菜籽分离蛋白论文-姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰

菜籽分离蛋白论文-姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰

导读:本文包含了菜籽分离蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:菜籽蛋白酶解物,分离纯化,抗肿瘤活性

菜籽分离蛋白论文文献综述

姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰[1](2019)在《菜籽蛋白水解物的分离纯化及抗肿瘤活性研究》一文中研究指出本研究将菜籽蛋白通过碱性蛋白酶-风味蛋白酶分步酶解制备得到菜籽蛋白水解物(RPH),在经过超滤、葡聚糖凝胶柱(Sephadex G-15)以及半制备液相(RP-HPLC)分离纯化得到各级分离组分。采用MTT比色法分析菜籽蛋白水解物各组分RPHs(MW<1 ku)对人体肝癌细胞HepG2、乳腺癌细胞MBA-MD-231及人体结肠癌细胞Caco-2的体外抗增殖活性。当RPHs质量浓度为50~1 000μg/mL时,RPHs对HepG2细胞、MBA-MD-231细胞及Caco-2细胞均有一定的抑制作用,且抑制效果与样品浓度之间呈现出剂量依赖性;其中,HepG2细胞对RPHs的作用最为敏感。经Sephadex G-15凝胶柱分离后得到2个洗脱峰,收集并测定其活性,发现组分RPHs-F2具有更强的抗肿瘤细胞增殖活性;再进一步对其经半制备液相分离得到的组分进行体外抗增殖活性分析发现,除组分RPHs-F2-4外,其他3个分离组分都具有显着的抑制作用,而组分RPHs-F2-3对HepG2细胞具有最高的体外增殖抑制率,当作用质量浓度为1 000μg/mL时,抑制率为(51.53±5.59)%。因此认为菜籽蛋白酶解物分离组分RPHs-F2-3具有较好的抗肿瘤活性,可以作为功能性成分用于抗肿瘤相关的功能食品及保健品的开发。(本文来源于《中国粮油学报》期刊2019年07期)

熊建[2](2018)在《菜籽饼粕蛋白平筛分离及其高生物利用度产品超声辅助酶法制备》一文中研究指出菜籽粕中蛋白质含量高达35%-45%,其中包含大量的必需氨基酸如赖氨酸和蛋氨酸,所以对菜籽蛋白进行高值利用具有十分重要的意义。目前常用的溶剂提取法制备菜籽浓缩蛋白存在着工艺复杂、生产效率低以及污染环境等不足,而且菜籽粕中含有的抗营养因子以及传统的压榨工艺导致的蛋白变性,使得菜籽蛋白的消化吸收率降低,其生产及应用也被大大限制。本课题以双低菜籽粕为原料,旨在以酶解法提高菜籽蛋白多肽的生物利用度,研究了单仓高效平筛制备菜籽浓缩蛋白的效果,探索了水解度对菜籽蛋白生物利用度的影响,最后为提高高生物利用度菜籽蛋白的酶解效率,进一步研究了S形五频超声、脉冲扫频超声以及发散叁频超声波设备对酶解效果的影响。本文的研究内容与主要结论以下:(1)以双低菜籽粕为原料,利用单仓高效平筛制备菜籽浓缩蛋白。通过对原料的粒径分布以及不同粒径原料的成分进行分析得到原料粒径分布的R-R分布函数;对原料蛋白质、植酸的含量进行了相关性分析,结果显示两者具有显着的相关性(r=0.9941)。利用单仓高效平筛制备菜籽浓缩蛋白,以筛下物得率和筛下物蛋白含量为指标研究进料流量和平筛旋转速度对筛分效果的影响,确定制备菜籽浓缩蛋白的最佳工艺为:进机流量为2 kg/min,平筛回转速度为260 r/min,在最优工艺条件下得到的菜籽浓缩蛋白的蛋白含量为56.99%(干基),得率为26.66%,经醇洗脱毒后得到的菜籽浓缩蛋白的蛋白含量可达60.16%(干基)。(2)为了提高双低菜籽粕蛋白的生物利用度,对其进行了蛋白酶解处理,研究了不同水解度菜籽粕蛋白在生物体内的利用情况。分无氮组、酪蛋白组、水解组(水解度分别为4%、8%、12%、16%、20%)叁大类七个组进行了动物的生长和氮代谢实验。动物实验结果表明,酶解反应显着提高了菜籽蛋白的生物利用度,水解度为8%组的大鼠体重增量、表观消化率、真消化率、净蛋白利用率和生物价均显着(p<0.05)高于其他水解组,故水解度为8%的酶解物的生物利用度最高。(3)为提高水解度为8%的高生物利用度菜籽粕蛋白的制备效率,分别采用S形五频超声、脉冲扫频超声和发散式叁频超声波设备对菜籽浓缩蛋白进行预处理,分别对超声模式、初始温度、超声时间和功率密度进行了优化。超声模式优化实验结果表明,S形超声波设备能显着(p<0.05)提高酶解效率和上清液蛋白转化率,并在一定程度上提高酶解液的ACE抑制率。超声最优参数为双频50/28kHz顺序工作,酶解时间为25 min,初始温度为40℃,功率密度为80 W/L。在此条件下进行酶解反应,酶解效率为36.20%,上清液蛋白转化率为62.76%,与未超声组相比提高了86.22%;酶解产物的ACE抑制率为67.90%,与未超声组相比提高了35.28%。(本文来源于《江苏大学》期刊2018-06-01)

