荧光抗体病毒中和试验论文-张菲

荧光抗体病毒中和试验论文-张菲

导读:本文包含了荧光抗体病毒中和试验论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:狂犬病病毒,荧光抗体病毒中和试验,中和抗体,检测方法

荧光抗体病毒中和试验论文文献综述

张菲[1](2014)在《荧光抗体病毒中和试验在狂犬病疫苗研制及免疫监测中的应用》一文中研究指出狂犬病(rabies)是由狂犬病病毒(rabies virus,RABV)感染引起的一种主要在犬科动物和野生动物中流行的重要病毒性传染病,在动物流行过程中可发生外溢,传播给人类和其他家畜,是一种重要的人兽共患传染病。全球每年狂犬病死亡人数约55000人,我国死亡人数居世界第二,每年2000-3000人,在我国甲乙类传染病中居前叁位。预防狂犬病发生的根本在于对传染源动物进行疫苗接种,免疫覆盖率是评价疫苗接种效果的重要指标。我国狂犬病的传染源主要是家养犬、猫,针对不同的动物设计和研发的疫苗种类不同,包括灭活疫苗、活疫苗和重组口服疫苗。因此,评价疫苗效力的方法也不尽相同。另外,不同个体之间疫苗接种后机体应答反应的程度也不一致,故可以通过测定不同个体狂犬病中和抗体的水平,判断免疫持续时间的长短。本研究利用本实验室自行建立的荧光抗体病毒中和试验(FAVN),在狂犬病疫苗研制过程中的效力评价、动物种群狂犬病免疫监测以及海关出境动物的检疫等测定方面开展了应用研究。首先,使用实验室前期获得的抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体,制备异硫氰酸荧光黄标记荧光抗体,利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清,并以OIE标准品进行标定,参考OIE指定方法,确定中和试验程序,对52份样品血清进行测定,并与狂犬病参考实验室检测结果进行比较,以K ber法公式和Microsoft Excel软件为基础,设计了被测样品中抗体中和效价的计算方法。利用以上方法,在新研制的新型佐剂灭活狂犬病疫苗接种的小鼠和猫不同时间后,对其免疫效果和免疫持续期进行了评价,同时设置标准疫苗对照组,其中小鼠的14天血清测定结果用于疫苗效力的判定。结果显示,新型佐剂灭活疫苗效力可以达到3.0IU/mL以上;狂犬病灭活疫苗免疫猫后14内未见任何不良反应,14天时其诱导的中和抗体水平平均达16.04±4.29IU/mL,28天平均达37.13±6.12IU/mL,56天时为21.01±7.61IU/mL。180天时为6.71±3.44IU/mL,360天时为2.66±2.01IU/mL。这些抗体水平均可抵抗强毒攻击。其次,利用建立的FAVN法对2013年来自我国部分城市和农村地区犬、猫等动物的血清样品进行了监测,结果表明,我国农村不同地区狂犬病抗体阳性率即免疫覆盖率为0.98%~28.9%;北京、深圳等不同城市的狂犬病免疫覆盖率均在70%以上。测定结果为当地狂犬病预防及时提供了准确的免疫监测数据,为有效防疫提供了重要的数据。最后,本研究还对国内出国人员所携带的欲出境宠物的狂犬病抗体送检样品进行了检测检疫,由于宠物主人在送检前均给宠物注射了进口疫苗,因此狂犬病中和抗体水平均在保护临界值(0.5IU/mL)以上,阳性率100%,但结果未能发现进口疫苗和国产疫苗在免疫效果上存在显着差异,表明这些犬没有感染和传播狂犬病的危险。以上结果表明,FAVN不仅可用于免疫动物抗体测定以及出境动物检疫的可靠方法,而且可用来进行疫苗效力的评价,拓展了其应用范围,是一种具有重要应用价值的抗体检测技术。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2014-06-01)

