导读:本文包含了水蛭素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:水蛭,间质,特发性,凝血酶,功能,输尿管,内皮。
水蛭素论文文献综述
范桢亮,方艳,景煊峰,向月,王华宇[1]（2019）在《虫草素与水蛭素对UUO大鼠炎症反应、EMT及RIF的影响》一文中研究指出目的探讨虫草素、水蛭素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠血清炎症因子,梗阻肾组织中上皮细胞间质转分化(EMT)和肾间质纤维化(RIF)的影响。方法选用雄性SD大鼠24只,随机分成空白组、模型组、虫草素组、水蛭素组,每组6只。模型组、虫草素组、水蛭素组均建立UUO模型,术后第1天起,治疗组分别给予虫草素(10mg/kg)或水蛭素(2mg/kg)尾静脉注射,模型组给予2ml生理盐水尾静脉注射。连续治疗7天后采集大鼠静脉血与肾组织进行血清炎症因子、组织病理学、组织蛋白表达水平以及免疫组化分析。结果与空白组相比模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α明显上升,IL-10、IL-12明显下调(P<0.001),虫草素组、水蛭素组大鼠较模型组血清IL-1β、IL-6、TNF-α均有不同程度的下降,IL-10明显升高(P<0.001),并且虫草素略优于水蛭素(P<0.05)。与空白组相比,模型组大鼠肾间质炎症细胞浸润与纤维化程度明显加重(P<0.001),组织内α-SMA与COL-III水平明显升高(P<0.001)。而虫草素与水蛭素干预均可不同程度的减轻肾组织炎症细胞浸润程度,且虫草素优于水蛭素(P=0.001)。两者均可下调组织内α-SMA与COL-III水平(P<0.001),且水蛭素略优于虫草素(P<0.05)。结论虫草素与水蛭素均可有效调控UUO大鼠炎症反应,进而抑制EMT以延缓RIF。但是两者在疗效上有一定差异,虫草素对炎症反应以及RIF的调控更优,而水蛭素对抑制EMT和细胞外基质胶原沉积更好。(本文来源于《时珍国医国药》期刊2019年10期）
于永慧[2]（2019）在《心梗后纤维化心肌ECM蛋白表达谱构建及水蛭素的干预效应研究》一文中研究指出心肌纤维化是众多心血管疾病,如心肌梗死、冠心病、心肌病等发展至后期的共同病理改变。如何防治心肌纤维化是当前世界医学研究的难点和热点。心肌梗死后心肌纤维化(Cardiac fibrosis after myocardial infraction,CFMI)是心肌纤维化常见的临床类型之一,其核心病理环节是CFMI的主要效应细胞心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs)在氧化应激、炎症因子等促纤维化因素的诱导下,出现增殖、表型分化、迁移、分泌等生物学行为的改变,导致细胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)大量沉积,影响心脏舒缩功能和电信号传导,出现心力衰竭、心律失常,影响CFMI患者预后。AMPK介导的Integrin β1信号通路在CFs参与的ECM过度沉积中发挥重要作用。现代中医理论认为,CFMI属于“胸痹”、“症瘕”等范畴,与血瘀证的病因病机密切相关。课题组前期研究发现,活血化瘀中药在调节AMPK代谢通路、优化心肌能量代谢的同时,下调CollagenⅠ、CollagenⅢ、骨桥蛋白、腱糖蛋白-C等ECM关键蛋白,抑制心肌梗死后心室重构和心功能异常。但是目前对于CFMI中ECM表达情况的研究局限于个别蛋白,活血化瘀中药在其中发挥的关键调节机制亦尚不明确。水蛭是祖国医学中经典的活血化瘀中药,具有破瘀血、通经络、消症瘕等确切功效,以及抗凝、抗栓、抗血小板、抗心肌纤维化等药理作用。目前含水蛭中成药和水蛭素衍生物比伐芦定在抗心肌纤维化、减少心梗面积方面获得一些证据,但缺乏对水蛭素单一成分抗CFMI的疗效和机制研究。本研究采用Label-free亚蛋白质组学技术探索CFMI主要病理产物ECM的组成特点,通过建立大鼠CFMI模型和AngⅡ诱导乳鼠CFs模型,以水蛭主要有效组分水蛭素为治疗手段,从AMPK介导的Integrinβ1及其下游FAK/PI3K/Akt、TGF-β1/Smad2/3信号通路,观察水蛭素对CFMI修复过程中关键ECM蛋白表达的影响,为中医药延缓CFMI、改善心梗患者预后提供科学依据。1文献综述分别阐述CFMI的病理机制、早期识别、临床干预,突出中医药活性成分在CFMI治疗中的潜力。对传统活血化瘀中药水蛭的基源、典籍记载、成药组方、制剂开发,以及水蛭主要活性成分水蛭素治疗心血管疾病的药理学机制进行了综述,为研究水蛭素干预CFMI的实验研究奠定理论基础。