昆明裂腹鱼幼鱼生长发育及五种农药的急性毒性

昆明裂腹鱼幼鱼生长发育及五种农药的急性毒性

论文摘要

本研究以昆明裂腹鱼幼鱼为试验材料,综合发育生物学、酶学和分子生物学等研究方法,一方面,探究了昆明裂腹鱼幼鱼的生长规律、消化酶活性及PepT1mRNA的表达;另一方面,探讨了农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性作用,并在此基础上,研究了乐果造成的慢性毒性作用及Vc对其作用的影响,主要结果如下:1、为了认识昆明裂腹鱼幼鱼的生长特征。对昆明裂腹鱼仔、稚、幼鱼的体长及体重进行测定,作出总体发育趋势,并重点探究168~210日龄昆明裂腹鱼幼鱼的生长特征,采用5种生长模型模拟体长-体重的生长过程,比较分析得出最适的生长方程,并通过肥满度及生长指标探究其生长特性。结果表明,昆明裂腹鱼幼鱼体长-体重呈幂函数关系:W=0.013L3.234(R2=0.970),体长的生长速度方程为:vL=1.3092-0.1104 t+0.0024 t2,体重的生长速度方程为:vW=8.8033-0.6592 t+0.0126 t2。表明昆明裂腹鱼幼鱼呈异速生长,且体重的生长速度快较体长快。2、研究了昆明裂腹鱼幼鱼消化酶的活性特征。结果显示:(1)LPS在不同组织中的活性大小为:肝脏﹥肠道﹥肌肉,且182日龄前肠道和肝脏中活性较低,182日龄后活性显著升高,182日龄时肝脏中LPS活性为肠道的5.7倍,为肌肉的6.31倍;(2)AMS活性在不同组织中大小为:肠道﹥肝脏﹥肌肉,其在肠道和肌肉中均呈上升式梯形变化,而肝脏持续增长到210日龄后下降;(3)胃蛋白酶活性大小为:肠道﹥肌肉﹥肝脏,其在肠道和肝脏中呈现出下降式梯形变化,而肌肉中则呈波浪状上下起浮,且在210日龄活性达最大,但仍低于肠道,而高于肝脏。结果表明:(1)昆明裂腹鱼幼鱼LPS活性在生长过程中会发生阶段性变化;(2)昆明裂腹鱼幼鱼中AMS和胃蛋白酶为间歇性分泌。3、研究了昆明裂腹鱼幼鱼PepT1 mRNA的表达情况。结果显示:168日龄到175日龄PepT1 mRNA表达上升,175日龄到203日龄,表达逐渐降低,210日龄的PepT1 mRNA表达量相对203日龄显著上升(P<0.05)。结果表明:PepT1mRNA的表达受营养物质需求及蛋白质含量调控。4、研究了草甘膦铵盐、草甘膦、乐果、甲氰菊酯、阿维菌素对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性效应并进行安全评价,结果显示:草甘膦铵盐、草甘膦、乐果、甲氰菊酯、阿维菌素对昆明裂腹鱼幼鱼的LC50分别为5.755 mg/L、210.7 mg/L、39.598 mg/L、0.009 mg/L、0.0122 mg/L,SC分别为1.223 mg/L、62.66 mg/L、10.182mg/L、0.0018 mg/L、0.0031 mg/L。结果表明:五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的敏感性大小依次为:甲氰菊酯>阿维菌素>草甘膦铵盐>乐果>草甘膦。5、研究了乐果对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性效应及Vc对其作用造成的影响。结果显示:(1)大于SC的试验组,昆明裂腹鱼幼鱼的EROD、CAT、MDA及AchE活性均显著上升,SC及小于SC的试验组,EROD、CAT、MDA及AchE活性较小;(2)添加Vc后,不同组织中EROD活性上升,CAT、MDA及AchE活性不同程度下降。结果表明:(1)乐果浓度大于SC时,对机体造成的损伤在一定程度上无法修复,小于SC时对机体基本无影响;(2)Vc在一定程度上能清除生物体内的自由基,增强耐药性,在保护机体免受外源物质氧化损伤等方面发挥了积极作用。6、研究了乐果对昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的影响及Vc对其影响的作用。结果显示:不同浓度乐果诱导下HSP70 mRNA水平显著表达(P<0.05),随着胁迫时间的延长,从24 h到96 h除最高浓度组,其余各组变化均不显著(P﹥0.05),120 h在Vc添加后各组HSP70 mRNA表达水平均显著下降(P<0.05),较低两浓度组的表达水平接近对照组。结果表明:乐果能诱导昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的表达,Vc能显著降低其表达量,增强昆明裂腹鱼幼鱼对乐果的耐受性,协助机体完成自身调节功能。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 文献综述
  •   1 昆明裂腹鱼研究进展
  •     1.1 昆明裂腹鱼简介
  •     1.2 昆明裂腹鱼研究概况
  •   2 鱼类早期发育中消化酶研究进展
  •     2.1 鱼类胃蛋白酶研究进展
  •     2.2 鱼类脂肪酶研究进展
  •     2.3 鱼类淀粉酶研究进展
  •     2.4 鱼类PepT1研究进展
  •   3 农药对鱼类的毒性作用研究
  •     3.1 农药的生态效应
  •     3.2 农药污染检测中生物标记物的应用
  •     3.3 鱼类HSP70功能研究
  •     3.4 Vc对农药作用于生物的保护作用研究
  •   4 研究目的及意义
  • 第二章 昆明裂腹鱼幼鱼生长特性研究
  •   1 材料与方法
  •     1.1 试验材料
  •     1.2 试验方法
  •     1.3 数据处理
  •   2 结果
  •     2.1 昆明裂腹鱼早期生长
  •     2.2 昆明裂腹鱼幼鱼体长和体重组成
  •     2.3 昆明裂腹鱼幼鱼体长-体重生长方程拟合效果
  •     2.4 昆明裂腹鱼幼鱼肥满度变化
  •     2.5 昆明裂腹鱼幼鱼体长、体重生长指数
  •     2.6 昆明裂腹鱼幼鱼生长速度
  •   3 讨论
  •     3.1 昆明裂腹鱼幼鱼几种生长方程拟合效果比较
  •     3.2 昆明裂腹鱼幼鱼的生长特征
  • 第三章 昆明裂腹鱼幼鱼消化酶活性及PepT1 mRNA表达研究
