导读:本文包含了反应体系优化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:金铁锁,SSR-PCR,体系建立,优化
反应体系优化论文文献综述
高丽云,陈杰,胡小龙,李斌,董章宏[1]（2019）在《金铁锁SSR-PCR反应体系的建立与优化》一文中研究指出【目的】建立和优化金铁锁SSR-PCR反应体系。【方法】以金铁锁嫩叶为试验材料,采用Ezup柱式植物基因组DNA抽提试剂盒、SDS法和CTAB法提取金铁锁DNA,并对提取结果进行比较。利用初筛并合成的20对金铁锁EST-SSR引物,对影响SSR-PCR体系的模板DNA、引物、Taq DNA聚合酶和dNTP用量这4个因素进行L16(44)正交实验,从而建立较为稳定的金铁锁SSR-PCR反应体系。【结果】试剂盒法提取得到的金铁锁DNA质量最好且符合SSR分子标记试验;在20对金铁锁EST-SSR引物中,有2对可用于SSR多态性分析;各因素对PCR扩增效果的影响程度为引物>Taq DNA聚合酶>模板DNA>dNTP。试验最终确定的金铁锁SSR-PCR最佳反应体系(20μL):1.0 mL模板DNA(40 ng/μL)、1.5μL引物(10μmol/L)、0.3μL dNTP(10 mmol/L)、0.3μL Taq DNA聚合酶(5U/μL)以及2.0μL 10×PCR Buffer(含Mg2+15 mmol/L),用ddH2O补足至总体积20μL。【结论】所建立的金铁锁SSR反应体系可为金铁锁不同种群的遗传变异研究及杂交育种时亲缘关系的分子鉴定提供前期研究基础。(本文来源于《云南农业大学学报(自然科学)》期刊2019年06期）
代培红,寇小霞,吾买尔夏提·塔汉,李月,刘超[2]（2019）在《大赖草SRAP-PCR反应体系的建立与优化》一文中研究指出本研究以新疆大赖草为材料,利用单因素实验和正交设计实验相结合分别研究了模板DNA浓度、Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度等对大赖草SRAP-PCR体系的影响,并对扩增体系进行了优化。最后确定SRAP-PCR反应体系(25μL体系)中各因素最佳浓度为:引物0.4 mmol/L,模板DNA 30 ng/μL,dNTP 0.16 mmol/L Mg~(2+)1.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶量1.0 U。经PCR反应体系验证和引物筛选试验表明,发现该体系适合于后续的大赖草遗传多样性研究。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年17期）
杨国栋,李志超,王骏,尹立雪,昂萨尔·江阿拜[3]（2019）在《LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究》一文中研究指出对群体感应淬灭酶LsrK的活力测定反应体系进行优化,测定LsrK的激酶活力和稳定性。以信号分子AI-2为底物,对反应体系中ATP浓度、发光波长和LsrK激酶浓度进行优化,利用Kinase-Glo发光试剂盒测定激酶活力,并在优化反应体系下测定LsrK激酶活力的稳定性。确定反应体系中ATP浓度为3μM,LsrK激酶浓度为15μM,发光波长为560nm;LsrK在30℃条件下,随时间延长,激酶活力逐渐降低,12h时酶活力基本完全消失。为进一步进行LsrK蛋白的功能研究及酶制剂的制备奠定了基础。(本文来源于《轻工科技》期刊2019年09期）
周武,王驰,胡娜,索有瑞[4]（2019）在《中国沙棘ISSR-PCR反应体系的建立和优化》一文中研究指出本研究以青海东部地区中国沙棘为试验材料,以中国沙棘雌雄株叶片基因组DNA混池为模板,再用初筛的引物UBC-857用于ISSR体系的优化。采用正交实验并结合单因素实验方法进行优化中国沙棘ISSR-PCR反应体系,得到的最优20.0μL反应体系为:DNA (10 ng/μL) 2.0μL,dNTPs (10 mmol/L) 1.6μL,引物(10μmol/L) 0.2μL,10×PCR Buffer (含Mg2+15μmol/L) 2.0μL,Mg2+Cl (25 mmol/L) 2.0μL,Taq DNA聚合酶(5 U/μL) 0.2μL。经过筛选,引物UBC807能够稳定地扩增出雌雄特异性条带。通过建立最优IS SR-PCR反应体系,为研究中国沙棘提供分子标记水平上的理论依据和技术方法。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年16期）