吕新军,唐青,Hervé,Bourhy,马学军[2](2010)在《狂犬病病毒中和抗体检测快速荧光灶抑制试验的建立》一文中研究指出RFFIT是WHO推荐的检测狂犬病病毒中和抗体的标准实验方法[1],美国疾病预防控制中心狂犬病实验室、法国巴斯德研究所狂犬病实验室等国际知名狂犬病研究机构都采用该方法进行狂犬病病毒中和抗体检测,保护水平的中和抗体效价应≥0·5 IU/m l。RFFIT主(本文来源于《中国卫生检验杂志》期刊2010年02期)

吴小红,李加,唐建蓉,Hervé,Bourhy,刘景华[3](2009)在《抗狂犬病病毒中和抗体效价快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的建立及应用》一文中研究指出目的建立抗狂犬病病毒中和抗体效价的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),验证其与小鼠脑内中和法(MNT)的相关性,并用于马抗狂犬病病毒血清(ERIG)和人狂犬病免疫球蛋白(HRIG)及狂犬病疫苗免疫后血清中和抗体效价的测定。方法待测血清或免疫球蛋白在96孔板中作3倍系列稀释,与能感染80%~95%细胞量的攻击病毒混合后,37℃体外中和1h,接种BSR细胞,培养24h后荧光染色,荧光显微镜下读取结果。用建立的RFFIT法与MNT法同时标定狂犬病免疫球蛋白国家标准品,并检测ERIG和HRIG以及疫苗免疫后血清样品的抗狂犬病病毒中和抗体效价,以比较两种方法的精密度和相关性。结果采用MNT法和RFFIT法检测我国抗狂犬病免疫球蛋白国家标准品的GMT分别为21.4和23.8IU/ml,两种方法的变异系数分别为62.3%和13.3%;两个实验室用RFFIT法测定我国国家标准品的结果分别为21.71和23.81IU/ml。两种方法测定ERIG和HRIG及疫苗免疫后血清中和抗体效价的结果差异无统计学意义,相关系数为0.976,两种方法的检测结果之间呈良好的正相关性。结论RFFIT法可替代MNT法检测抗狂犬病病毒中和抗体效价。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2009年11期)

王晓虎[4](2007)在《狂犬病病毒荧光抗体病毒中和试验实验室检测方法的建立及应用》一文中研究指出狂犬病是一种病死率极高的人兽共患传染病,我国是狂犬病的高发地区。近年来,随着狂犬病日趋严重,动物狂犬病的大规模免疫计划已纳入日程,但目前我国尚缺乏狂犬病免疫检测和效价评价的可靠手段。本研究旨在建立一种狂犬病病毒血清中和抗体效价的实验室检测标准方法,即荧光抗体病毒中和试验(FAVN),并该方法初步应用于狂犬病免疫检测及疫苗免疫效果评价。首先,使用实验室前期获得的抗狂犬病病毒核蛋白单抗,制备异硫氰酸荧光黄标记荧光抗体;利用狂犬病毒灭活疫苗免疫犬制备抗狂犬病毒血清,并以国际兽疫局标准品进行标定;参考世界卫生组织及国际兽疫局推荐方法,确定中和试验程序,对51份样品血清进行测定,并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较,两次结果一致。以K?ber法公式和Microsoft Excel软件为基础,设计被测样品中和效价计算方法,该计算方法操作简便、快捷。然后,依据建立的FAVN法对来自我国部分城市和农村地区,以及本实验室研制疫苗免疫的犬、猫等动物的血清样品进行了检测,测定结果为当地狂犬病预防及时提供了准确的免疫监测数据,也为疫苗免疫效果做出了定量评价。(本文来源于《吉林大学》期刊2007-04-01)