王治平[3](2016)在《菜籽分离蛋白糖接枝改性及其功能、结构和消化吸收特性研究》一文中研究指出本论文以菜籽分离蛋白(Rapeseed protein isolated,RPI)和葡聚糖为主要原料,利用湿热法和超声辅助湿热法制备RPI-糖接枝产物,对接枝产物功能、结构及吸收消化特性进行了系统研究,旨在探讨不同制备方法下接枝度对接枝产物功能性和结构的影响,以期为食品工业规模化生产中有效地控制接枝反应提供一定理论和技术基础。研究结果如下:首先,对RPI湿热法、超声辅助湿热法糖接枝的反应条件以及反应还原糖进行了研究。文章以接枝度(DG)为指标,研究湿热接枝过程中反应温度、pH值、反应时间、蛋白与糖配比以及超声辅助湿热接枝过程中超声频率、pH值、反应时间、温度等因素和反应还原糖的种类对接枝反应的影响。结果表明,在湿热反应和超声辅助湿热反应条件下,葡聚糖比葡萄糖更易和RPI发生接枝反应。湿热法糖接枝反应条件为:温度90℃、pH 10、蛋白/糖(质量比)1:1、时间3 h。超声辅助湿热法糖接枝反应条件为:温度90℃、pH 10、蛋白/糖(质量比)1:1、超声频率28 kHz、时间60 min。分别采用湿热法和超声辅助湿热法制备不同接枝度的接枝产物,对RPI-葡聚糖接枝产物的功能特性、结构进行研究。结果表明RPI-葡聚糖接枝产物溶解度、乳化特性、热稳定性改善明显,并随着接枝度增加而增加。RPI-葡聚糖接枝产物接枝度越大疏水性越低。氨基酸分析结果表明,RPI和葡聚糖反应位点为半胱氨酸、赖氨酸和精氨酸残基,并随着接枝度增加这些氨基酸参与反应增多。聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明主要由蛋白7S亚基参与接枝反应,12S和2S亚基也有少量参与。高效液相色谱分析结果表明,随着接枝度增加大分子量蛋白含量不断增加,接枝度较低时增加急剧。傅里叶红外光谱结果显示,接枝反应能引起C-O键伸缩振动增强,蛋白分子中羟基数量增加,葡聚糖通过共价键的形式接入蛋白质分子中。圆二色谱结果显示,接枝产物的α-螺旋结构减少、无规则卷曲结构增多,分子结构由有序向无序转换。电镜扫描结果显示,湿热接枝蛋白随着接枝度增加表面结构越来越疏松,超声辅助湿热接枝蛋白随着接枝度增加表面出现蜂窝状结构增多。接枝产物体外模拟消化吸收特性结果显示,RPI及接枝产物的消化和水解主要在胰蛋白酶酶解阶段。随着接枝度增加消化性减弱,但水解度受接枝度影响不大。同等接枝度,超声辅助湿热接枝产物比湿热法产物的消化率差,但水解性更好。胃蛋白酶消化阶段,RPI及其接枝产物中分子量在110 kDa?85 kDa的蛋白被消化完全。RPI接枝产物中分子量在6.4 kDa以上的蛋白消化率不如RPI,并随着接枝度增加而减小。胰蛋白酶消化阶段,RPI及其接枝产物中分子量为85kDa?70 kDa的蛋白均被消化完全。大鼠离体小肠吸收试验结果表明,RPI及其接枝产物的吸收样品中多肽浓度为消化液中多肽浓度的2?3倍,并随着接枝度的增加,湿热接枝蛋白吸收样品中多肽浓度不断增加,超声辅助湿热接枝蛋白吸收样品中多肽浓度不断减小。RPI接枝产物的体外吸收率同RPI相比没有显着性差异。结合体外模拟消化的结果分析,说明糖接枝使RPI的消化率略有下降,但并不影响消化产物的肠吸收。(本文来源于《江苏大学》期刊2016-06-15)

