细胞壁纤维素合成及沉积调控拟南芥对CuO NPs抗性的机制研究

细胞壁纤维素合成及沉积调控拟南芥对CuO NPs抗性的机制研究

论文摘要

目前,关于纳米颗粒(Nanoparticles,NPs)的植物毒理学研究取得了较大进展。有关CuO NPs对拟南芥、黄瓜、玉米和凤眼莲等的影响已有报道,包括对植株个体发育、抗氧化系统及基因水平的毒性效应。然而,CuO NPs对植物细胞壁发育影响的分子机制及细胞壁响应CuO NPs胁迫的抗性机制仍不清楚,本研究以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为研究材料,针对毒性机制和抗性机制这两方面进行了深入探讨。毒性机制方面,从细胞壁各组分合成,到纤维素合酶复合物的运动、纤维素沉积与排列,具体阐述了CuO NPs对植物细胞壁发育影响的分子机制;抗性机制方面,对细胞壁富集机制进行了深入研究,包括CuO NPs的亚细胞分布和细胞壁各多糖组分及其官能团对CuO NPs的螯合,重点讨论了细胞壁骨架组分纤维素在植物富集CuO NPs时的关键作用。主要研究结论如下:(1)CuO NPs影响拟南芥细胞壁发育的分子机制。CuO NPs能直接进入拟南芥根尖表皮细胞,使微管的线性排列受损,纤维素合酶复合物(CSCs)原有的双向线性运动受到影响,细胞壁骨架成分纤维素的合成受阻,导致纤维素含量降低、排列紊乱;对根系形态的影响表现为根尖分生区表皮细胞膨大,伸长受到抑制,最终导致拟南芥幼苗根系生长异常;通过CuO NPs上清液(CuO Sup)的对照试验发现根系毒性效应来源于CuO NPs本身,而不是CuO NPs溶液中释放的Cu2+。(2)拟南芥细胞壁对CuO NPs的富集。在CuO NPs胁迫下,细胞壁对CuO NPs起着一定的阻隔作用,大约64.2%CuO NPs被固定在细胞壁上,其中44.6%、36.4%、18.9%分别与果胶、半纤维素及纤维素结合。对CuO NPs起着固定作用的主要是多糖上的负电基团,如–OH和–COO–,此外,–C–O、═C–H和C–C也参与CuO NPs的结合。细胞壁通过这种螯合作用将大部分CuO NPs富集在细胞壁中,从而降低了CuO NPs对植物的毒性。(3)细胞壁骨架组分纤维素在植物富集CuO NPs过程中的关键作用。拟南芥纤维素缺陷突变体幼苗je5和盐胁迫下的纤维素缺陷突变体cc1/cc2(cc1/cc2-NaCl)的细胞壁中纤维素含量显著低于野生型WT,且排列紊乱,因此导致其细胞壁对CuO NPs的阻隔能力减弱,更多的CuO NPs进入细胞内,对幼苗的毒性效应更加显著。因此,纤维素在植物抵抗CuO NPs胁迫时起着重要作用,其结构和功能的完整性是细胞壁正常富集CuO NPs,并降低其毒性的基础。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 1 引言
  •   1.1 纳米材料
  •     1.1.1 纳米材料的性质
  •     1.1.2 纳米材料在农业领域的应用
  •     1.1.3 纳米材料的环境效应
  •   1.2 植物抗逆性
  •     1.2.1 纳米材料在植物中的迁移转化
  •     1.2.2 植物细胞壁抵抗非生物胁迫的研究进展
  •     1.2.3 高等植物的纤维素
  •   1.3 本研究背景、内容及创新点
  •     1.3.1 选题背景
  •     1.3.2 研究内容及拟解决的问题
  •     1.3.3 本研究的创新点
  •     1.3.4 技术路线图
  • 2 CuO NPs的理化性质表征
  •   2.1 引言
  •   2.2 材料与方法
  •     2.2.1 仪器与药品
  •     2.2.2 纳米氧化铜的形貌表征
  •     2.2.3 培养液中铜离子的释放
  •   2.3 结果与讨论
  •     2.3.1 纳米氧化铜的表征
  •     2.3.2 培养液中铜离子的释放
  •   2.4 本章小结
  • 3 CuO NPs对拟南芥细胞壁发育的影响
  •   3.1 引言
  •   3.2 材料和方法
  •     3.2.1 仪器与药品
  •     3.2.2 植物培养及处理
  •     3.2.3 相关指标测定
  •   3.3 结果与分析
  •     3.3.1 CuO NPs对拟南芥的毒性
  •     3.3.2 拟南芥幼苗对CuO NPs的吸收与积累
  •     3.3.3 CuO NPs对拟南芥细胞壁发育的影响
  •     3.3.4 CuO NPs对纤维素合成影响的分子机制
  •   3.4 本章小结
  • 4 拟南芥细胞壁响应CuO NPs胁迫的耐性机制
  •   4.1 引言
  •   4.2 材料与方法
  •     4.2.1 仪器与药品
  •     4.2.2 植物培养及处理
  •     4.2.3 相关指标测定
  •   4.3 结果与分析
  •     4.3.1 CuO NPs的亚细胞分布
  •     4.3.2 不同细胞壁多糖组分中Cu含量的测定
  •     4.3.3 细胞壁红外表征
  •   4.4 本章小结
  • 5 纤维素在CuO NPs富集中的作用
  •   5.1 引言
  •   5.2 材料和方法
  •     5.2.1 仪器与药品
  •     5.2.2 植物培养
  •     5.2.3 相关指标测定
  •   5.3 结果与讨论
  •     5.3.1 ICS细胞壁分析
  •     5.3.2 细胞壁各多糖组分含量
  •     5.3.3 细胞壁纤维素沉积与排列
  •     5.3.4 幼苗中Cu的含量及生物毒性
  •   5.4 本章小结
  • 6 全文研究结论与展望
  •   6.1 研究结论
  •   6.2 研究展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间公开发表的论文
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 杨珺

    导师: 贾红磊

    关键词: 细胞壁,纤维素,拟南芥

    来源: 陕西科技大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,环境科学与资源利用

    单位: 陕西科技大学

    分类号: X171.5

    总页数: 68

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