张守峰,曹亮,张菲,李海涛,李清竹[5](2006)在《狂犬病病毒核蛋白单抗杂交瘤细胞株及荧光抗体病毒中和试验(FAVN)的建立与应用》一文中研究指出目的 通过建立针对狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体杂交瘤和制备荧光标记的单克隆抗体,建立狂犬病病毒血清中和抗体效价的快速检测方法 ,以实现狂犬疫苗免疫效果的定量评价,指导高危人群及动物种群的免疫预防并为狂犬病的相关研究提供检测方法。方法 采用常规方法建立杂交瘤细胞株并制备抗狂犬病病毒核蛋白单抗,以亲和层析法进行纯化,异硫氰酸荧光黄(FITC)标记制备荧光抗体;以BHK-21细胞系培养狂犬病病毒细胞适应株CVS-11,以染毒细胞测定荧光抗体的工作浓度后,通过荧光抗体染色法测定CVS-11细胞半数感染量(TCID50);利用狂犬病灭活苗免疫犬制备抗狂犬病血清,并以OIE标准品进行标定;参考WHO及OIE推荐方法 ,确定中和试验程序,对51份样品血清进行测定,并与国际狂犬病参考实验室的检测结果进行比较,评价其精确及可靠程度。以K?ber法公式和Microsoft Excel?软件为基础,设计被测样品中和效价计算工具。结果:制备的抗狂犬病病毒核蛋白单抗的亚型为IgG2a;纯化、标记后的荧光抗体工作浓度为1:400;CVS-11株的使用量为每孔100TCID50;本研究建立的检测程序对51份人及犬血清测得的中和效价结果与国际参考实验室的测定结果一致;自行设计的计算工具操作简单,计算快捷。结论 本研究成功建立了荧光标记的抗狂犬病病毒核蛋白的单克隆抗体,并建立了与国际标准相当的狂犬病病毒中和抗体效价测定和计算方法 ,具有良好检测效果,可用于不同动物和人狂犬病病毒中和抗体的免疫监测。(本文来源于《全国人畜共患病学术研讨会论文集》期刊2006-05-18)

严家新,李承平,朱家鸿,曹瑞瑶,薛红钢[6](1998)在《检测狂犬病病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法的建立》一文中研究指出在制备出抗狂犬病病毒(RV)核蛋白(NP)荧光标记抗体的基础上,建立起检测RV中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法。经与小鼠中和试验(MNT)比较,其重复性、特异性和灵敏度差异均无显着意义。该方法在大多数需要检测RV中和抗体的情况下可取代MNT。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊1998年02期)

C.A.Whetstone,廖国安[7](1989)在《病毒中和试验和免疫荧光试验确定犬腺病毒1型和2型型特异性的单克隆抗体》一文中研究指出该作者已经研制出抗犬腺病毒1型(CAV-1)Mirandola 株和犬腺病毒2型(CAV-2)Manhattan 株的单克隆抗体。在体外,用这些单克隆抗体进行病毒中和试验(VN)和间接荧光抗体试验(IFA),以检查待检株的病毒类型。从制备的针对(本文来源于《中国兽药杂志》期刊1989年01期)

荧光抗体病毒中和试验论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

RFFIT是WHO推荐的检测狂犬病病毒中和抗体的标准实验方法[1],美国疾病预防控制中心狂犬病实验室、法国巴斯德研究所狂犬病实验室等国际知名狂犬病研究机构都采用该方法进行狂犬病病毒中和抗体检测,保护水平的中和抗体效价应≥0·5 IU/m l。RFFIT主

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

荧光抗体病毒中和试验论文参考文献

[1].张菲.荧光抗体病毒中和试验在狂犬病疫苗研制及免疫监测中的应用[D].吉林农业大学.2014

[2].吕新军,唐青,Hervé,Bourhy,马学军.狂犬病病毒中和抗体检测快速荧光灶抑制试验的建立[J].中国卫生检验杂志.2010

[3].吴小红,李加,唐建蓉,Hervé,Bourhy,刘景华.抗狂犬病病毒中和抗体效价快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的建立及应用[J].中国生物制品学杂志.2009

[4].王晓虎.狂犬病病毒荧光抗体病毒中和试验实验室检测方法的建立及应用[D].吉林大学.2007

[5].张守峰,曹亮,张菲,李海涛,李清竹.狂犬病病毒核蛋白单抗杂交瘤细胞株及荧光抗体病毒中和试验(FAVN)的建立与应用[C].全国人畜共患病学术研讨会论文集.2006

[6].严家新,李承平,朱家鸿,曹瑞瑶,薛红钢.检测狂犬病病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT)方法的建立[J].中国生物制品学杂志.1998

[7].C.A.Whetstone,廖国安.病毒中和试验和免疫荧光试验确定犬腺病毒1型和2型型特异性的单克隆抗体[J].中国兽药杂志.1989

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