何海艳,杨爱萍,何荣[4](2016)在《菜籽蛋白水解物及其分离组分抗氧化性研究》一文中研究指出本文采用超滤和凝胶过滤色谱技术分离菜籽蛋白的胃蛋白酶和胰蛋白酶混合水解物(PPH),并通过分析其Fe~(2+)螯合能力、Fe~(3+)还原力、DPPH自由基清除能力和氧自由基吸附能力(ORAC),评价了PPH及其分离组分的抗氧化性。结果表明:菜籽蛋白酶水解物中F3组分的Fe~(2+)螯合能力、Fe~(3+)还原力以及DPPH清除能力和ORAC值都最高,F3组分的ORAC值为(2 118.891±77.782)μmol TE/g,是GSH的1.6倍左右,说明F3组分的抗氧化性最强,其余组分也都表现出一定的抗氧化性,其抗氧化性强弱为:F3>F4>F2>F1>F5。研究认为,胃蛋白酶和胰蛋白酶组合可有效水解菜籽蛋白获得抗氧化肽,获得的分离组分(尤其是F3)可以作为抗氧剂开发相关功能性食品。(本文来源于《粮食与食品工业》期刊2016年02期)

何荣,王凤章,李倩,鞠兴荣[5](2014)在《反相高效液相色谱法分离菜籽蛋白水解物及其组分清除自由基能力的研究》一文中研究指出采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)技术分离菜籽蛋白的蛋白酶k水解物(PKH),并通过分析其DPPH·、O-2·、·OH的清除能力和氧自由基吸附能力(ORAC),评价了PKH及其分离组分清除自由基的能力。结果表明:菜籽肽清除DPPH·的能力与其疏水性之间具有显着的正相关性,疏水性最高的组分清除DPPH·的能力与谷胱甘肽(GSH)相当,IC50值为(0.183 8±0.002 1)mg/m L;分离后菜籽肽的O-2·和·OH清除能力虽然有所提高,但是仍然弱于GSH;4个分离组分的ORAC值高于PKH,其中2个组分的ORAC值与GSH的相当,1个组分(F7)的ORAC值是GSH的1.5倍,其ORAC值(Trolox)高达(2 413.41±162.98)μmol/mg。研究认为,基于疏水性的RP-HPLC分离显着提高了菜籽肽清除自由基的能力,获得的分离组分(尤其是F7)可以作为抗氧剂开发相关功能性食品。(本文来源于《中国油脂》期刊2014年12期)