2实验研究研究一心肌梗死后纤维化心肌ECM蛋白表达谱的构建与生信分析目的:通过Label-free亚蛋白质组学技术分析大鼠CFMI组织中ECM蛋白的组成特点和差异蛋白的互作机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支建立Wistar大鼠CFMI模型,随机分为假手术组(Sham)、模型2周组(Model 2W)、模型4周组(Model 4W),每组10 只。运用Label-free亚蛋白质组学技术分析CFMI后2周、4周大鼠心肌ECM差异蛋白改变,GO分析从细胞组分、分子功能、生物过程描述ECM差异蛋白特征,KEGG分析参与ECM差异蛋白表达的调控通路,最后通过Western Blot技术对筛选出的ECM差异蛋白进行验证。结果:共筛选出243个ECM差异蛋白。与Sham 比较,Model 2W上调显着的是骨甘氨酸(Osteoglycin),Model 2W下调显着的是巢蛋白-1(Nidogen-1),Model 4W上调显着的是光蛋白聚糖(Lumican)、胶原Ⅵ型α2链(Collagen 6A2),Model 4W 下调显着的是 Nidogen-1;与 Model 2W 比较,Nidogen-1、踝蛋白-1(Talin-1)在Model4W显着下调(P<0.05)。GO分析显示,ECM差异蛋白功能显着富集在细胞外区域、细胞外基质等细胞组分,受体结合、金属离子结合、Integrin结合等分子功能,以及免疫调节、蛋白转运、膜组织、细胞间信号转导、细胞粘附等生物过程。KEGG分析显示,黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、Integrinβ1与ECM受体通路显着富集。Western Blot 结果显示,与 Sham 比较,Model 2W 组 Collagen 6A2、Lumican、Talin-1 表达上调,Model 4W组 Collagen 6A2、Lumican 显着升高,Nidogen-1 显着下降(P<0.05)。与 Model2W组比较,Model4W 组 Nidogen-1、Lumican、Talin-1 表达下调(P<0.05)。其中,与 Sham 比较,Model 4W 组 Collagen 6A2、Lumican 表达上调,Nidogen-1 表达下调;与 Model 2W 组比较,Model 4W组Nidogen-1、Talin-1 表达下调,Label-free 结果与 Western Blot 结果一致。结论:参与CFMI发生的ECM差异蛋白调控靶点为Collagen 6A2、Nidogen-1、Lumican、Talin-1、Osteoglycin 等,其作用机制可能涉及 FAK、PI3K/Akt、Integrinβ1等信号通路。研究二水蛭素调节ECM表达干预大鼠心梗后心肌纤维化的效应机制目的:观察水蛭素对CFMI大鼠心脏功能、血清标记物、心肌病理、分子病理的影响,探讨水蛭素干预ECM重建防治CFMI的效应机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支建立Wistar大鼠CFMI模型,随机分为4组:假手术组(Sham,生理盐水)、模型组(Model,生理盐水)、缬沙坦组(Valsartan,144mg·kg-1)、水蛭素组(Hirudin,270mg·kg-1),每组 20 只,每天给药 1 次,连续给药4周。心脏超声检测各组大鼠舒张末期/收缩末期的左室内径(LVD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室容积(EDV/ESV)、左室射血分数(LVEF);血清学检测心肌损伤(CK-MB、cTnT)、心力衰竭(ANP、BNP)、氧化应激(Ang Ⅱ、MDA、SOD)等标记物;TTC染色、HE染色、Masson染色、天狼星红染色观察心肌梗死及纤维化病变情况;免疫组化和Western Blot技术观察ECM差异蛋白表达;Western Blot技术观察AMPK、Integrin β1、FAK、PI3K p110α PI3K p110(3、Akt、TGF-β1、Smad2/3 等信号通路蛋白表达。结果:(1)与 Sham 组比较,Model 组 IVST、LVPWT 减少,LVD、EDV、ESV增高,LVEF降低(P<0.05),提示CFMI模型建立成功。与Model组比较,Hirudin 组 IVSTs、LVPWT、LVEF 升高,LVD、EDV、ESV 降低(P<0.05)。