导读:本文包含了二聚体蝎型探针论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:α-地中海贫血,分子诊断,蝎型探针,荧光聚合酶链反应
二聚体蝎型探针论文文献综述
朱贵忠,孙莉,齐志华[1]（2014）在《二聚体蝎型探针快速检测α-地中海贫血基因-α~(3.7)缺失》一文中研究指出目的建立快速检测α-地中海贫血基因-α3.7缺失的二聚体蝎型探针荧光聚合酶链反应(gap-PCR)方法。方法采用二聚体蝎型探针gap-PCR技术,建立一种快速检测α-地中海贫血基因-α3.7缺失的方法;检测40份已知基因型和100份临床样本,并与常规gap-PCR法进行平行对比分析。结果本研究建立的检测方法能准确检测α-地中海贫血基因-α3.7缺失;40份已知基因型和100份临床标本检测的灵敏度和准确性均达到100%。结论本研究建立的二聚体蝎型探针α-地中海贫血基因-α3.7缺失gap-PCR方法,操作简单快速,结果准确可靠。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2014年10期）
陈峰,吴尔翔,丁锁顺,邵亚平,章杰[2]（2013）在《二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测志贺菌方法的建立及初步应用》一文中研究指出目的利用二聚体蝎型荧光探针法,建立一种可广泛应用且敏感、特异的检测志贺菌的荧光定量PCR技术。方法根据编码志贺菌ipaH基因的核苷酸序列设计引物和荧光探针,采用基因重组技术构建用于志贺菌检测的定量标准品,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测志贺菌的二聚体蝎型探针定量PCR方法。结果成功构建了志贺菌重组质粒标准品和志贺菌实时荧光定量PCR方法;通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性、敏感性、稳定性和重复性;对比分离培养标本,二者符合率为100%;对比TaqMan方法,本方法具有更敏感、省时、成本低的特点。结论建立了一种以二聚体蝎型荧光探针技术为基础的志贺菌荧光定量PCR检测法,为研制新型的检测试剂盒奠定了基础,可应用于食品卫生监管以及传染病诊断等。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2013年09期）
夏乾峰[3]（2008）在《新型二聚体蝎型探针定量检测沙眼衣原体方法的建立》一文中研究指出目的:目前,沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis, CT)检测的方法为基于Taqman探针技术的荧光定量PCR,该法具有敏感度高和特异性好等优点而广泛应用于临床。但是,Taqman探针技术存在以下两大问题:一是由于探针两端同时标记荧光染料,所以合成和纯化成本较高;二是检测过程需要叁步:变性、杂交、延伸水解,检测时间较长。二聚体蝎型探针分别标记荧光染料于互补的两段单链DNA上,从原理上克服了Taqman探针标记和纯化难度大等缺点而降低了成本;在检测步骤上省去了酶水解过程,可缩短检测时间。本研究拟建立一种快速、准确、价廉、操作简便,以二聚体蝎型探针荧光定量PCR技术为基础的检测CT方法。方法:采用基因克隆技术,将CT保守序列主要外膜蛋白基因(MOMP)克隆入pMD18-T载体,构建重组质粒作为DNA标准品。根据MOMP基因序列设计二聚体蝎型探针,优化定量PCR体系。采用4个标准品系列和1个阳性标本,对其批内变异系数(CV)和批间变异系数进行测定;采用肺炎衣原体、鹦鹉热衣原体、15种标准血清型CT及16种生殖道常见病原体对其特异性进行测定;用该检测系统与两种FDA认证的分子诊断方法,分别对148例临床标本进行检测,根据CT诊断的“扩大金标准”,叁种方法中任何两种方法阳性即判为该标本为CT感染标本,对本检测方法的临床检测性能进行评价。结果:1)成功构建了重组质粒。2)建立了基于二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法,其线性范围为25~1010copies/反应管;不同浓度样本的批内CV范围为4.92%~21.73%,批间CV范围为6.94%~27.17%;特异性为100%。3)初步临床应用证明,该方法能够一次准确地诊断98.6%的临床确诊标本,是一种快速、易于操作的用于沙眼衣原体感染的分子诊断新方法。结论:建立了以二聚体蝎型荧光探针技术为平台的沙眼衣原体荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法。对所建立的方法进行优化及方法学评价,研究表明该方法具有结果可靠、检测速度快、特异性敏感性高、试剂成本较低廉的优点。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2008-04-01）
王虹,钟敏,舒朝忠,陈淑惠,尹一兵[4]（2007）在《二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测临床标本结核分枝杆菌DNA》一文中研究指出目的比较二聚体蝎型探针荧光定量PCR与抗酸染色、L-J培养法、结核分枝杆菌直接试验(MTD)的检出率、检测时间等,探讨二聚体蝎型探针荧光定量PCR检测临床标本中结核分枝杆菌DNA(TB-DNA)的实际应用价值。方法以建立的结核二聚体蝎型探针荧光定量PCR方法为基础,对43例结核确诊患者的标本及11例非肺结核患者的痰标本进行检测,并与抗酸染色、L-J培养法、结核分枝杆菌直接试验(MTD)进行比较。结果二聚体蝎型探针荧光定量PCR能快速准确的检测临床标本中的TB-DNA。其标准品浓度在102～106copies/μl时,方法能够保持良好的线性关系(相关系数为0.9994),阳性检出率(100%)显着高于抗酸染色法(16.28%)和培养法(37.21%)的检出率,与MTD试验的检出率(100%)一致。MTD试验检测时间约4～5h,而二聚体蝎型探针FQ-PCR检测约需80min即可得到检测结果,检测费用仅为MTD的1/4。结论二聚体蝎型探针荧光定量PCR用于临床标本结核分枝杆菌DNA的检测具有快速价廉、敏感特异的特点,该方法作为定量检测结核分枝杆菌的分子诊断新途径值得临床推广应用。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2007年07期）