高瑀珑,郑锐,王玉梅,王立峰,鞠兴荣[6](2014)在《菜籽分离蛋白分子质量分布及酶解条件的研究》一文中研究指出以脱脂"双低"油菜籽为原料,利用碱溶解酸沉淀法提取菜籽分离蛋白;用SDS-PAGE凝胶电泳研究菜籽蛋白的分子质量的组成;以水解度和氮回收率为考察指标,用响应面分析法拟合了Alcalase 2.4L酶解菜籽蛋白成菜籽肽的二次多项数学模型,优化了酶解菜籽分离蛋白的工艺参数。SDS-PAGE凝胶电泳研究表明利用碱溶解酸沉淀提取的菜籽分离蛋白主要是2S清蛋白。响应面分析法研究的试验结果表明,酶的使用量、pH、酶解温度、酶的使用量与pH的交互作用对Alcalase 2.4L酶解菜籽蛋白的水解度和氮回收率的影响均显着(P<0.05)。通过求解菜籽肽的二次多项数学模型的逆矩阵方程,可得Alcalase 2.4L水解菜籽分离蛋白的最佳条件为:酶的使用量0.05 Au/g,pH 9.0,酶解温度54℃;在此酶解条件下,菜籽分离蛋白浓度为5%时,水解5 h,所得的水解度和氮回收率分别为35.12%及52.96%。(本文来源于《中国粮油学报》期刊2014年06期)

鞠兴荣,郑毅,王立峰,后其军[7](2014)在《菜籽蛋白水解物及其膜分离组分的体外抗肿瘤活性研究》一文中研究指出应用胃肠道蛋白酶水解菜籽分离蛋白,并通过膜分离技术将水解物分离成4种不同分子量组分(<1 kDa、1~3 kDa、3~5 kDa和5~10 kDa);研究了水解物和不同组分对HepG2、HeLa和MCF-7叁种肿瘤细胞的体外增殖抑制作用及其氨基酸组成。结果表明:水解物及各组分对HepG2体外增殖具有较明显的抑制作用,而对HeLa和MCF-7体外增殖的抑制效果不明显;<1kDa的组分对HepG2的抑制率最强(36.4%),其氨基酸组成中以谷氨酸、亮氨酸、天冬氨酸含量最高。研究认为,菜籽蛋白胃肠道蛋白酶水解物及其<1 kDa的膜分离组分可能作为功能性成分用于抗肿瘤相关的功能食品和保健品的开发。(本文来源于《粮食与食品工业》期刊2014年03期)

何荣,鞠兴荣[8](2013)在《菜籽蛋白水解物及其膜分离组分的降血压相关活性》一文中研究指出应用商业化蛋白酶Alcalase水解菜籽分离蛋白(RPI),并通过膜分离技术将水解物分离成4种不同分子质量大小的多肽组分(<1kD、1~3kD、3~5kD和5~10kD);评价水解物(RPH)和多肽组分的血管紧张素转化酶-Ⅰ(ACE)、肾素抑制活性和氧自由基吸收能力(ORAC)。结果表明:分子质量大小与菜籽肽的氧自由基吸附能力成负相关;<1kD的组分具有最大的ACE抑制活性(抑制率为(83.42±0.35)%)和氧自由基吸附能力;与膜分离组分相比,Alcalase水解物具有最高的肾素抑制活性。研究认为,菜籽蛋白Alcalase水解物及其<1kD的膜分离组分可能作为功能性成分用于降血压相关的功能食品和保健品的开发。(本文来源于《食品科学》期刊2013年15期)

