导读:本文包含了细胞调论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,凋亡,激动剂,因子,内皮,多肽,内膜。
细胞调论文文献综述
冯科,谢楠,陈彬,李旭兵,佟振合[1]（2017）在《模块化设计的聚降冰片烯用于细胞调亡》一文中研究指出开环易位聚合是一种制备无规、嵌段、交替高分子共聚物的有力工具。以聚降冰片烯为高分子骨架,采用Grubbs催化剂,可以通过"一锅法"随机共聚制备含有荧光生色团、亲水基团、氢键、寡肽、离子、金属配合物等各种功能基团的降冰片烯高分子。在这里,我们将介绍把功能化聚降冰片烯高分子用于肿瘤细胞调亡的一点进展。我们的核心目标是要发展一系列能够应用于肿瘤诊疗的新型生物功能高分子材料。(本文来源于《第十五届全国光化学学术讨论会会议论文集》期刊2017-08-21）
王倩[2]（2016）在《秋水仙素与顺铂诱导Hela细胞调亡的定量多肽组学研究》一文中研究指出多肽组学是一种可以定性和定量分析生物样品中的多肽的技术。这项技术可应用于发现疾病的生物标记分子、检测活性多肽、研究蛋白水解调控活性肽过程等方面。本实验应用多肽组学的方法研究在秋水仙素和顺铂诱导Hela细胞产生凋亡后,细胞内多肽水平的变化。细胞凋亡是生物体中一项非常重要的生理过程,在维持生物机体内环境稳态、免疫功能、生长发育等生命活动中具有重要的作用,因而研究凋亡过程具有重要意义。秋水仙素是一种用于治疗痛风和癌症的生物碱。它可以通过抑制微管蛋白聚合引起细胞凋亡。顺铂是一种重金属络合物,可结合于DNA上抑制DNA的复制过程,诱导细胞凋亡。尽管有很多方法解释秋水仙素与顺铂引起细胞凋亡的机制,但这些药物引起细胞内多肽的变化还未见报导。另外,因为对细胞内多肽可能对很多生理过程包括凋亡过程可能会发挥作用缺乏认识,所以目前利用细胞内的多肽信息用于对细胞凋亡机制的研究是相当有限的。本研究用定量多肽组学方法检测了用200μM秋水仙素与50μM顺铂处理Hela细胞24小时后多肽的变化。结果如下:1.用CCK-8检测法检测秋水仙素与顺铂对细胞存活率的影响,随药物浓度增加,细胞活力下降。2.用200μM秋水仙素处理Hela细胞24小时后,一共鉴定出203种多肽,这些多肽来自101种不同的前体蛋白。其中有84种多肽发生显着变化。在这些明显变化的多肽中,有3条多肽是来自相应的蛋白前体的N端,有24条多肽来自相应的蛋白前体的C端。其他的57条多肽则来自蛋白前体的中间部分。3.用50μM顺铂处理Hela细胞24小时后,共提取出61条多肽,这些多肽来自26种不同的前体蛋白。提取出的多肽中有34条多肽发生显着变化。这些显着变化的多肽中,只有1条多肽是来自相应的蛋白前体的N端,有14条多肽来自相应的蛋白前体的C端。其他的19条多肽则来自蛋白前体的中间部分。4.在两种药物处理细胞后提取出的相同多肽中,有些多肽在两种药物处理后均产生下调,有些多肽则只在一种药物处理后产生显着变化,没有发现共同上调的多肽,这可能与两种药物不同的作用机理有关。本实验中我们用一种有效的分析方法对细胞发生凋亡的过程中的多肽进行了全面的分析。这是一种对凋亡过程研究的新方法。结果发现秋水仙素与顺铂改变了细胞内多肽的平衡,表明多肽可能在这些药物的生物学作用中发挥作用。(本文来源于《安徽农业大学》期刊2016-06-01）
邹岩[3]（2016）在《壳聚糖被覆磁性Fe_3O_4纳米粒子搭载多柔比星介导MCF-7乳腺癌细胞调亡的研究》一文中研究指出乳腺癌目前是全世界第二大恶性肿瘤,大约每年有140万新发患者。在全部癌症患者中,乳腺癌约占23%,其中女性癌症相关死亡患者中占15%,成为最为致命的疾病之一。传统的肿瘤治疗模式例如手术、化疗、放疗以及靶向治疗都是乳腺癌治疗的有效手段,尤其术后辅助化疗对提高患者生存率意义重大。但由于多药耐药性,选择性缺乏以及快速的药物清除率以及药物对正常细胞的杀伤,降低了化疗药物对肿瘤细胞的治疗作用。多柔比星(阿霉素DOX),是一种重要的蒽环类衍生物,具有广泛的抗肿瘤谱,在临床上应用于包括乳腺癌在内的多种肿瘤的治疗。表柔比星能够插入肿瘤细胞DNA,干扰复制和转录进程,进而导致肿瘤凋亡,在各个生长周期均能起到杀灭作用,属于非周期特异性抗肿瘤药物。但其抗肿瘤作用受到机体快速清除作用影响,选择特异性差,同时具有较严重的毒副作用(如心脏毒性),在临床应用时受到诸多限制。选择性的靶向化疗药物通过载体递送系统(CDDS)向肿瘤组织特异性释放化疗药物,在肿瘤治疗中具有巨大的应用前景。磁性纳米粒子(MNP)可以在磁性环境下选择性定位肿瘤组织,近年来越来越受到关注。通常聚合物覆盖于纳米粒子后能够表现出包括低毒性,生物相容性,生物降解及细胞粘附等多种特性。并且,聚合物能够防止药物的突释现象,达到药物持续稳定作用。本实验着眼于制备搭载多柔比星的磁性纳米粒子(DOX-CMMN),研究其特性及对MCF-7乳腺癌细胞的抗癌活性。纳米粒子的壳聚糖护层能够保护药物的释放过程,提高磁性系统的生物相容性。我们通过化学及热力学方法基于Fe3O4构建介孔磁性纳米粒子,将多柔比星搭载于纳米粒子的介孔中,然后后表面覆盖壳聚糖形成复合物。DOX-CMMN在交流磁场环境下能够选择性到达肿瘤位置,通过热效应促使药物释放,并且经由热疗效应加速肿瘤细胞凋亡。实验结果如下：1、搭载多柔比星的磁性纳米粒子(DOX-CMMN)的建立材料及方法FeCl3·6H20和FeCl2·4H20以2：1的比例混合后,按1g：25ml加入乙二醇。混合物于80℃加入2g乙酸钠和5ml乙二胺,温度升至180℃左右持续反应,然后冷却。后在磁场作用下将磁性纳米粒子分离出来后用乙醇和水冲洗。100mg MMN微粒溶液内加入5ml多柔比星溶液(15%),室温下冷却1小时,经超声处理20分钟将药物分散开。100 mg的DOX-MMN溶于司盘80乳化剂的水溶液中,加入30ml 1%壳聚糖溶液,在磁场环境下持续搅拌3h。然后于超声水浴下混合60分钟。在磁场作用下将CMMN分离。CMMN的药物包封率(DE%)通过分光仪测定：DOX-CMMN在15000rpm下离心15分钟,收集上清液使用紫外可见光谱仪480nm波长测定含药量。通过公式计算CMMN多柔比星载药量及搭载率。样本在25℃,每份标本分叁份,使用粒度仪采用动态光散射技术测量微粒平均直径和粒径分布。采用扫描电子显微镜(SEM)观察微粒形态及表面结构。