毕恣[5]（2007）在《二聚体蝎型探针定量检测解脲脲原体方法的建立及初步临床应用》一文中研究指出目的:利用二聚体蝎型荧光探针技术,建立一种能广泛应用于临床而且稳定、敏感、特异的荧光定量PCR检测解脲脲原体(UU)方法。方法:构建重组质粒pMD18-T-UU-Ure作为标准品。自行设计二聚体蝎型探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价。结果:1)成功构建了重组质粒pMD18-T-UU-Ure; 2)建立了利用二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法,其线性检测范围:101-107copies/μl;灵敏度:1copies/μl;重复性试验结果为批内CV为3.50%,批间CV为3.93% ,天间CV为3.77%;特异性:100%;与Taqman探针技术定量方法比较,结果差异无统计学意义;3)初步临床应用证明:该方法比利用Taqman技术建立的方法灵敏度更高,检测时间更短和成本也明显降低。结论:在国内外首次建立了以二聚体蝎型荧光探针为平台的解脲脲原体荧光定量PCR检测方法,为新型试剂盒的开发提供了实验依据,同时也促进新型探针技术的应用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2007-04-01）
王虹,钟敏,许颂霄,尹一兵[6]（2006）在《新型二聚体蝎型探针技术在结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应中的应用》一文中研究指出目的利用二聚体蝎型荧光探针技术,建立一种敏感特异、快速价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌DNA荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测方法。方法构建重组质粒pMD18-T-senX3-regX3IR作为标准品,自行设计二聚体蝎型探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价及初步临床应用。结果(1)成功构建了重组质粒pMD18-T-senX3-regX3IR。(2)建立了利用二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法,其线性范围:101~107拷贝/μl;灵敏度:101拷贝/μl;重复性:批内变异系数(CV)为2·35%,批间CV为3·17%,日间CV为4·06%;特异性100%;(3)初步临床应用证明:该方法比商品化Taqman方法阳性检出率更高,检测时间更短和成本也明显降低。结论本研究首次建立了以二聚体蝎型荧光探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,这为应用二聚体蝎型荧光探针技术开辟检测结核分枝杆菌的分子诊断新途径奠定了一定的基础。(本文来源于《中华检验医学杂志》期刊2006年12期）
朱建军[7]（2006）在《二聚体蝎型探针定量检测HCV方法的建立》一文中研究指出目的:利用二聚体蝎型荧光探针技术,建立一种能广泛应用于临床而且稳定、敏感、特异的荧光定量PCR检测HCV方法。方法:构建重组质粒pMD18-T-HCV-5’-NCR作为标准品。自行设计二聚体蝎型探针,优化定量PCR体系,并进行方法学评价。结果:1)成功构建了重组质粒pMD18-T-HCV-5’-NCR;2)建立了利用二聚体蝎型荧光探针的荧光定量PCR方法,其线性范围:101-1010copies/μl;灵敏度:10copies/μl;重复性:批内CV为6.36%,批间CV为6.63%,天间CV为8.27%;特异性:100%;与紫外定量方法比较,结果差异无显着性,且高度相关;3)初步临床应用证明:该方法比利用TaqMan技术建立的方法灵敏度更高,检测时间更短和成本也明显降低。结论:在国内外首次建立了以二聚体蝎型荧光探针为平台的丙型肝炎病毒荧光定量PCR检测方法,为新型试剂盒的开发奠定了坚实的基础,同时也促进新型探针技术的应用。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2006-05-01）
二聚体蝎型探针论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的利用二聚体蝎型荧光探针法,建立一种可广泛应用且敏感、特异的检测志贺菌的荧光定量PCR技术。方法根据编码志贺菌ipaH基因的核苷酸序列设计引物和荧光探针,采用基因重组技术构建用于志贺菌检测的定量标准品,通过对荧光定量PCR反应体系和反应条件的摸索,建立了检测志贺菌的二聚体蝎型探针定量PCR方法。结果成功构建了志贺菌重组质粒标准品和志贺菌实时荧光定量PCR方法;通过特异性、敏感性、稳定性和重复性验证,结果表明具有较好的特异性、敏感性、稳定性和重复性;对比分离培养标本,二者符合率为100%;对比TaqMan方法,本方法具有更敏感、省时、成本低的特点。结论建立了一种以二聚体蝎型荧光探针技术为基础的志贺菌荧光定量PCR检测法,为研制新型的检测试剂盒奠定了基础,可应用于食品卫生监管以及传染病诊断等。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
二聚体蝎型探针论文参考文献
[1].朱贵忠,孙莉,齐志华.二聚体蝎型探针快速检测α-地中海贫血基因-α~(3.7)缺失[J].新乡医学院学报.2014
[2].陈峰,吴尔翔,丁锁顺,邵亚平,章杰.二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测志贺菌方法的建立及初步应用[J].中国人兽共患病学报.2013
[3].夏乾峰.新型二聚体蝎型探针定量检测沙眼衣原体方法的建立[D].重庆医科大学.2008
[4].王虹,钟敏,舒朝忠,陈淑惠,尹一兵.二聚体蝎型探针荧光定量PCR快速检测临床标本结核分枝杆菌DNA[J].中国人兽共患病学报.2007
[5].毕恣.二聚体蝎型探针定量检测解脲脲原体方法的建立及初步临床应用[D].重庆医科大学.2007
[6].王虹,钟敏,许颂霄,尹一兵.新型二聚体蝎型探针技术在结核分枝杆菌荧光定量聚合酶链反应中的应用[J].中华检验医学杂志.2006
[7].朱建军.二聚体蝎型探针定量检测HCV方法的建立[D].重庆医科大学.2006