禽腺病毒血清4型RPA-LFD快速检测方法的建立

论文摘要

为了建立一种快速、灵敏、简便的禽腺病毒血清4型（FAdV-4）现场检测方法,本试验将重组酶聚合酶扩增（RPA）与胶体金侧向流试纸条（LFD）技术联合,设计针对FAdV-4hexon基因的特异性RPA引物,上、下游引物的5′端分别进行6-羧基荧光素（FAM）和生物素（Biotin）标记。通过对引物浓度、RPA反应时间和温度等条件的优化,建立了一种可用于FAdV-4现场检测的RPA-LFD方法。该检测方法在25～45℃恒温反应15 min即可实现对FAdV-4目的基因片段的有效扩增,RPA扩增产物用胶体金侧向流试纸条进行检测,检测结果肉眼可见。该方法的最低检测限为100拷贝,敏感性是常规PCR的100倍,且与其他常见禽病病原核酸检测无交叉反应。结果显示,本试验建立的RPA-LFD可用于FAdV-4的临床快速检测,为FAdV-4感染的流行病学检测提供了一种有效方法。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 万文妍,刘延珂,吴艳阳,杨东东,王增,赵军

关键词: 禽腺病毒血清型,重组酶聚合酶扩增,侧向流试纸条,快速检测

来源: 中国兽医学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 河南农业大学牧医工程学院

基金: 国家重点研发计划资助项目(2016YFD0501102,2016YFD0500802)

分类号: S852.65

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.01.08

页码: 41-45

总页数: 5

文件大小: 521K

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