采用磁力计测定MMN及CMMN的磁性。使用分光光度法测量盐酸多柔比星(DOX)溶液在200～500nm范围的紫外-可见吸收光谱,可以看到在480nm左右为吸收峰,确定480nm作为多柔比星的测定波长。配制标准浓度分别为0.2mg/ml,0.4 mg/ml,0.6 mg/ml,0.8 mg/ml, lmg/ml的DOX溶液,测量在480nm波长的吸收值,绘制多柔比星标准吸收曲线。研究在磷酸盐缓冲盐水(PBS, pH7.4)和醋酸盐缓冲盐水(ABS, pH5.5)中磁性纳米粒子搭载的多柔比星的释放:DOX-CMMN稀释于1ML的PBS溶液后放入透析袋,将透析袋放入盛有25ml PBS溶液的试管内,37℃震动水浴箱中,于1h,2h,4h,8h,12h,16h,24h,36h,48h间隔时间,取出1ml透析液,使用光谱仪测定480nm波长吸光度,计算DOX含量,测试完成后将取出液倒回透析液中。使用分光光度法测量释放出的药物量,取均数±标准差,描绘时间药量图。结果：应用热溶剂法制备磁性纳米粒子,将多柔比星与介孔磁性纳米粒子在室温下共同孵育,使药物搭载于纳米离子介孔中。最后将壳聚糖被覆于CMMN表面。由于其具有的多孔性和水相可分散性,CMMN呈现出很高的多柔比星搭载性能,实验显示包封率90.4%,载药量约19%。高效率的活性药物搭载率可能与多柔比星的亲水性以及所含的NH：,+基团有关。药物表面的正电荷被MMN表面负电荷所吸引,MMN表面的多孔性促进了药物的搭载。粒度仪结果显示DOX-CMMN颗粒直径平均在120nm,纳米粒子的多分散系数在0.2左右,构建机制较为理想。D0X-CMMN微粒的扫描电镜图像显示微粒体表面光滑,呈规则的球形,部分区域可见团块聚集,考虑为粒子表面强效的磁偶极子间相互作用形成聚集,电镜下测量的粒子直径,大小约120nm,与之前在水溶状态下使用光散射法测定的数据一致。CMMN粒子和MMN粒子均表现出超顺磁性的特征,CMMN粒子的磁饱和性较后者稍低,证磁性的轻度减弱源于表面覆盖的壳聚糖,这些聚合物可能会减少MMN表面的磁死层。不同浓度的多柔比星溶液在480nm波长的吸收值为3.7069,7.1951,10.6403,14.5028,17.1009(1/trans),浓度与吸光度呈良好线性相关,回归方程式Y=17.0618X+0.4611,相关系数R2=0.9981。体外DOX-CMMN微粒释放实验中,在两种酸碱度不同的溶液中,时间间隔1h,2h,4h,8h,12h,16h,24h,36h,48h时的药物累积释放度,取均数±标准差,单因素方差分析,P<0.001,两组数据存在显着差异。pH7.7的PBS的溶液中释放率分别为2.38±0.21：3.67±0.37：6.24±1.37：10.09±1.74：16.35±2.02：24.95±3.02：38.16±3.94：51.74±3.49：58.16±4.86。pH5.5的ABS溶液中释放率分别为4.04±0.34；5.41±0.42；10.82±1.28；16.33±2.01；27.70±3.39；38.53±4.95；55.17±4.90；80.73±3.31；94.67±3.39。CMMN粒子在两种酸碱环境下均可以稳定释放,在酸性环境下(pH5.5)释放量更高。经过24h,pH7.4的溶液环境下,多柔比星的释放量达到38.16%,而pH5.5的环境下,多柔比星的释放量为55.17%。经过48h,pH7.4的溶液环境下,多柔比星的释放量达到58.16%,而酸性环境下多柔比星释放达到94.67%。2、DOX-CMMN微粒介导乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究材料及方法从液氮中取MCF-7乳腺癌细胞,复苏后,加入RPMI1640培养基,于37℃,5%C02恒温湿度培养箱中培养。选用对数生长细胞以密度1×104/100 μl种植于96孔微孔板中。使用培养基加入空白CMMN粒子,配制浓度为0.001,0.01,0.1,0.5,1,5,10,50,100,200μg/ml的溶液。作用于MCF-7细胞24h,使用MTT比色法测定细胞活性率研究空白CMMN微粒的生物相容性。MCF-7细胞分别与DOX和D0X-CMMN微粒共同培养来研究其细胞毒性作用。实验分为叁组,DOX组(n=42),DOX-CMMN组(n=42),和对照细胞组。浓度为0.001,0.01,0.1,0.5,1,5,10μg/ml的DOX-CMMN及DOX与MCF-7细胞共同孵育24h后,用PBS溶液清洗微孔板2遍,然后使用100μg MTT处理后继续孵育3h。抽去孔内培养液,加入150微克二甲基亚砜,使用酶标仪检测各孔的570nm的吸光度。所有的实验均重复6次。对应的培养液与细胞孵育后,PBS清洗,4%多聚甲醛固定后于电镜下观察。检测交流磁场环境对于药物作用的MCF-7细胞是否有增效作用。1×104MCF-7细胞与DOX、DOX-CMMN共同孵化6小时。将培养板分为两组,其中1组以保鲜膜覆盖保持无菌,于交流磁场下暴露5分钟、10分钟。然后继续放入恒温孵育箱培养。同样使用MTT方法,酶标仪检测各孔的570nm吸光度。所有的实验重复6次。结果体外环境下,不同浓度空白CMMN微粒作用后细胞活性率分别为99.81±7.14；99.70±4.33；99.83±3.62；99.23±3.31；99.03±4.30；99.83±6.51；96.53±7.20；94.39±3.47；87.22±5.59；85.01±4.80最大浓度200 μg/m1空白对照纳米粒子无明显的细胞毒性。所有的浓度细胞存活率均在85%以上,提示组织相容性非常好。微粒表面的壳聚糖是保证递送系统中微粒无细胞毒性作用的重要原因。DOX及DOX-CMMN微粒的细胞毒性测定实验,两组均呈现出剂量相关性细胞毒性作用。DOX-CMMN的细胞杀伤力更强。这种毒性作用的增强考虑与肿瘤细胞对纳米粒子药物的高摄取率有关。多柔比星组的IC50(半抑制浓度)大约为2.76μg/ml,而磁性纳米粒子的IC50大约为1.25μg/ml。通过MCF-7细胞的形态学成像,结果与细胞毒性检测结果相符合,对照组细胞表现为正常未处理细胞的形态。而DOX-CMMN作用的细胞显示出完全异型性及球形变。在交流磁场作用下,化疗药物与热力效应作用于MCF-7细胞的存在协同效应。