.83~3.98倍。研究表明,OnFd基因可能在文心兰响应抗软腐病过程中具有重要作用。(本文来源于《西北植物学报》期刊2017年01期）
冷非凡,景艳军,王永刚,魏清伟,罗文[7]（2017）在《嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁氧还蛋白的生物信息学分析》一文中研究指出从NCBI数据库中下载了3种铁氧还蛋白(ACK79261.1,ACK79281.1和ACK80954.1)序列,利用网站在线预测结合软件分析,对其基本理化性质、蛋白修饰、保守结构域、亚细胞定位、二级和叁级结构预测和蛋白相互作用网络等方面进行分析和预测。所得数据表明,3种蛋白质均为不稳定的亲水性蛋白质,等电点偏酸性,不含信号肽,均在细胞质中发挥作用;蛋白相互作用分析预测ACK79261.1在核酸代谢过程中发挥重要作用,ACK79281.1主要参与了细胞内的2Fe-2S簇的组装,ACK80954.1对于能量和电子传递必不可少。本研究利用生物信息学预测了铁氧还蛋白结构和功能,为后续研究嗜酸氧化亚铁硫杆菌中的电子传递过程以及菌株改良、应用推广提供理论上的依据。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2017年04期）
叶炜,林玉玲,匡云波,江金兰,李永清[8]（2015）在《文心兰转化龙眼不同类型铁氧还蛋白基因提高抗病作用分析》一文中研究指出以含5mg·L-1潮霉素MS培养基进行抗性筛选培养,以EHA105农杆菌介异,将龙眼2个非光合铁氧还蛋白基因导入文心兰,结果表明,所获Fd3转化植株表现更高的移栽成活率和对抗病害的能力。与野生型植株相比,Fd3转化植株抵抗软腐病能力提高,由高感软腐病(Di=100)提升为中抗软腐病(Di=27.5),移栽成活率由79.3%提高至95.7%,均达极显着差异水平。(本文来源于《福建农业学报》期刊2015年09期）
杨超,胡红涛,吴平,莫肖蓉[9]（2014）在《高等植物铁氧还蛋白-NADP~+氧化还原酶研究进展》一文中研究指出高等植物叶绿体定位的铁氧还蛋白-NADP+氧化还原酶(LFNR)负责催化光合线性电子传递的最后一步反应,催化电子由还原态的铁氧还蛋白(Fd)传递给NADP+。LFNR分布在叶绿体的3个不同的组分中,即叶绿体基质中、类囊体膜上和叶绿体内膜上。最近的研究表明,大多数膜定位的LFNR并非光合作用所必需的,叶绿体基质中的LFNR足以维持光合作用的正常进行。叶绿体中的两个蛋白——Tic62和TROL作为LFNR的锚定蛋白,可以与LFNR在类囊体膜上形成高分子量的蛋白复合体。Tic62-LFNR复合体主要负责在夜间保护LFNR的活性,但它不直接在光合作用中起作用。然而,TROL-LFNR复合体对植物的光合作用有一定的影响。本文将概述植物LFNR的最新研究进展。(本文来源于《植物生理学报》期刊2014年09期）
刘兵,魏海轩,苏建斌,张洋,王金发[10]（2013）在《拟南芥铁氧还蛋白基因缺失促进花期提前的初步研究(英文)》一文中研究指出拟南芥的红光/远红光受体光敏色素(PHYs)参与花期调节过程,而铁氧还蛋白色素还原酶(FD-BRs)的一种——植物色素合成酶(HY2)对于光敏色素的合成是必不可少的。研究发现拟南芥铁氧还蛋白——AtFd2的基因缺失突变体(Fd2-KO突变体)在长日照与短日照培养条件下,较其野生型而言均表现出花期提前的表型,而且显示AtFd2与AtHY2在叶绿体中发生互作,并且Fd2突变体对光敏色素的反应受到抑制。推测At-Fd2基因的缺失可能通过影响光敏色素介导的相关生理功能进而对植株的花期进行调节。(本文来源于《中山大学学报(自然科学版)》期刊2013年03期）
铁氧还蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的为了将人铁氧还蛋白(adrenodoxin,FDX)在293T细胞中表达,扩增FDX的ORF,将FDX的ORF插入到哺乳动物细胞表达载体pcDNA的NotI/KpnI,构建表达载体。方法以GeneBank报道的FDX的mRNA序列(NM_004109.5)为模板设计引物,在5'和3'分别引入限制性酶切位点NotI和KpnI,从HepG2的cDNA中扩增FDX的ORF,将FDX的PCR产物和空载体pcDNA3.1用NotI和KpnI双酶切4 h,酶切产物用DNA回收试剂盒回收。将FDX的PCR酶切产物分别连接到空载体NotI/KpnI,连接产物转化DH5α,培养过夜。挑单克隆,用PCR鉴定阳性克隆并测序。结果经1%琼脂糖凝胶电泳和EB染色,观察到一500 bp条带,阳性克隆的测序结果与GeneBank报道的核酸序列一致。结论应用常规分子克隆方法已成功构建了FDX的真核表达载体pcDNA-FDX。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
铁氧还蛋白论文参考文献
[1].陈晨,彭培佩,王健,黄芳,王芃.利用NCI-H1975细胞筛选对奥西替尼耐药的铁氧还蛋白1基因及其功能鉴定[J].中国药理学与毒理学杂志.2019
[2].许兰,陈思航,田瑞莹,尚书凤.人铁氧还蛋白表达载体构建[J].科技创新导报.2019
[3].王磊,刘彬,于大禹.光合系统铁氧还蛋白-NADP氧化还原酶的辅因子特异性改造[C].中国生物化学与分子生物学会第十二届全国会员代表大会暨2018年全国学术会议摘要集.2018
[4].景艳军.嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁氧还蛋白基因fdⅠ和fdⅡ的克隆及其重金属抗性研究[D].兰州理工大学.2017
[5].吴晓佩.文心兰离体培养优化及转化铁氧还蛋白基因研究[D].福建农林大学.2017
[6].吴晓佩,谢礼洋,白玉,叶炜,林争春.文心兰铁氧还蛋白基因克隆定位及表达分析[J].西北植物学报.2017
[7].冷非凡,景艳军,王永刚,魏清伟,罗文.嗜酸氧化亚铁硫杆菌中铁氧还蛋白的生物信息学分析[J].基因组学与应用生物学.2017
[8].叶炜,林玉玲,匡云波,江金兰,李永清.文心兰转化龙眼不同类型铁氧还蛋白基因提高抗病作用分析[J].福建农业学报.2015
[9].杨超,胡红涛,吴平,莫肖蓉.高等植物铁氧还蛋白-NADP~+氧化还原酶研究进展[J].植物生理学报.2014
[10].刘兵,魏海轩,苏建斌,张洋,王金发.拟南芥铁氧还蛋白基因缺失促进花期提前的初步研究(英文)[J].中山大学学报(自然科学版).2013
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