欧师琪,杨飞燕,史树森[5]（2019）在《大豆孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化》一文中研究指出采用正交设计对大豆孢囊线虫ISSR-PCR反应体系的4因素(Taq酶、模板DNA、d NTPs、引物),在4个用量水平上进行优化试验。结果表明:大豆孢囊线虫ISSR-PCR的最佳反应体系为在25μL反应体系中,含Taq DNA聚合酶(5 U/μL) 0. 34μL、模板DNA 1. 2μL、d NTPs(2. 5 mmol/L) 1. 5μL、引物(10μmol/L)0. 8μL、10×PCR Buffer 2. 5μL。引物PTY26最适退火温度为55℃。用引物PTY188和PTY888对大豆孢囊线虫最佳ISSR-PCR的反应体系进行验证,结果表明该反应体系和程序有较好的重复性和稳定性。(本文来源于《吉林农业大学学报》期刊2019年04期）
侯万伟[6]（2019）在《蚕豆ISSR反应体系的建立与优化》一文中研究指出本研究通过正交设计,对蚕豆基因组ISSR反应的5个因素(镁离子,模板DNA浓度,引物浓度,dNTP浓度, Taq酶浓度)进行优化,建立蚕豆ISSR-PCR扩增体系。通过正交设计试验确定的PCR扩增体系为(20μL):10×缓冲液2.0μL,引物浓度3 mmol/L、dNTPs浓度0.4 mmol/L、Taq DNA聚合酶浓度1.0 U、基因组DNA 200 ng、Mg~(2+)浓度1.5 mmol/L。反应程序为:95℃变性5 min;95℃变性45 s;52℃退火30 s,72℃延伸90 s,循环35次;72℃延伸8 min,4℃保存。通过试验建立的反应体系扩增稳定,扩增的条带清晰,该体系为后续蚕豆种质资源鉴定、性状的分子标记等研究提供了科学依据。(本文来源于《分子植物育种》期刊2019年15期）
刘玲,陈祥平,范小敏,傅晓,柯皓天[7]（2019）在《桑树SSR-PCR反应体系的优化》一文中研究指出为了建立经济稳定的桑树简单重复序列(SSR)-PCR反应体系,为SSR分子标记在桑树研究中更广泛地应用提供试验基础,采用L_(16)(4~5)正交试验设计和单因素试验,对桑树SSR-PCR反应体系中的模板DNA浓度、引物浓度、Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度和rTaq酶用量5个因素的4个水平进行优化分析,并比较这5个因素的不同浓度对扩增效果的影响。结果表明,各因素水平变化对反应体系的影响大小依次为Mg~(2+)、dNTPs>引物>模板DNA>rTaq酶。研究最终确立了最佳反应体系,即在10μL反应体系中,含有1.5μL 10～20 ng/μL DNA模板、0.4μL 25 mmol/L Mg~(2+)、0.5μL 2 mmol/L dNTPs、各0.15μL 20μmol/L正反向引物、0.1μL 5 U/μL rTaq酶和1μL 10×loading buffer。通过稳定性检测,表明该体系能够用于桑树的SSR分析。(本文来源于《江苏农业科学》期刊2019年14期）
代玉立,甘林,阮宏椿,杨静民,石妞妞[8]（2019）在《福建省玉米大斑病菌ISSR-PCR反应体系的优化和引物的筛选》一文中研究指出【目的】明确适用于福建省玉米大斑病菌ISSR分子标记的反应体系和引物。【方法】采用单因素水平优化法对ISSR-PCR扩增反应中的Taq聚合酶用量、dNTPs浓度、Mg~(2+)浓度、模板DNA浓度、PCR反应循环数以及引物的最佳退火温度等重要参数进行优化。【结果】适合福建省玉米大斑病菌群体遗传多样性分析的ISSR-PCR反应体系(25μL)为:Taq聚合酶0.55 U、dNTPs 0.30 mmol·L~(-1)、Mg~(2+) 1.30 mmol·L~(-1)、DNA模板100 ng、引物10 pmol。ISSR-PCR扩增程序为:94℃预变性4 min;94℃变性45 s,51.2～56.0℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,35个循环;72℃延伸10 min。利用优化的反应体系从56条ISSR引物中筛选出稳定性好、多态性高的引物10条:UBC117、UBC118、UBC808、UBC835、UBC847、UBC855、UBC856、UBC857、UBC866和UBC887,其最佳退火温度分别为55.6、53.1、51.2、51.2、56.0、53.1、53.1、51.2、51.2和51.2℃。利用优化的ISSR-PCR反应体系对21株供试菌株进行PCR扩增,结果表明,相同地理来源以及不同地理来源菌株间的DNA多态性均不同,表明福建省玉米大斑病菌群体存在丰富的遗传多样性。【结论】本研究优化的ISSR-PCR反应体系和筛选的引物可用于福建省玉米大斑病菌群体遗传多样性和遗传结构的研究。(本文来源于《福建农业学报》期刊2019年07期）
