基于转录组挖掘‘云香’水仙萜类合成基因及NaIDI的克隆

基于转录组挖掘‘云香’水仙萜类合成基因及NaIDI的克隆

论文摘要

为深入挖掘中国水仙转录组中萜类合成相关基因,了解中国水仙萜类代谢途径和分子调控机制,该研究以‘云香’水仙为材料,在其盛花期花瓣与副冠转录组测序的基础上,筛选已注释的萜类合成途径基因并利用NCBI blastn进行再注释,通过对部分候选基因的表达量与生物信息分析进一步筛选出代表基因,采用RT-PCR技术克隆了水仙异戊烯基焦磷酸异构酶基因NaIDI,并对其蛋白序列与特异性表达进行分析。结果表明:(1)Blast比对筛选得到52个与萜类合成上游途径相关的Unigenes,二次筛选获得11个显著差异表达的代表基因。(2)NaIDI基因开放阅读框(ORF)长度为858 bp,编码285个氨基酸,其氨基酸序列与‘金盏银台’水仙相似度97.19%;亚细胞定位预测显示该基因定位在叶绿体;系统进化分析表明其与芦笋亲缘关系比较近。(3)实时荧光定量分析结果表明,NaIDI基因在水仙开花的不同时期和不同组织器官中差异表达显著,且在盛花期时副冠中的表达量最高,与中国水仙挥发性萜类化合物在开花不同时期和不同组织器官中的表达规律一致,表明NaIDI在萜类代谢中发挥着一定作用。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 试验材料
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 萜类合成相关基因的鉴定与筛选
  •     1.2.2 差异表达基因qRT-PCR分析
  •     1.2.3 NaIDI基因克隆及生物信息学分析
  •     1.2.4 NaIDI实时荧光定量PCR表达分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 萜类合成相关基因筛选
  •   2.2 代表基因差异表达分析
  •   2.3 NaIDI 的克隆及理化性质分析
  •   2.4 NaIDI蛋白的生物信息学分析
  •   2.5 NaIDI定量表达分析
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李琳,肖瑶宇,李科,李欢,陈晓静

    关键词: 云香水仙,转录组,萜类代谢,异戊烯基焦磷酸异构酶

    来源: 西北植物学报 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,园艺

    单位: 福建农林大学园艺学院,福建农林大学园艺植物遗传育种研究所,厦门大学环境与生态学院

    基金: 福建省种业项目(2014S1477-7)

    分类号: S682.21;Q943.2

    页码: 1379-1388

    总页数: 10

    文件大小: 4654K

    下载量: 112

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