DOX-CMMN作用于MCF-7细胞,对照组多柔比星组。同时置于交流磁场下的热力作用。D0X组细胞死亡率约30%,在交流磁场环境下细胞杀伤率有轻微增长。而DOX-CMMN组作用下细胞死亡率约40%,在交流磁场下5分钟,细胞死亡率65%,10分钟进一步增长到90%。结论成功制备搭载多柔比星的壳聚糖被覆磁性纳米粒子(DOX-CMMN)制备并检测其特性,DOX-CMMN的药物释放表现出可控性和持续性的特点,无爆发式释放的现象。DOX-CMMN具有剂量相关性抗肿瘤细胞增殖作用,在交流磁场作用下这种作用会增强。空白搭载纳米粒子在最大85%的浓度下,仍具有良好的生物相容性。我们的实验显示,壳聚糖被覆磁性纳米微粒递送系统在乳腺癌的靶向治疗中具有广阔的应用前景,在震荡磁场作用下能够靶向定位肿瘤组织,同时协同药物化疗及热力用,显着提高了抗癌活性。但目前尚缺少体内实验的数据,需进一步的研究该药物递送系统的治疗潜力。(本文来源于《山东大学》期刊2016-05-10）
李健琳,韩江全,陈玲[4]（2016）在《川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血大鼠神经细胞调亡及Caspase-3影响》一文中研究指出目的探讨川芎嗪联合葛根素对于脑缺大鼠神经细胞调亡以及Caspase-3表达的影响。方法将96只SD大鼠模型随机分为假手术组(12只)与造模组(84只),造模组随机分为模型组、川芎嗪组、葛根素组、川芎嗪+葛根素组低剂量组、川芎嗪+葛根素组中剂量组、川芎嗪+葛根素组高剂量组和依达拉奉组7组,各12只。检测8组大鼠的神经功能行为学评分、脑组织病理学变化、细胞凋亡情况及Caspase-3水平变化。结果假手术组的神经功能缺失评分、凋亡细胞计数及Caspase-3表达水平均显着低于其余各组(P<0.05),且各治疗组均显着低于模型组(P<0.05);不同剂量川芎嗪+葛根素组的神经功能缺失评分、凋亡细胞计数及Caspase-3表达水平均降低(P<0.05);川芎嗪+葛根素高剂量组显着低于依达拉奉组(P<0.05)。结论川芎嗪联合葛根素能够有效下调Caspase-3表达水平,减轻脑组织神经功能损伤,促进脑缺血大鼠的临床转归。(本文来源于《齐齐哈尔医学院学报》期刊2016年04期）
王菲,刘丽学,孟文斌,刘晶,于聪祥[5]（2016）在《诱导子宫内膜异位症患者子宫内膜上皮细胞调亡研究》一文中研究指出目的:研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHα)对子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜蛋白表达的影响,为EMs的治疗提供依据。方法:94例EMs患者随机分为两组,每组47例,均实施腹腔镜手术治疗,对照组未给予药物治疗,观察组给予曲普瑞林皮下注射,28日/次,注射3次,术中及治疗叁个月后观察组分别用取内膜器取少量子宫内膜组织标本,采用免疫组化法法、TUNEL染色法和Western blot检测组织内Bcl-2、Caspase3、GRP78等表达情况,并观察治疗效果。结果:治疗后观察组疼痛视觉模拟评分(VAS)为(2.13±0.69)分,低于对照组的(2.62±0.71)分(P<0.05);观察组1年内妊娠率及总妊娠率分别为38.30%、51.06%,均高于对照组的19.15%、29.79%(P<0.05);治疗后观察组Bcl-2、Caspase3表达量分别为(1.54±0.28)、(3.20±0.65),均高于对照组的(1.38±0.15)、(1.24±0.27)(P<0.05);治疗后观察组GRP78表达量为(0.46±0.17),低于对照组的(0.61±0.24)(P<0.05)。结论:GnRHα可缓解EMs患者下腹痛、痛经、性交痛等症状,提高妊娠率,其机制可能与GnRHα调控上皮细胞Bcl-2、Caspase3、GRP78等的表达有关。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2016年03期）
张锷[6]（2015）在《人脐带间充质干细胞对放射性损伤大鼠肠道自由基及肠细胞调亡的影响》一文中研究指出目的:了解人脐带MSCs对放射性损伤大鼠小肠组织自由基和细胞凋亡的影响,并探讨其治疗机制与自由基和细胞凋亡的关系。方法:将健康雌性SD大鼠36只,随机分为3组,正常组、照射组、治疗组,每组12只。正常组:不照射,实验第2天予以生理盐水1ml尾静脉注射1次;照射组:实验第1天用60Coγ射线行全腹照射,总剂量为9Gy,实验第2天予以生理盐水1ml尾静脉注射1次;治疗组:实验第1天用60Coγ射线行全腹照射,总剂量9Gy,实验第2天予以人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)注射液1ml(1×106个/ml)尾静脉注射1次。于实验第7天处死大鼠抽血并取小肠,在光镜下观察小肠黏膜病理形态变化,测定血浆DAO含量,以了解小肠受损程度;测定组织MDA、NO含量及SOD活力等指标,以了解自由基的变化;采用原位末端标记法(TUNEL)检测肠黏膜细胞凋亡的情况。结果:1.血浆DAO含量:照射组和治疗组大鼠血浆DAO含量较正常组均明显升高(P<0.05),而照射组DAO含量高于治疗组(P<0.05)。2.小肠组织MDA含量:照射组和治疗组大鼠小肠组织MDA含量较正常组均明显升高(P<0.05),而照射组MDA含量高于治疗组(P<0.05)。3.小肠组织SOD活力:照射组和治疗组大鼠小肠组织SOD活性较正常组均明显降低(P<0.05),而照射组SOD活性低于治疗组(P<0.05)。II4.小肠组织NO含量:照射组和治疗组大鼠小肠组织NO含量较正常组均明显升高(P<0.05),而照射组NO含量高于治疗组(P<0.05)。5.小肠组织HE染色:照射组、治疗组大鼠小肠黏膜形态和结构较正常组均明显发生改变,小肠黏膜厚度不均匀,绒毛结构不完整,黏膜下水肿,空泡样改变,肠隐窝失去正常结构,黏膜下层可见明显血管扩张、淤血及炎症细胞浸润;与照射组相比,治疗组大鼠小肠黏膜病理受损有所改善。6.小肠黏膜的细胞凋亡率:照射组和治疗组大鼠小肠黏膜细胞凋亡率较正常组均明显升高(P<0.05),而照射组细胞凋亡率高于治疗组(P<0.05)。结论:人脐带间充质干细胞移植可以减轻大鼠肠道放射性损伤,其机制可能与提升自由基清除力和抑制细胞凋亡有关。(本文来源于《南华大学》期刊2015-05-01）