(2)与 Model 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 CK-MB、cTnT、ANP、BNP、Ang Ⅱ、MDA水平显着下降,SOD显着升高(P<0.05)。(3)与Model组比较,Valsartan组、Hirudin组心重指数、心梗面积减少,胶原容积分数显着降低;Hirudin组血管周围胶原容积分数显着降低(P<0.05)。与Model组比较,Valsartan组、Hirudin 组 Collagen 6A2、Lumican 表达减少,Nidogen-1 表达增多(P<0.05)。(4)与 Model 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 AMPKα、FAK、PI3K p110α、Akt蛋白活性上调,Integrinβ1、TGF-β1、Smad2/3蛋白表达下调(P<0.05),PI3K p110β蛋白表达无显著变化(P>0.05)。结论:水蛭素能够改善CFMI大鼠左室扩张,提高心脏功能,减轻心肌损伤,减少心重指数、心梗面积,减轻心肌组织和血管周围胶原沉积,从而延缓CFMI进展;其机制与调节Collagen 6A2、Lumican、Nidogen-1等ECM差异蛋白代谢,调控心肌 AMPKα/Integrin β1/FAK 及其介导的下游 PI3K/Akt、TGF-β1/Smad2/3 信号通路有关。研究叁水蛭素干预Ang Ⅱ诱导乳鼠心肌成纤维细胞ECM表达的机制目的:通过Ang Ⅱ诱导乳大鼠心肌成纤维细胞(NRCFs)模型,观察水蛭素对NRCFs形态、增殖、表型分化、迁移、分泌等细胞生物学行为的影响机制。方法:分离、提取、培养NRCFs,经免疫荧光鉴定波形蛋白(+)/vWF(-)后,给予不同浓度(10-9 mol·L-1、10-8mol·L-1、10-7mol·L-1、10-6mol·L-1)AngⅡ诱导不同时间(6h、12h、24h、48 h),采用CCK-8法观察NRCFs增殖活力,确立Ang Ⅱ诱导NRCFs促纤维化模型的适宜浓度和时间。NRCFs分为4组:对照组(Control)、模替型组(Ang Ⅱ)、缬沙坦组(Valsartan)、水蛭素组(Hirudin),给予相应药物预干预30 min后加入Ang Ⅱ诱导NRCFs。采用流式细胞法观察各组NRCFs细胞周期,α-SMA法观察NRCFs表型转化,Transwell小室试验和划痕试验观察NRCFs迁移,HYP含量测定法观察NRCFs胶原蛋白分泌,免疫荧光染色技术观察ECM差异蛋白分泌情况,Western Blot技术观察AMPKα1/α2、Integrinβ1、FAK、TGF-β1、Smad2/3、Nideogen-1 蛋白表达情况。结果:(1)NRCFs培养24h后生长良好,波形蛋白(+)/vWF(-)的NRCFs比例在(98.09±1.03)%。选定 Ang Ⅱ以10-6mol·L-1刺激24h作为诱导NRCFs纤维化改变的理想模型。(2)与Ang Ⅱ组比较,Valsartan组、Hirudin组静止期G0G1期细胞百分比增多、增殖期S期细胞百分比降低,α-SMA免疫荧光染色阳性的细胞数量、穿越Transwell小室的细胞数量减少,划痕宽度延长(P<0.05)。(3)与 Ang Ⅱ 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 HYP 含量降低,Lumican、Collagen 6A2荧光强度下降,Hirudin组Nidogen-1、Talin-1荧光强度升高(P<0.05)。(4)与Ang Ⅱ组比较,Valsartan组、Hirudin组AMPKα1/α2、FAK表达上调,Integrin β1 表达下调,Valsartan 组 TGF-β1、Smad2/3 表达下调(P<0.05);Hirudin组 TGF-β1、Smad2/3,Valsartan 组、Hirudin 组 Nidogen-1 表达无差异(P>0.05)。结论:水蛭素能够抑制Ang Ⅱ诱导的NRCFs增殖、表型分化、迁移、分泌等细胞生物学行为的改变,其机制与调节AMPK/Integrin β1/FAK信号通路表达,进而优化NRCFs对Ang Ⅱ诱导的促纤维化因素的处理能力有关。(本文来源于《中国中医科学院》期刊2019-05-28）
