混合血小板裂解液对人骨髓间充质干细胞原代培养、增殖和成骨分化的影响

混合血小板裂解液对人骨髓间充质干细胞原代培养、增殖和成骨分化的影响

论文摘要

目的研究混合血小板裂解液(pHPL)对体外培养的人骨髓间充质干细胞(hBMMSCs)原代培养、增殖和成骨分化的影响。方法使用临床过期的多份浓缩血小板混合,多次冻融激活后制备pHPL,分别使用胎牛血清(FBS)和pHPL加基础培养液原代培养hBMMSCs,比较两组中的细胞形态、表面标志物、细胞骨架、细胞周期和增殖率,并在加入经典成骨诱导液后检测两组中碱性磷酸酶含量、成骨相关基因含量和矿化结节形成,比较其成骨分化能力。结果 FBS和pHPL培养组均能较好地支持hBMMSCs的原代培养,两组中细胞形态、表面标志物、细胞骨架、细胞周期均无明显差异,但pHPL组在5、7 d时的细胞增殖率明显高于FBS组(P<0.05);在成骨诱导后,pHPL组中碱性磷酸酶含量、成骨相关基因含量也明显高于FBS组(P<0.05),两组中细胞均可以形成成熟的矿化结节。结论 pHPL能够很好支持hBMMSCs的原代培养、增殖和成骨分化,且较FBS能更好地促进其增殖和成骨分化。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 pHPL的制备
  •   1.2 h BMMSCs的分离和培养
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 倒置显微镜观察细胞形态
  •     1.3.2 hBMMSCs表面标志物的检测
  •     1.3.3 细胞骨架免疫荧光染色
  •     1.3.4 细胞周期分析
  •     1.3.5 细胞增殖率测定
  •     1.3.6 hBMMSCs向成骨方向诱导
  •       1.3.6. 1 碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase, ALP) 检测
  •       1.3.6. 2 成骨相关基因检测
  •       1.3.6. 3 矿化结节茜素红染色
  •   1.4 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 两组倒置显微镜观察细胞形态的比较
  •   2.2 两组hBMMSCs表面标志物检测情况的比较
  •   2.3 两组细胞骨架免疫荧光染色情况的比较
  •   2.4 两组细胞周期的比较
  •   2.5 两组细胞增殖率的比较
  •   2.6 两组ALP水平的比较
  •   2.7 两组成骨相关基因检测情况的比较
  •   2.8 两组的矿化结节茜素红染色情况
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 徐杨,林飞跃,尹晓明

    关键词: 人血小板裂解液,骨髓间充质干细胞,原代培养,增殖,成骨分化

    来源: 中国当代医药 2019年18期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 福建医科大学省立临床学院福建省立医院骨一科

    基金: 福建省自然科学基金资助项目(2016J01505)

    分类号: R329.2

    页码: 13-18

    总页数: 6

    文件大小: 3909K

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