游洁冰[7]（2015）在《PPARγ激动剂、胰岛素通过上调负性炎性因子TIPE2的表达抑制高糖、Aβ1-40引起的炎性反应及神经细胞调亡》一文中研究指出目的：肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子-2 (tumor necrosis factor-α induced protein 8 like-2,TIPE2)作为近年新发现的负性炎性因子,是维持体内免疫稳态所必需的蛋白之一。同时,TIPE2能通过与caspase-8结合,促进Fas介导的细胞凋亡和T细胞活化诱导的细胞凋亡。高糖环境下,不仅起引起的胰岛素抵抗刺激细胞炎症反应,还可以通过LRP-1介导的Aβ1-40转运机制障碍,影响Aβ1-40的清除。Aβ沉积时,Aβ原纤维可以激活小胶质细胞引起炎症反应和神经毒性因子的释放。但高糖、Aβ对大鼠神经细胞TIPE2的表达及细胞凋亡的影响尚未系统研究。过氧化物酶增殖体激活受体(PPARy)激动剂和胰岛素是临床常用的糖尿病治疗药物,可以通过降低血糖改善高糖引起的炎症反应,本身也可以调节炎症反应,但其对TIPE2和细胞凋亡的影响尚未见诸报道。但本课题拟通过体内、体外实验,观察PPARγ激动剂、胰岛素干预前后高糖环境、Aβ1-40对大鼠神经细胞TIPE2表达和细胞凋亡的影响,探讨TIPE2在糖尿病中枢神经系统损伤中的作用。方法：(1)选取3月龄Wistar大鼠作为空白对照组(3 Wistar组),自发性2型糖尿病大鼠分为3月龄组(3GK组)、6月龄组(6GK组)、罗格列酮干预6月龄组(RSG+6GK组)、胰岛素干预6月龄组(INS+6GK组)。(2) 运用免疫组织化学染色法检测脑组织中TIPE2的表达及空间分布,RT-PCR、 Western Blot法分别测定TIPE2的mRNA、蛋白表达水平,TUNEL染色法检测细胞凋亡。(3)选取24h内新生Wistar大鼠提取大鼠海马原代培养细胞,分为五组,分别采用高糖、罗格列酮、比格列酮、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40干预,每组叁个浓度,而后每种物质取中间浓度两两联合干预。(4)运用RT-qPCR、Western Blot法分别测定大鼠海马原代培养细胞中TIPE2的mRNA、蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡情况。(5)采用GraphPad Prism 5软件进行统计分析,所有数据以万±s表示,多组数据比较采用单因素方差分析,组间差异比较采用两样本f检验,相关性采取Person相关性分析,a=0.05为检验水准。P<0.05为差异有统计学意义。结果：(1) TIPE2在脑组织中,分布于活化神经胶质细胞、神经元的胞浆和微血管管壁。比较TIPE2在各组大鼠脑内的表达,3GK组在染色强度、阳染细胞数、阳染血管数、mRNA、蛋白水平均较3 Wistar组有明显增加(P<0.05),6GK组均较3GK组有明显增加(P<0.05), RSG+6GK组、INS+6GK组均较6GK组有明显减少(P<0.05)。(2)3GK组与3 Wistar组相比细胞凋亡数明显增加(P<0.05),6GK组与3GK组相比凋亡细胞数明显增加(P<0.05)。与6GK组相比,RSG+6GK组和INS+6GK组凋亡细胞数明显减少(P<0.05)。(3)通过Person相关性分析,在不同大鼠的脑内,TIPE2与细胞凋亡数呈正相关性(r=0.9816,P<0.05)。(4)高糖、罗格列酮、比格列酮、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40单独干预大鼠海马原代培养细胞,TIPE2的表达均明显增加(P<0.05),随着浓度的增加,TIPE2的表达增加无统计学差异(P>0.05)。(5)高糖、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40两两联合干预时,TIPE2的表达均明显增加较单独干预增加(P<0.05),而罗格列酮、比格列酮可抑制高糖、纤丝状AB1-40、寡聚体Aβ1-40引起的TIPE2表达增加(P<0.05)。(6)高糖、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40单独干预大鼠海马原代培养细胞,细胞凋亡和死亡数明显增加(P<0.05),随着浓度的增加,凋亡和死亡数也增加。罗格列酮、比格列酮单独干预大鼠海马原代培养细胞,细胞凋亡和死亡数变化无明显统计学差异(P>0.05)。(7)高糖、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40两两联合干预时,凋亡和死亡数明显增加较单独干预增加(P<0.05),而罗格列酮、比格列酮可抑制高糖、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40引起的细胞凋亡和死亡(P<0.05)。结论：(1)Ⅱ型糖尿病可促进大鼠脑组织内TIPE2的表达和细胞凋亡,随年龄的增长和糖尿病病程的进展,TIPE2的表达和细胞凋亡数目相应增加,提示TIPE2可能参与调节糖尿病中枢神经系统损伤。(2)胰岛素、PPARγ激动剂干预可减少糖尿病大鼠脑内TIPE2的表达并抑制细胞凋亡,提示胰岛素、PPARγ激动剂作为临床常用糖尿病治疗药物,不仅能够降低血糖,还可以降低高血糖引起的炎症反应、减少细胞凋亡,减轻糖尿病中枢神经系统损伤。(3)Ⅱ型糖尿病大鼠脑组织中TIPE2表达与细胞凋亡呈正相关,提示TIPE2可能通过促进细胞凋亡,参与糖尿病中枢神经系统损伤。(4)高糖、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40单独干预大鼠海马原代培养细胞,均可引起TIPE2表达升高和细胞凋亡,且两两联合干预时TIPE2表达和细胞凋亡进一步提高,提示Ⅱ型糖尿病不仅通过高糖也通过Aβ1-40途径引起炎性反应及糖尿病中枢神经系统损伤。(5) PPARγ激动剂(罗格列酮、吡格列酮)单独干预大鼠海马原代培养细胞,TIPE2的表达明显增加,而细胞凋亡数目无变化,提示正常情况下PPARγ激动剂可以通过提高负性炎症因子的表达起抗炎作用且对细胞凋亡无影响。而在与高糖、纤丝状Aβ1-40、寡聚体Aβ1-40联合干预时,可以降低其引起的TIPE2表达升高和细胞凋亡,提示PPARγ激动剂可以分别抑制高糖、Aβ1-40引起炎性反应及糖尿病中枢神经系统损伤。(本文来源于《山东大学》期刊2015-03-25）