任桐,朱鹏宇,杨洪涛[3]（2019）在《水蛭素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质损伤及MCP-1、ICAM-1的干预效应研究》一文中研究指出[目的]观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。[方法]健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组24只和造模组96只。造模组再分为模型组24只、水蛭素高剂量组24只、水蛭素低剂量组24只、贝那普利组24只。各组于术后第3、7、14天分批随机处死。取梗阻侧肾组织行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)分子技术,检测梗阻侧肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的分子表达变化。[结果]苏木精-伊红(HE)染色显示,与模型组相比:各用药组肾间质损伤及纤维化程度均有不同程度改善。RT-PCR显示,与模型组相比:水蛭素高剂量组各时间点及水蛭素低剂量组第7、14天ICAM-1相对表达量均明显降低(P<0.05);水蛭素高剂量组第7、14天MCP-1表达显着降低(P<0.01);水蛭素高剂量组第3天及水蛭素低剂量组各时间点MCP-1表达量明显降低(P<0.05)。Western Blot显示,与模型组相比:水蛭素高剂量组第7天ICAM-1蛋白表达量显着减少(P<0.01);水蛭素高剂量组第3、14天及水蛭素低剂量组第14天各时间点ICAM-1蛋白表达均明显降低(P<0.05);水蛭素高剂量组第14天MCP-1蛋白表达显着降低(P<0.01);水蛭素高剂量组第3、7天MCP-1蛋白表达明显降低(P<0.05)。[结论]水蛭素能不同程度地改善UUO大鼠肾间质损伤程度,延缓间质纤维化进展,其机制可能与水蛭素干预了UUO大鼠肾间质MCP-1、ICAM-1 mRNA及蛋白质的表达有关。(本文来源于《天津中医药》期刊2019年05期）
王继娟,王维华[4]（2019）在《水蛭素对高血压患者凝血功能及内皮功能影响的研究》一文中研究指出目的:探讨水蛭素对高血压患者凝血功能及内皮功能的影响。方法:随机将86例高血压患者分为治疗组42例和对照组46例。治疗组采用脉血康胶囊联合饮食运动处方,对照组采用淀粉胶囊联合饮食运动处方,连续观察4周。观察治疗0、2、4周后凝血功能及内皮功能的变化。结果:治疗2周、4周后,治疗组活化凝血活酶时间(APTT)、血浆凝血酶原时间(PT-INR)、凝血酶时间(TT)水平均较0周显着升高(P <0.05),且高于同期对照组(P <0.05)。治疗2周、4周后,对照组各项指标较0周均无显着性差异(P> 0.05)。治疗2周、4周后,治疗组内皮素(ET)水平均较0周显着降低(P <0.05),NO水平较0周显着升高(P <0.05);且ET水平低于同期对照组(P <0.05),NO水平高于同期对照组(P <0.05)。治疗4周后,对照组ET水平均较0周显着降低(P <0.05),NO水平较0周显着升高(P <0.05)。结论:水蛭素具有抑制凝血酶活性、保护血管内皮的作用,能有效改善高血压患者的凝血功能及内皮功能。(本文来源于《新中医》期刊2019年05期）
林冠宇[5]（2019）在《天然水蛭素对人微血管内皮细胞叁维培养模型的影响》一文中研究指出研究目的研究天然水蛭素对人微血管内皮细胞(human microva-scular vein endothelial cells,HMVECs)增殖的影响及其诱导血管再生的机制。实验方法取HMVECs接种至Matrigel基质胶培养24h,体外建立叁维培养模型,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况。然后将细胞叁维培养模型随机分为含不同浓度天然水蛭素培养组(1、4、7 ATU/ml组)以及单纯含10%FBS的DMEM培养基的培养组(对照组)。各组细胞叁维培养模型加入对应培养基后,培养24、48、72 h采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测各组细胞增殖情况;培养24 h对1、4、7 ATU/ml组行成管实验,免疫荧光染色法测定各组细胞VEGF及Notch1表达水平。实验结果细胞叁维培养观察示,HMVECs于基质胶上贴附良好,24h完全形成管腔样结构。CCK-8检测示,各时间点1、4 ATU/ml组A值均高于对照组(P<0.05),其中4 ATU/ml组最高;而7 ATU/ml组A值显着低于对照组以及1、4 ATU/ml组,(P<0.05)。细胞成管实验示,1、4 ATU/ml组成管数较对照组及7 ATU/ml组明显增多,且4 ATU/ml组多于1 ATU/ml组,比较差异有统计学意义(P<0.05);7 ATU/ml组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光染色示,与对照组比较,1、4 ATU/ml组Notch1表达量增高,7 ATU/ml组降低;其中4 ATU/ml组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。