李显煌,高丽云,王娟,张贵良,唐军荣[9]（2019）在《云南金花茶SSR-PCR反应体系的建立与优化》一文中研究指出以云南金花茶为试验材料,利用试剂盒法、SDS法及CTAB法3种方法提取其DNA,并对3种方法的提取结果进行比较;经初筛合成云南金花茶EST-SSR引物,并对影响SSR-PCR体系的Mg~(2+)、Taq DNA聚合酶、dNTP、引物及模板DNA这5个因素进行L_(16)(45~)正交实验,以期建立较为稳定的云南金花茶SSR-PCR体系。试验结果表明:试剂盒法提取得到的云南金花茶DNA质量最好且符合SSR分子标记试验。各因素对PCR扩增效果的影响程度为:Mg2+>引物> Taq DNA聚合酶> dNTP>模板DNA。试验最终确定的金花茶SSR-PCR最佳反应体系(20μL)为:2.0μL Taq Buffer、1.5μL Mg2+(25 mmol/L)、0.3μL dNTP(10 mmol/L)、0.2μL Taq DNA聚合酶(5 U/μL)、前后引物各0.4μL(10μmol/L)、0.5μL模板DNA(50 ng/μL)、14.7μL ddH_2O。建立和优化云南金花茶SSR反应体系,可为云南金花茶不同种群的遗传变异研究提供基础。(本文来源于《中南林业科技大学学报》期刊2019年08期）
邱朝坤,黄琳[10]（2019）在《丙烯酰胺天冬酰胺/葡萄糖低湿模式反应体系条件优化》一文中研究指出试验主要研究了天冬酰胺/葡萄糖低湿模拟体系中丙烯酰胺生成及提取条件,对影响体系丙烯酰胺生成的反应条件和丙烯酰胺提取条件进行了优化。结果表明,天冬酰胺/葡萄糖低湿模拟反应体系中丙烯酰胺最佳反应条件为:40μL葡萄糖(0.25 mol/L)和40μL天冬酰胺(0.25 mol/L)加入40μL蒸馏水在160℃反应20 min,反应结束后向体系中加入1 mL蒸馏水超声重复提取2次,每次5 min,提取温度30℃。在上述条件下体系中生成和提取的丙烯酰胺量达到最大。(本文来源于《食品工业》期刊2019年06期）
反应体系优化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本研究以新疆大赖草为材料,利用单因素实验和正交设计实验相结合分别研究了模板DNA浓度、Mg~(2+)浓度、dNTPs浓度等对大赖草SRAP-PCR体系的影响,并对扩增体系进行了优化。最后确定SRAP-PCR反应体系(25μL体系)中各因素最佳浓度为:引物0.4 mmol/L,模板DNA 30 ng/μL,dNTP 0.16 mmol/L Mg~(2+)1.5 mmol/L,Taq DNA聚合酶量1.0 U。经PCR反应体系验证和引物筛选试验表明,发现该体系适合于后续的大赖草遗传多样性研究。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
反应体系优化论文参考文献
[1].高丽云,陈杰,胡小龙,李斌,董章宏.金铁锁SSR-PCR反应体系的建立与优化[J].云南农业大学学报(自然科学).2019
[2].代培红,寇小霞,吾买尔夏提·塔汉,李月,刘超.大赖草SRAP-PCR反应体系的建立与优化[J].分子植物育种.2019
[3].杨国栋,李志超,王骏,尹立雪,昂萨尔·江阿拜.LsrK激酶活力测定反应体系的优化及其稳定性研究[J].轻工科技.2019
[4].周武,王驰,胡娜,索有瑞.中国沙棘ISSR-PCR反应体系的建立和优化[J].分子植物育种.2019
[5].欧师琪,杨飞燕,史树森.大豆孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化[J].吉林农业大学学报.2019
[6].侯万伟.蚕豆ISSR反应体系的建立与优化[J].分子植物育种.2019
[7].刘玲,陈祥平,范小敏,傅晓,柯皓天.桑树SSR-PCR反应体系的优化[J].江苏农业科学.2019
[8].代玉立,甘林,阮宏椿,杨静民,石妞妞.福建省玉米大斑病菌ISSR-PCR反应体系的优化和引物的筛选[J].福建农业学报.2019
[9].李显煌,高丽云,王娟,张贵良,唐军荣.云南金花茶SSR-PCR反应体系的建立与优化[J].中南林业科技大学学报.2019
[10].邱朝坤,黄琳.丙烯酰胺天冬酰胺/葡萄糖低湿模式反应体系条件优化[J].食品工业.2019