康波[8]（2015）在《硫化氢通过miR-1-Bcl-2通路抑制缺血再灌注心肌细胞调亡的实验研究》一文中研究指出缺血再灌注(ischemia reperfusion, IR)损伤所导致的心肌细胞凋亡,是影响缺血心肌组织恢复血液供应后心脏功能恢复的重要因素之一。如何减少包括凋亡在内的细胞死亡,保护心脏功能,目前仍然是心血管领域临床相关科室主要研究的热点之一。晚近研究发现,新型气体信号分子硫化氢(hydrogen sulfide, H2S)对IR损伤心肌具有重要内源性保护作用,它可以抑制细胞凋亡,发挥心肌保护作用,但具体机制不清。H2S可以通过调节相关微小RNA (microRNA, miRNA, miR)的表达影响肿瘤细胞的生长和凋亡,还可以通过影响miR-133a的表达,抑制心肌细胞肥大。研究证实,miRNA参与调控了包括心肌细胞凋亡在内的多种生理和病理过程。我们推测,某些心肌特异性高表达的niRNA是否参与了H2S对心肌IR损伤的保护,特别是在转录后水平调控某些重要凋亡相关靶基因的表达,从而抑制心肌细胞过度凋亡,保护心脏功能。第一部分H2S调节IR心肌细胞凋亡的在体实验研究一、研究目的评价H2S预处理对在体IR心肌的作用,并筛选H2S组与IR组之间表达差异显着的miRNA.二、研究方法建立SD大鼠心肌IR损伤在体模型,并通过腹腔注射给予不同浓度(10、30、50、100 μM/kg) NaHS(H2S的供体)预处理。采用伊文氏蓝和TTC双染色法检测大鼠心肌梗死面积,全自动化学法检测大鼠血清中LDH漏出量,TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR, Western blot法检测抑凋亡关键基因Bcl-2的表达。采用miRNA芯片技术,筛选出在IR组和NaHS处理组之间差异显着的miRNA,并用RT-PCR法进行验证。叁、结果1、IR组心肌梗死面积明显高于假手术组(Sham组),而给予NaHS预处理,可减小心肌梗死面积,且与浓度密切相关,NaHS为30μM/kg时减小最为明显。2、IR组的LDH漏出量较Sham组明显上升,而给予NaHS预处理可以减少LDH漏出量,与浓度相关,30 μM/kg时改善最为明显。3、与Sham组相比,IR组心肌细胞凋亡率明显增高,给予不同浓度NaHS预处理后,细胞凋亡率减少,且与浓度相关,尤其以30μM/kg时减少最为明显。4、与Sham组相比,IR组Bcl-2的mRNA、蛋白表达均显着降低。NaHS处理各组Bcl-2的表达较IR组上调,且与浓度相关,尤其在30 μM/kg时其上调作用最为显着。5、miRNA基因芯片筛选结果表明,NaHS组的miR-1表达较IR组显着下调。四、结论1、H2S预处理对IR心肌具有明确的心肌保护作用,能抑制心肌细胞过度凋亡,并且这种作用与浓度密切相关,在30 μM/kg时保护作用最为显着。2、H2S组与IR组表达差异显着的miRNA包括miR-1,提示miR-1可能参与了H2S的心肌保护作用。第二部分MiR-1参与H2S影响心肌细胞凋亡的研究一、研究目的评价H2S预处理对离体缺氧复氧(HR)心肌细胞的作用,并探讨miR-1是否参与H2S的影响心肌细胞凋亡的作用。二、研究方法建立原代心肌细胞HR损伤模型,并给予不同浓度(10、30、50、100 μM) NaHS预处理。采用MMT法检测离体心肌细胞的活力,全自动生化分析仪检测细胞培养上清液LDH漏出量,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot法检测Bcl-2、miR-1的表达。将心肌细胞转染miR-1模拟剂(mimic)上调miR-1的含量,再给予NaHS预处理、HR损伤,通过检测心肌细胞凋亡率,明确miR-1是否参与H2S的抑凋亡作用。叁、结果1、HR组细胞活力较对照组(Con组)明显下降,而NaHS预处理各组细胞的活力较HR组明显增高,且与浓度相关,其中30μM组增加最为显着。2、HR组细胞LDH漏出量较Con组明显下降,而NaHS预处理各组细胞的LDH漏出量较HR组明显增高,且与浓度相关,其中30μM组改善最为显着。3、HR组的细胞凋亡率明显高于Con组,而NaHS预处理的细胞较HR组凋亡率有所下降,与浓度相关,其中30μM组下降最为明显。4、与Con组相比,HR组Bcl-2的mRNA、蛋白表达均显着降低；而NaHS预处理各组的Bcl-2的表达量上调,且与浓度相关,在浓度为30μM时Bcl-2的上调最为明显。5、同Con组相比,HR组miR-1表达量显着升高；而NaHS预处理各组miR-1的表达量较HR组有所下降,与浓度相关,在30μM时,miR-1的下调最为显着。6、心肌细胞凋亡率检测结果表明：阴性对照(NC)组与NC+H2S组无显着差异。与NC组相比,mimic组细胞凋亡率显着增加；与HR+NC组相比,HR+mimic组细胞凋亡率增加显着。提示上调miR-1的含量可增加心肌细胞凋亡。与HR+NC+H2S组相比,转染mimic片段的]mimic组的细胞凋亡率明显增加。表明同为接受HR处理,由于转染mimic上调miR-1的含量,即使给予H2S预处理,也不能显着减少心肌细胞凋亡率。四、结论1、在离体细胞水平,H2S具有明确心肌细胞保护作用,30μM浓度保护作用最为显着。2、MiR-1参与了H2S抑制心肌细胞凋亡的过程,上调其表达可以削弱H2S的部分保护作用。第叁部分H2S调控miR-1-Bcl-2影响心肌细胞凋亡的实验研究一、研究目的明确miR-1参与H2S心肌保护作用的可能机制。二、研究方法通过Γargetscan、miR-base等生物信息学网站计算、查询和预测,miR-1的潜在靶基因包括抑凋亡关键基因Bcl-2。