周期蛋白Cyc2的过量表达及突变抑制嗜热四膜虫有性生殖发育

论文摘要

周期蛋白在细胞增殖过程中呈现周期性表达变化,不同的周期蛋白通过结合周期蛋白激酶（cyclin-dependent kinase,CDKs）及靶向特定蛋白质参与细胞有丝分裂和减数分裂过程的精确调控。嗜热四膜虫有性生殖期特异表达的B3型周期蛋白Cyc2（cyclin 2,Cyc2）对减数分裂的启始是必需的,但Cyc2蛋白的分子调控机制并不清楚。本研究通过0.1μg/mL和0.3μg/mL镉离子诱导突变细胞株OE-CYC2-B2086和OE-CYC2-CU428中CYC2基因在金属硫蛋白1基因（metallothionein gene 1,MTT1）启动子调控下上调表达。实时荧光定量PCR检测突变株OE-CYC2-B2086和OE-CYC2-CU428中CYC2的转录水平分别上调7.8倍和9.8倍。细胞有性生殖发育进程的荧光显微观察发现CYC2的表达上调并不影响有性生殖前期减数分裂的启始,但是干扰四膜虫有性生殖后期中新大核和新小核的正确形成。同时突变株OE-CYC2-B2086和OE-CYC2-CU428交配后,在镉离子诱导下不能产生有性生殖后代,但是该突变株分别和两种不同野生型细胞或CYC2敲除的突变细胞株交配能够恢复产生3%,15%或32%的有性生殖后代,有性生殖发育异常程度与CYC2的表达水平成正相关。进一步突变Cyc2第312位磷酸化位点丝氨酸为丙氨酸,获得CYC2单位点突变细胞株CYC2-S312A-B和CYC2-S312A-C。丝氨酸单位点突变阻止了四膜虫有性生殖期小核减数第1次分裂起始。结果表明周期蛋白2的表达水平和磷酸化修饰影响了不同阶段细胞核的功能,周期蛋白2对四膜虫有性生殖发育的正常进行是必需的。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 许静,郭玉凤,王伟

关键词: 嗜热四膜虫,周期蛋白,过表达,突变,有性生殖

来源: 中国生物化学与分子生物学报 2019年04期

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学

单位: 山西大学生命科学学院生物工程系,化学生物学与分子工程教育部重点实验室山西大学生物技术研究所

基金: 国家自然科学基金项目(No31872224,31572253)资助~~

分类号: Q492

DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.04.10

页码: 413-420

总页数: 8

文件大小: 410K

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