利用重组枯草芽孢杆菌产Bacillus pumilus来源的γ-谷氨酰转肽酶及其在L-茶氨酸合成中的应用

利用重组枯草芽孢杆菌产Bacillus pumilus来源的γ-谷氨酰转肽酶及其在L-茶氨酸合成中的应用

论文摘要

L-茶氨酸作为一种非天然氨基酸对人体健康具有多方面的功效,其作为食品饮品添加剂和制药原料的需求量日益增加。本文以安全菌株Bacillus subtilis 168作为宿主菌,表达生产B.pumilus来源的γ-谷氨酰转肽酶(GGT)。结果显示,该来源GGT成功在B. subtilis 168中实现了胞外分泌表达。最后,通过关键转化条件优化,并结合批次流加策略,该重组GGT能够在16 h催化合成50.8 g/L的L-茶氨酸,该结果可以和已报道的以大肠杆菌作为宿主菌表达GGT并催化合成L-茶氨酸的产量相媲美。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株与试剂
  •     1.1.1 菌株
  •     1.1.2 引物
  •   1.2 培养基与培养条件
  •   1.3 实验方法
  •     1.3.1 重组菌GGT粗酶液的制备
  •     1.3.2 GGT酶活力的测定
  •     1.3.3 重组酶纯化
  •     1.3.4 酶法合成L-茶氨酸体系
  •     1.3.5 L-茶氨酸分析方法
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 B.pumilus来源的γ-谷氨酰转肽酶在B.subtilis 168中的表达分析
  •   2.3 重组B.subtilis发酵上清液中GGT催化生产L-茶氨酸能力分析
  •   2.4 重组GGT催化特征分析
  •   2.5 流加转化
  •   2.6 利用发酵液催化合成L-茶氨酸
  • 3 结语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: KOMERA Irene,杨套伟,张显,饶志明,徐美娟

    关键词: 谷氨酰转肽酶,茶氨酸,枯草芽孢杆菌

    来源: 食品与生物技术学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业

    单位: 江南大学生物工程学院

    基金: 国家863计划项目(2015AA021004),江苏省杰出青年科学基金项目(BK20150002),中国博士后科学基金项目(2015M570407),中央高校基本科研业务费专项资金(JUSRP51708A),111引智计划(111-2-06),江苏省现代发酵工业协同创新中心项目

    分类号: TQ922

    页码: 67-71

    总页数: 5

    文件大小: 1577K

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