钮琰星,祝俊,黄凤洪,黄庆德,黄茜[9](2011)在《以脱皮冷榨双低菜籽粕为原料制备菜籽分离蛋白的研究》一文中研究指出以脱皮冷榨双低菜籽粕为原料,采用单因素试验和正交试验,对菜籽分离蛋白碱溶二次酸沉制备工艺进行了研究。结果表明,影响分离蛋白提取率的因素中,浸提pH影响最大,液固比次之,提取时间影响最小。优化的制备条件为:pH 11.0,液固比15:1,提取时间30 min,提取温度60℃。该条件下蛋白质提取率为87.69%,产品中蛋白质含量为77.45%。(本文来源于《中国油脂》期刊2011年07期)

任欢[10](2011)在《菜籽蛋白ACE抑制肽的制备及分离纯化研究》一文中研究指出高血压是多种心、脑血管疾病的重要病因和危险因素。目前用来降压的药物都有副作用,因此,人们一直在寻找更安全的降压药。菜籽为我国的主要油料作物之一,而菜籽粕被广泛的当做饲料,脱脂菜籽饼粕含有30%-40%的优质蛋白,是一种潜在的、理想的优质蛋白资源,适合作为制备ACE抑制肽的原料。建立了测定菜籽蛋白ACE抑制肽体外活性检测的RP-HPLC法,确定了预处理过程中反应时间需50min且需经乙酸乙酯处理,并经过了Captopril验证。以菜籽蛋白为原料,比较了碱性蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶及菠萝蛋白酶对其的酶解效果,结果证明使用碱性蛋白酶酶解效果最好,其水解度和ACE抑制活性达到最高,分别为14.25%和53.30%。后以碱性蛋白酶为水解用酶,进行单因素试验,得到最优条件为底物浓度为4%,时间为5h,温度为50℃,酶用量为6Au/g,pH为9。在此基础上,研究了超声波辅助酶解,利用响应面对超声波辅助水解工艺进了优化,得到最佳试验条件:超声波处理时间23min、超声波功率203W、超声波水浴温度46℃。研究用10kDa超滤膜对水解液进行超滤以除去大分子蛋白质,试验结果表明:当待过滤液浓度在12g/L,膜压差在200K Pa左右时,超滤效果较好。收集滤液,进行层析分离,对洗脱液进行了选择,表明水是适合的洗脱液。经凝胶过滤后得到的3#其ACE抑制活性最高。通过对流动相的梯度洗脱条件进行摸索,3#峰组分经反相高效液相进行进一步纯化分离,得到了更纯活性更高的c#峰组分。其纯度达95%以上,且IC50为0.0118mg/mL。对其稳定性研究表明,菜籽ACE抑制肽对ACE的抑制效果随温度升高及时间延长而降低。另外,与肠道酶作用结果表明,菜籽蛋白水解液经消化前后其活性几乎不变,并经HPLC试验得到几乎相同的肽谱,说明其具有较好的消化道酶类耐受性。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2011-06-14)