将离体培养的心肌细胞分别转染不同浓度的miR-1模拟剂(mimic)和拮抗剂(AMO-1),通过检测Bcl-2的蛋白表达水平,研究miR-1是否调控Bcl-2的表达。将心肌细胞转染Bcl-2干扰片段(siRNA),以下调Bcl-2的含量,再给予NaHS预处理、HR损伤,通过检测细胞凋亡率,明确Bcl-2是否参与了H2S抑制心肌细胞凋亡作用。叁、结果1、与NC组相比,mimic组Bcl-2的表达下降较明显,且与浓度密切相关,随着mimic浓度的增加而Bcl-2蛋白表达逐渐减少。与之相反,AMO-1组miR-1的含量较NC组明显降低；而Bcl-2的蛋白表达较NC组明显上升,且呈浓度梯度变化,随着AMO-1浓度的增加而增加。提示miR-1可以直接调控Bcl-2蛋白的表达。2、检测心肌细胞凋亡率,NC组与NC+H2S组比较无显着差异。与NC组相比,siRNA组细胞凋亡率有所增加；与HR+NC组相比,HR+siRNA组细胞凋亡率增加更为明显。提示转染Bcl-2 siRNA干扰片段可增加心肌细胞凋亡。与HR+NC+H2S组相比,HR+siRNA+H2S组的细胞凋亡率明显增加。提示转染siRNA下调Bcl-2表达后,给予H2S减少心肌细胞凋亡的作用被显着削弱。四、结论1、Bcl-2是miR-1的下游靶基因之一。2、Bcl-2参与了H2S抑制心肌细胞凋亡的过程,敲低其表达可以削弱H2S的部分保护作用。综上所述,H2S抑制IR损伤心肌细胞凋亡的过程至少部分是通过miR-1-Bcl-2信号通路实现的。(本文来源于《第二军医大学》期刊2015-03-01）
李功甫[9]（2015）在《野蔷薇苷对缺氧诱导血管内皮细胞调亡及钙超载的抑制作用及其机制》一文中研究指出目的:研究证实,藏药蕨麻具有提高机体免疫力、抗氧化、耐缺氧、抗疲劳等广泛生物活性。本课题组前期通过对蕨麻进行化学成分研究及药理活性跟踪发现,野蔷薇苷(Rosamultin)是蕨麻抗缺血、缺氧的活性成分。但目前关于野蔷薇苷(Rosamultin)抗缺血、缺氧作用的信号调控机制尚不清楚。因此,本工作在文献报道及前期研究的基础上,以人脐静脉内皮细胞株EA.hy926为研究对象,建立血管内皮细胞的缺氧性损伤模型,观察野蔷薇苷对缺氧诱导血管内皮细胞钙超载及凋亡的抑制作用,并通过分析钙超载、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路调控机制及线粒体凋亡通路,探讨野蔷薇苷抗缺氧诱导血管内皮细胞钙超载及凋亡的分子机制。方法:1药物浓度的确定1.1取对数生长期的EA.hy926内皮细胞,随机分为正常对照组,缺氧模型组,以及Rosamultin(1×10-6~1×10-14mol/L)处理组,通过MTT法、LDH活性检测,观察Rosamultin对EA.hy926内皮细胞缺氧性损伤的保护作用,确定实验中Rosamultin的药物浓度。1.2取对数生长期的EA.hy926内皮细胞,随机分为正常对照组,缺氧模型组,以及Verapamil(1×10-6~1×10-14mol/L)处理组,通过MTT法观察Verapamil对EA.hy926内皮细胞缺氧性损伤的保护作用,确定阳性对照药的给药浓度。2 Rosamultin对人EA.hy926内皮细胞缺氧性损伤的保护作用2.1采用流式细胞技术,检测各组EA.hy926内皮细胞的活性氧(ROS)水平,观察Rosamultin对缺氧诱导血管内皮细胞氧化损伤的影响。2.2通过倒置相差显微镜、HE染色,观察Rosamultin对缺氧条件下EA.hy926内皮细胞形态变化的影响。2.3通过台盼蓝染色观察Rosamultin对缺氧条件下EA.hy926内皮细胞存活率的影响3 Rosamultin对人EA.hy926内皮细胞钙超载的抑制作用3.1通过荧光酶标仪,检测各实验组EA.hy926内皮细胞中的钙离子浓度,观察Rosamultin对缺氧诱导血管内皮细胞钙超载的影响。3.2通过激光共聚焦技术,观察Rosamultin对缺氧诱导EA.hy926内皮细胞钙超载的影响。3.3通过免疫印迹(Western Blot)技术,检测各组EA.hy926内皮细胞Stim1、Orai1、Calpain1蛋白表达水平。4 Rosamultin对人EA.hy926内皮细胞凋亡的抑制作用4.1通过Hochest/PI双染、DAPI染色,从形态上观察Rosamultin对缺氧诱导血管内皮细胞凋亡的影响。4.2通过流式细胞术(Annexin V/PI双染法),检测各组EA.hy926内皮细胞的凋亡率,观察Rosamultin对缺氧诱导血管内皮细胞凋亡的影响。4.3通过免疫印迹(Western Blot)技术,检测各组EA.hy926内皮细胞Bax/Bcl-2、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表达水平。5采用免疫荧光法,观察各组EA.hy926内皮细胞中HIF-1α的核转位情况,探讨Rosamultin对缺氧诱导血管内皮细胞HIF-1α活化的影响。6通过酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immnosorbent assay,ELISA),检测各组EA.hy926内皮细胞e NOS以及i NOS的表达水平。采用酶检测试剂盒检测各组EA.hy926内皮细胞NO水平。7通过免疫印迹(Western Blot)技术,检测各组EA.hy926内皮细胞p VHL、HIF-1α、HIF-1β、VEGH蛋白的表达水平。8通过缺氧前加入HIF-1α特异性抑制剂“二甲氧基雌二醇”(2Methoxyestradiol),观察Rosamultin抑制缺氧诱导EA.hy926内皮细胞凋亡的分子机制。结果:1药物浓度的确定1.1 Rosamultin浓度的确定与正常对照组相比,缺氧模型组细胞活力显着下降,1×10-6 mol/L到1×10-14 mol/L的Rosamultin处理之后,缺氧条件下细胞活力均显着上升(P<0.01)。其中,Rosamultin在1×10-11 mol/L时其保护作用最显着,且在1×10-11 mol/L-1×10-13 mol/L范围内其作用随浓度降低而趋势。与正常对照组相比,缺氧模型组LDH外漏显着增高,加入1×10-6 mol/L到1×10-14 mol/L的Rosamultin处理均可是缺氧导致的内皮细胞LDH外漏减少(P<0.01)。