黄曲霉毒素分解酶基因克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

黄曲霉毒素分解酶基因克隆及其在大肠杆菌中的融合表达

论文摘要

通过GenBank公布的黄曲霉毒素分解酶基因序列,合成ADTZ基因引物。从发霉的玉米样品中提取混合菌液,经菌液PCR扩增,筛选ADTZ基因片段,构建表达载体,将目的基因转化到大肠杆菌中,并进行诱导表达。通过SDS-PAGE检测表达产物大小和浓度。通过酶解试验检测表达产物对AFB1的降解能力。结果成功从发霉玉米混菌悬液中扩增到ADTZ基因,该基因序列全长2 088 bp,与已报道的ADTZ基因相似度达到99%。该基因可在大肠杆菌中进行融合表达,表达产物蛋白大小为118.5 kDa。重组大肠杆菌培养后获得的粗酶液可降解发霉玉米中的AFB1,降解率达到77.69%。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 质粒菌种
  •     1.1.2 主要试剂
  •     1.1.3 主要设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 混合菌种混悬液制备
  •     1.2.2目的基因的TA克隆与鉴定
  •     1.2.3 表达载体的构建与鉴定
  •     1.2.4 ADTZ基因的诱导表达及分析
  •     1.2.5 ADTZ粗酶液降解玉米AFB1试验
  • 2 结果与分析
  •   2.1 ADTZ序列的克隆与序列分析
  •   2.2 重组质粒pMAL-c5x-ADTZ的构建与鉴定
  •   2.3 ADTZ基因在大肠杆菌中的表达
  •   2.4 AFDZ表达产物对玉米AFB1的分解
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李旺,史敦胜,丁轲,曹平华,赵龙妹

    关键词: 黄曲霉毒素分解酶基因,大肠杆菌,融合表达,黄曲霉毒素

    来源: 食品与机械 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 河南科技大学动物科技学院

    基金: 国家自然科学基金(编号:31101744),河南省重大科技专项(编号:131100110300)

    分类号: Q78

    DOI: 10.13652/j.issn.1003-5788.2019.07.005

    页码: 26-30+50

    总页数: 6

    文件大小: 2063K

    下载量: 185

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