菜籽分离蛋白论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

菜籽粕中蛋白质含量高达35%-45%,其中包含大量的必需氨基酸如赖氨酸和蛋氨酸,所以对菜籽蛋白进行高值利用具有十分重要的意义。目前常用的溶剂提取法制备菜籽浓缩蛋白存在着工艺复杂、生产效率低以及污染环境等不足,而且菜籽粕中含有的抗营养因子以及传统的压榨工艺导致的蛋白变性,使得菜籽蛋白的消化吸收率降低,其生产及应用也被大大限制。本课题以双低菜籽粕为原料,旨在以酶解法提高菜籽蛋白多肽的生物利用度,研究了单仓高效平筛制备菜籽浓缩蛋白的效果,探索了水解度对菜籽蛋白生物利用度的影响,最后为提高高生物利用度菜籽蛋白的酶解效率,进一步研究了S形五频超声、脉冲扫频超声以及发散叁频超声波设备对酶解效果的影响。本文的研究内容与主要结论以下:(1)以双低菜籽粕为原料,利用单仓高效平筛制备菜籽浓缩蛋白。通过对原料的粒径分布以及不同粒径原料的成分进行分析得到原料粒径分布的R-R分布函数;对原料蛋白质、植酸的含量进行了相关性分析,结果显示两者具有显着的相关性(r=0.9941)。利用单仓高效平筛制备菜籽浓缩蛋白,以筛下物得率和筛下物蛋白含量为指标研究进料流量和平筛旋转速度对筛分效果的影响,确定制备菜籽浓缩蛋白的最佳工艺为:进机流量为2 kg/min,平筛回转速度为260 r/min,在最优工艺条件下得到的菜籽浓缩蛋白的蛋白含量为56.99%(干基),得率为26.66%,经醇洗脱毒后得到的菜籽浓缩蛋白的蛋白含量可达60.16%(干基)。(2)为了提高双低菜籽粕蛋白的生物利用度,对其进行了蛋白酶解处理,研究了不同水解度菜籽粕蛋白在生物体内的利用情况。分无氮组、酪蛋白组、水解组(水解度分别为4%、8%、12%、16%、20%)叁大类七个组进行了动物的生长和氮代谢实验。动物实验结果表明,酶解反应显着提高了菜籽蛋白的生物利用度,水解度为8%组的大鼠体重增量、表观消化率、真消化率、净蛋白利用率和生物价均显着(p<0.05)高于其他水解组,故水解度为8%的酶解物的生物利用度最高。(3)为提高水解度为8%的高生物利用度菜籽粕蛋白的制备效率,分别采用S形五频超声、脉冲扫频超声和发散式叁频超声波设备对菜籽浓缩蛋白进行预处理,分别对超声模式、初始温度、超声时间和功率密度进行了优化。超声模式优化实验结果表明,S形超声波设备能显着(p<0.05)提高酶解效率和上清液蛋白转化率,并在一定程度上提高酶解液的ACE抑制率。超声最优参数为双频50/28kHz顺序工作,酶解时间为25 min,初始温度为40℃,功率密度为80 W/L。在此条件下进行酶解反应,酶解效率为36.20%,上清液蛋白转化率为62.76%,与未超声组相比提高了86.22%;酶解产物的ACE抑制率为67.90%,与未超声组相比提高了35.28%。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

菜籽分离蛋白论文参考文献

[1].姚轶俊,袁强,鞠兴荣,王立峰.菜籽蛋白水解物的分离纯化及抗肿瘤活性研究[J].中国粮油学报.2019

[2].熊建.菜籽饼粕蛋白平筛分离及其高生物利用度产品超声辅助酶法制备[D].江苏大学.2018

[3].王治平.菜籽分离蛋白糖接枝改性及其功能、结构和消化吸收特性研究[D].江苏大学.2016

[4].何海艳,杨爱萍,何荣.菜籽蛋白水解物及其分离组分抗氧化性研究[J].粮食与食品工业.2016

[5].何荣,王凤章,李倩,鞠兴荣.反相高效液相色谱法分离菜籽蛋白水解物及其组分清除自由基能力的研究[J].中国油脂.2014

[6].高瑀珑,郑锐,王玉梅,王立峰,鞠兴荣.菜籽分离蛋白分子质量分布及酶解条件的研究[J].中国粮油学报.2014

[7].鞠兴荣,郑毅,王立峰,后其军.菜籽蛋白水解物及其膜分离组分的体外抗肿瘤活性研究[J].粮食与食品工业.2014

[8].何荣,鞠兴荣.菜籽蛋白水解物及其膜分离组分的降血压相关活性[J].食品科学.2013

[9].钮琰星,祝俊,黄凤洪,黄庆德,黄茜.以脱皮冷榨双低菜籽粕为原料制备菜籽分离蛋白的研究[J].中国油脂.2011

[10].任欢.菜籽蛋白ACE抑制肽的制备及分离纯化研究[D].湖南农业大学.2011

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