其中,Rosamultin在1×10-11 mol/L时,LDH外漏最少,且在1×10-11 mol/L-1×10-13 mol/L范围内,LDH外漏量随浓度降低而升高。综合MTT及LDH检测结果,确定Rosamultin的高中低浓度分别为1×10-11 mol/L、1×10-12 mol/L、1×10-13 mol/L。1.2 Verapamil浓度的确定与正常对照组相比,缺氧模型组细胞活力显着下降,各浓度Verapamil均能在缺氧条件下显着提高细胞活力(P<0.01)。为了与Rosamultin浓度一致,选取1×10-11 mol/L为Verapamil浓度。2 Rosamultin对内皮细胞缺氧损伤的保护作用2.1细胞内ROS测定结果与正常对照组相比,缺氧模型组细胞内ROS水平明显提高(P<0.01),野蔷薇苷各浓度组(Rosamultin,1×10-11、1×10-12、1×10-13mol/L)均能够明显减少缺氧引起的细胞内ROS堆积,降低细胞内ROS的水平(P<0.01)。2.2细胞形态学检查与正常对照组相比,缺氧模型组细胞皱缩、脱落。Rosamultin处理组和阳性药组细胞形态明显改善。2.3台盼蓝染色结果与正常对照组相比,缺氧模型组蓝染细胞显着增加,细胞存活率下降,而Rosamultin及Verapamil处理组蓝染细胞显着减少,细胞存活率显着升高(P<0.01)。3 Rosamultin对缺氧所致EA.hy926内皮细胞钙超载的影响3.1荧光酶标仪检测结果与正常组相比,细胞内钙离子浓度随着缺氧时间延长而升高,呈时间依赖性。缺氧2h时,与缺氧损伤组相比,Rosamultin及Verapamil处理之后,细胞内钙离子浓度显着降低(P<0.01)。3.2激光共聚焦检测结果细胞内钙离子浓度随着缺氧时间延长而升高,Rosamultin处理之后,细胞中荧光强度显着减弱。3.3钙离子通道及钙蛋白酶Western Blot检测结果细胞内Stim1、Orai1、Calpain1蛋白表达量随着缺氧时间延长而增高(P<0.01),呈浓度依赖性;缺氧2h后,与正常对照组相比,缺氧模型组细胞内Stim1、Orai1、Calpain1均显着上升(P<0.01),Rosamultin处理之后Stim1、Orai1、Calpain1的表达水平均显着下降(P<0.01)。4 Rosamultin对缺氧所致EA.hy926内皮细胞凋亡的影响4.1 Hochest/PI双染结果与正常对照组相比,缺氧模型组中死亡细胞明显增多,视野中出现大量被红色荧光标记的细胞,染色质凝集增多,而Rosamultin处理之后,死亡细胞明显减少,染色质凝集减弱。4.2 DAPI染色结果与正常对照组相比,缺氧模型组细胞核皱缩,着色加深,能看到明显的棒状凋亡小体,有的细胞胞核膨胀,破碎,而Rosamultin处理后,胞核皱缩的状态明显好转。4.3流式细胞法(Annexin V/PI双染法)结果与正常对照组相比,缺氧模型组中细胞凋亡率显着增加(P<0.01),加入野蔷薇苷(Rosamultin,1×10-11、1×10-12、1×10-13mol/L)和维拉帕米(Verapamil,1×10-11mol/L)干预之后,细胞凋亡率显着下降(P<0.01)。4.4 Rosamultin对凋亡相关蛋白的影响与正常对照组相比,缺氧模型组中细胞内Bax、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达量明显增高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01);在加入Rosamultin处理之后Bax、Cyt c、Caspase-9、Caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Bcl-2表达增高(P<0.01)。5细胞内i NOS、e NOS、NO检测5.1 ELISA法检测细胞外i NOS、e NOS含量与正常对照组相比,缺氧模型组中细胞内i NOS水平显着升高(P<0.01),e NOS水平显着降低(P<0.01)。而经过各浓度Rosamultin以及Verapamil处理之后,i NOS的水平显着降低(P<0.01),e NOS的水平显着提高(P<0.01)。5.2分光光度法检测细胞外NO含量与正常对照组相比,缺氧模型组中NO水平显着降低(P<0.01)。而经过各浓度Rosamultin以及Verapamil处理之后,NO的水平显着提高(P<0.01)。6免疫荧光法观察细胞内HIF-1α的核位移结果正常对照组,细胞内HIF-1α表达量很少,细胞中被FITC标记的HIF-1α蛋白极少,荧光微弱,缺氧后细胞内HIF-1α入核并在细胞中大量表达,荧光强度显着增强,加入Rosamultin处理之后,HIF-1α表达显著增加,荧光强度与缺氧组相比显着增强(P<0.01)。7 Rosamultin对缺氧诱导因子(HIF)相关蛋白的作用与正常对照组相比,缺氧模型组HIF-1α和VEGF蛋白表达量明显增加(P<0.01),p VHL表达量减少(P<0.01),HIF-1β表达量无明显变化;加入Rosamultin处理之后HIF-1α、VEGF和p VHL蛋白表达量与缺氧模型组相比均显着增加(P<0.01),HIF-1β蛋白表达无明显变化。8加入HIF-1α特异性抑制剂二甲氧基雌二醇(2Methoxyestradiol,后面简称2ME2)实验结果:8.1 MTT、细胞凋亡染色及流式细胞检测结果与正常对照组相比,2ME2(10μg/L)+Rosamultin(1×10-11mol/L)+缺氧组细胞活力明显低于Rosamultin(1×10-11mol/L)+缺氧组(P<0.01),但显着高于缺氧模型组和2ME2(10μg/L)+缺氧组(P<0.01),细胞凋亡染色及流式细胞检测凋亡均与MTT结果一致。8.2免疫印迹(Western Blot)结果与正常对照组相比,缺氧模型组HIF-1α、VEGF蛋白显着升高,2ME2(10μg/L)+缺氧组HIF-1α、VEGF蛋白表达明显降低(P<0.01);2ME2(10μg/L)+Rosamultin(1×10-11mol/L)+缺氧组与缺氧模型组相比HIF-1α、VEGF蛋白表达显着下调,但VEGF显着高于2ME2(10μg/L)+缺氧组(P<0.01)。结论:1 Rosamultin能明显减轻缺氧诱导内皮细胞钙超载、凋亡,改善细胞形态,提高细胞存活率,对缺氧诱导的细胞损伤有明显的保护作用。2 Rosamultin可能是通过抑制钙池依赖性钙离子通道减轻内皮细胞缺氧性钙超载。3 Rosamultin可能通过抑制线粒体凋亡通路抑制缺氧诱导的内皮细胞凋亡。4 Rosamultin可通过缺氧诱导因子信号通路发挥对内皮细胞缺氧损伤的保护作用。(本文来源于《河北医科大学》期刊2015-03-01）
