控释重组人骨形态发生蛋白-2和血管内皮生长因子的微囊支架对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

控释重组人骨形态发生蛋白-2和血管内皮生长因子的微囊支架对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的影响

论文摘要

目的探讨控释重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant huaman bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)微囊支架对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,b MSCs)向成骨细胞分化的影响。方法以聚乳酸-聚乙二醇-聚乳酸三嵌段共聚物[polylactide-poly(ethylene glycol)-polylactide,PELA]为囊材,采用复乳溶剂挥发法制备外黏附rhBMP-2内包封VEGF的微囊支架。经ELSIA法检测微囊支架在PBS中释放rhBMP-2和VEGF的浓度。将微囊支架加入bMSCs,于培养后第3、7、14天,MTT法检测微囊支架对bMSCs活性的影响,Western blot法检测微囊支架对bMSCs向成骨细胞分化过程中MAPK通路相关蛋白及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)表达水平的影响。结果微囊支架于PBS中培养第2天rhBMP-2释放约60%,VEGF释放约32%。随着培养时间的延长,微囊支架对bMSCs的细胞活性无明显影响(P>0. 05);培养后第14天磷酸化ERK1/2及ALP表达水平均显著高于第3和7天(P <0. 05),培养后第7天显著高于第3天(P <0. 05);培养后第3、7、14天磷酸化JNK及磷酸化p38表达水平变化差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论控释rhBMP-2及VEGF的微囊支架可诱导bMSCs向成骨细胞分化,可能是通过激活MAPK通路发挥作用。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞
  •   1.2 主要试剂
  •   1.3 微囊支架的制备
  •   1.4 微囊支架中rhBMP-2和VEGF释放浓度的检测
  •   1.5 微囊支架对bMSCs活性影响的检测
  •   1.6 微囊支架对bMSCs向成骨细胞分化过程中MAPK通路影响的检测
  •   1.7 微囊支架对b MSCs向成骨细胞分化过程中ALP表达水平影响的检测
  •   1.8 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 微囊支架中rhBMP-2和VEGF的释放浓度
  •   2.2 微囊支架对bMSCs活性的影响
  •   2.3 微囊支架对bMSCs向成骨细胞分化过程中MAPK通路的影响
  •   2.4 微囊支架对bMSCs向成骨细胞分化过程中ALP表达水平的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 任前贵,张坤,任威,孙韬,李永峰,马丽波

    关键词: 人骨形态发生蛋白,血管内皮生长因子,微囊支架,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,通路

    来源: 中国生物制品学杂志 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,生物医学工程

    单位: 内蒙古医科大学第二附属医院急诊科

    基金: 内蒙古医科大学科技百万项目(YKD2015059)

    分类号: R318

    DOI: 10.13200/j.cnki.cjb.002913

    页码: 1357-1360+1376

    总页数: 5

    文件大小: 287K

    下载量: 154

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