  •   第一节 昆明裂腹鱼幼鱼消化酶活性变化研究
  •     1 材料与方法
  •       1.1 材料
  •       1.2 酶液制备
  •       1.3 酶活性测定
  •       1.4 数据分析
  •     2 结果
  •       2.1 昆明裂腹鱼幼鱼LPS活性变化
  •       2.2 昆明裂腹鱼幼鱼AMS活性变化
  •       2.3 昆明裂腹鱼幼鱼胃蛋白酶活性变化
  •     3 讨论
  •       3.1 昆明裂腹鱼幼鱼LPS、AMS和胃蛋白酶活性的变化特征
  •       3.2 昆明裂腹鱼幼鱼不同组织中LPS、AMS和胃蛋白酶的活性特征
  •   第二节 昆明裂腹鱼幼鱼PepT1 mRNA表达研究
  •     1 材料与方法
  •       1.1 材料
  •       1.2 主要仪器与试剂
  •       1.3 PepT1 mRNA的相对定量检测
  •       1.4 标准曲线的构建
  •       1.5 数据处理
  •     2 结果
  •       2.1 总RNA的纯度检验
  •       2.2 昆明裂腹鱼幼鱼β-actin及PepT1 mRNA的扩增
  •       2.3 RT-PCR产物特异性及扩增效率分析
  •       2.4 昆明裂腹鱼幼鱼PepT1 mRNA相对表达量
  •     3 讨论
  • 第四章 五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的急性毒性试验
  •   1 材料与方法
  •     1.1 试验材料
  •     1.2 试验方法
  •     1.3 数据统计
  •   2 试验结果
  •     2.1 五种药物对昆明裂腹鱼的毒性比较
  •     2.2 两种除草剂对昆明裂腹鱼幼鱼的影响
  •     2.3 三种杀虫剂对昆明裂腹鱼幼鱼的影响
  •     2.4 五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的半致死浓度和安全浓度
  •   3 讨论
  •     3.1 五种农药对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性评价
  •     3.2 昆明裂腹鱼幼鱼对除草剂的敏感性分析
  •     3.3 昆明裂腹鱼幼鱼对杀虫剂的敏感性分析
  • 第五章 Vc对昆明裂腹鱼幼鱼在乐果毒性下的解胁迫作用
  •   第一节 Vc对昆明裂腹鱼幼鱼在乐果胁迫下的解毒效应
  •     1 材料与方法
  •       1.1 材料
  •       1.2 酶液制备
  •       1.3 酶活性测定
  •       1.4 数据分析
  •     2 结果
  •       2.1 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼EROD的影响及Vc的解胁迫作用
  •       2.2 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼CAT的影响及Vc的解胁迫作用
  •       2.3 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼MDA的影响及Vc的解胁迫作用
  •       2.4 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼AchE的影响及Vc的解胁迫作用
  •     3 讨论
  •       3.1 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼不同组织EROD活性的影响及Vc对其作用
  •       3.2 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼不同组织CAT活性的影响及Vc对其作用
  •       3.3 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼不同组织MDA活性的影响及Vc对其作用
  •       3.4 乐果对昆明裂腹鱼幼鱼不同组织AchE活性的影响及Vc对其作用
  •       3.5 乐果96h LC50和SC对昆明裂腹鱼幼鱼的毒性差异
  •   第二节 乐果胁迫下昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的表达及Vc对其影响
  •     1 材料与方法
  •       1.1 材料
  •       1.2 主要仪器与试剂
  •       1.3 PepT1 mRNA的相对定量检测
  •       1.4 标准曲线的构建
  •       1.5 数据处理
  •     2 结果
  •       2.1 总RNA的纯度检验
  •       2.2 昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的扩增
  •       2.3 RT-PCR产物特异性及扩增效率分析
  •       2.4 农药胁迫下昆明裂腹鱼幼鱼HSP70 mRNA的表达及Vc的影响
  •     3 讨论
  • 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录
  • 图版
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 杨通枝

    导师: 姚俊杰

    关键词: 昆明裂腹鱼,幼鱼,生长发育,农药,急性毒性

    来源: 贵州大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,水产和渔业

    单位: 贵州大学

    分类号: S917.4

    总页数: 86

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