周华芳,余堃,杨梅,卢秀娟,张华[10]（2014）在《砷对大鼠脑海马c-fos、c-jun表达和细胞调亡影响》一文中研究指出目的观察砷对大鼠脑海马区c-fos、c-jun蛋白表达和细胞凋亡影响,探索砷对大脑神经毒性机制。方法将56只SD大鼠随机分成4组,即低、中、高剂量染砷组(亚砷酸钠:5、10、20mg/kg)和对照组,染砷组灌胃染毒,对照组给予蒸馏水,连续15d,处死大鼠;免疫组化法和DNA断裂原位末端标记法(TUNEL)法分别测定大鼠脑海马区c-fos、c-jun蛋白表达和细胞凋亡指数。结果低、中、高剂量组大鼠脑海马区c-fos、c-jun蛋白表达阳性率分别为(54.86±10.35)%、(64.18±6.23)%、(73.69±5.52)%和(0.434±0.044)%、(0.620±0.067)%、(0.711±0.026)%,细胞凋亡指数分别为(37.80±5.28)%、(48.49±5.25)%、(72.30±4.81)%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),且呈剂量-反应关系;经相关性分析显示,大鼠海马区c-fos、c-jun蛋白表达阳性率与细胞凋亡指数均呈正相关,c-fos与c-jun蛋白表达阳性率也呈正相关。结论砷可诱导大鼠脑海马区c-fos、c-jun蛋白表达,促使细胞凋亡增加;过度的c-fos、c-jun表达可能是砷致大脑神经毒性的原因之一。(本文来源于《中国公共卫生》期刊2014年11期）
细胞调论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
多肽组学是一种可以定性和定量分析生物样品中的多肽的技术。这项技术可应用于发现疾病的生物标记分子、检测活性多肽、研究蛋白水解调控活性肽过程等方面。本实验应用多肽组学的方法研究在秋水仙素和顺铂诱导Hela细胞产生凋亡后,细胞内多肽水平的变化。细胞凋亡是生物体中一项非常重要的生理过程,在维持生物机体内环境稳态、免疫功能、生长发育等生命活动中具有重要的作用,因而研究凋亡过程具有重要意义。秋水仙素是一种用于治疗痛风和癌症的生物碱。它可以通过抑制微管蛋白聚合引起细胞凋亡。顺铂是一种重金属络合物,可结合于DNA上抑制DNA的复制过程,诱导细胞凋亡。尽管有很多方法解释秋水仙素与顺铂引起细胞凋亡的机制,但这些药物引起细胞内多肽的变化还未见报导。另外,因为对细胞内多肽可能对很多生理过程包括凋亡过程可能会发挥作用缺乏认识,所以目前利用细胞内的多肽信息用于对细胞凋亡机制的研究是相当有限的。本研究用定量多肽组学方法检测了用200μM秋水仙素与50μM顺铂处理Hela细胞24小时后多肽的变化。结果如下:1.用CCK-8检测法检测秋水仙素与顺铂对细胞存活率的影响,随药物浓度增加,细胞活力下降。2.用200μM秋水仙素处理Hela细胞24小时后,一共鉴定出203种多肽,这些多肽来自101种不同的前体蛋白。其中有84种多肽发生显着变化。在这些明显变化的多肽中,有3条多肽是来自相应的蛋白前体的N端,有24条多肽来自相应的蛋白前体的C端。其他的57条多肽则来自蛋白前体的中间部分。3.用50μM顺铂处理Hela细胞24小时后,共提取出61条多肽,这些多肽来自26种不同的前体蛋白。提取出的多肽中有34条多肽发生显着变化。这些显着变化的多肽中,只有1条多肽是来自相应的蛋白前体的N端,有14条多肽来自相应的蛋白前体的C端。其他的19条多肽则来自蛋白前体的中间部分。4.在两种药物处理细胞后提取出的相同多肽中,有些多肽在两种药物处理后均产生下调,有些多肽则只在一种药物处理后产生显着变化,没有发现共同上调的多肽,这可能与两种药物不同的作用机理有关。本实验中我们用一种有效的分析方法对细胞发生凋亡的过程中的多肽进行了全面的分析。这是一种对凋亡过程研究的新方法。结果发现秋水仙素与顺铂改变了细胞内多肽的平衡,表明多肽可能在这些药物的生物学作用中发挥作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞调论文参考文献
[1].冯科,谢楠,陈彬,李旭兵,佟振合.模块化设计的聚降冰片烯用于细胞调亡[C].第十五届全国光化学学术讨论会会议论文集.2017
[2].王倩.秋水仙素与顺铂诱导Hela细胞调亡的定量多肽组学研究[D].安徽农业大学.2016
[3].邹岩.壳聚糖被覆磁性Fe_3O_4纳米粒子搭载多柔比星介导MCF-7乳腺癌细胞调亡的研究[D].山东大学.2016
[4].李健琳,韩江全,陈玲.川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血大鼠神经细胞调亡及Caspase-3影响[J].齐齐哈尔医学院学报.2016
[5].王菲,刘丽学,孟文斌,刘晶,于聪祥.诱导子宫内膜异位症患者子宫内膜上皮细胞调亡研究[J].现代生物医学进展.2016
[6].张锷.人脐带间充质干细胞对放射性损伤大鼠肠道自由基及肠细胞调亡的影响[D].南华大学.2015
[7].游洁冰.PPARγ激动剂、胰岛素通过上调负性炎性因子TIPE2的表达抑制高糖、Aβ1-40引起的炎性反应及神经细胞调亡[D].山东大学.2015
[8].康波.硫化氢通过miR-1-Bcl-2通路抑制缺血再灌注心肌细胞调亡的实验研究[D].第二军医大学.2015
[9].李功甫.野蔷薇苷对缺氧诱导血管内皮细胞调亡及钙超载的抑制作用及其机制[D].河北医科大学.2015
[10].周华芳,余堃,杨梅,卢秀娟,张华.砷对大鼠脑海马c-fos、c-jun表达和细胞调亡影响[J].中国公共卫生.2014
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