1、4、7 ATU/ml组VEGF表达量均较对照组增高,比较差异均有统计学意义(P<0.05);4 ATU/ml组高于1、7 ATU/ml组,比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论低、中浓度天然水蛭素可促进HMVECs增殖使血管再生,而高浓度天然水蛭素则对HMVECs的血管再生起抑制作用;其作用机制可能与VEGF-Notch信号通路有关。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
张景容,谢海彬,沈明霞,王海霞,高绒霞[6]（2019）在《水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织中AKT、p-AKT蛋白表达的影响》一文中研究指出目的:本文以水蛭素为研究药物,通过Western blot法测定蛋白激酶B(AKT)、p-AKT蛋白在肺中的表达,分析水蛭素对特发性肺间质纤维化(Idiopathic Pulmonary Fibrosis,IPF)的干预效果及作用机制,为水蛭素的临床运用奠定基础,并拓宽IPF的治疗途径。方法:选取SPF级Wistar大鼠180只,随机选18只为空白组(K组),剩余大鼠统一造模(气管内注射博莱霉素),选取108只造模成功大鼠,随机分为模型组(M组)、激素组(J组)、低剂量组(D组)、高剂量组(G组)、中剂量组(Z组)、中剂量联合激素组(ZJ组),每组18只,初次给药为造模后第2天,在给药的第7 d、14 d、28 d分批处死取材,检测AKT、p-AKT蛋白的表达。结果:AKT蛋白表达量:K组在各时间点AKT蛋白表达量均最低,M组在7 d、28 d含量明显高于J组(P <0.01);7 d时G组低于J组(P <0.01),14、28 d时G、ZJ组均低于J组(P <0.01);7 d、28 d时D、Z组高于J组(P <0.01)。p-AKT蛋白表达量:各时间点K组最低,M组最高;J组低于M组(P <0.01);ZJ组低于J组(P <0.01);7 d、14 d时G组低于J组(P <0.01);28 d时G组高于J组,但P> 0.05。结论:IPF发病过程中,PI3K/AKT信号通路中AKT、p-AKT蛋白表达明显升高,说明该信号通路与IPF发病过程有明显相关性;水蛭素能降低AKT、p-AKT蛋白的表达量,减缓IPF病程发展;水蛭素极有可能通过PI3K/AKT通路作用于IPF。(本文来源于《中医临床研究》期刊2019年11期）
李红,谢海彬,刘敏,沈明霞,王海霞[7]（2019）在《水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织病理变化的影响》一文中研究指出目的:探讨水蛭素对博莱霉素致特发性肺间质纤维化大鼠肺组织病理变化的影响。方法:选取180只SPF级Wistar大鼠,随机抽取18只作为K组,剩余162只气管内推注博莱霉素统一造模,建模成功后随机选取108只分为M组、J组、G组、Z组、D组、ZJ组,每组各18只,建模成功后次日开始给药,给药的第7天、14天、28天分批处死大鼠后取右肺组织行HE、Masson染色,并计算肺组织病理损伤及肺纤维化评分。结果:通过比较不同组别不同时间点肺组织病理损伤和肺纤维化评分发现:与K组比较,各组大鼠肺组织纤维化评分在第7天、14天、28天均显着增高(P <0.01);其中M组大鼠评分均最高(P <0.01),ZJ组评分均最低(P <0.01),与G组相当(P> 0.05),且显着低于J组、Z组和D组(P> 0.05),而J组明显低于Z组和D组,Z组与D组相当(P> 0.05)。结论:水蛭素能不同程度地降低大鼠肺组织炎症反应,有抗纤维化的作用;G组与ZJ组水蛭素的治疗效果相当;水蛭素治疗效果有明显的剂量依赖性,与激素联用有协同作用。(本文来源于《中医临床研究》期刊2019年07期）
张子文,王尉,刘胜男,张舒宁,张耀方[8]（2019）在《水蛭素生物学特性的研究进展》一文中研究指出水蛭素是由水蛭唾液腺分泌的一种酸性多肽,能够从一定程度上影响血液凝固和促进纤溶,是迄今为止所发现最强的凝血酶天然特异抑制剂,在治疗血栓类疾病和心血管疾病具有很好疗效,同时还有良好的抗炎、抗肿瘤作用。本文对水蛭素的结构和作用作一综述。(本文来源于《生物化工》期刊2019年01期）
李红,谢海彬,刘敏,沈明霞,王海霞[9]（2019）在《水蛭素对特发性肺间质纤维化大鼠肺组织中纤溶酶原抑制剂-1(PAI-1)mRNA及蛋白表达的干预研究》一文中研究指出目的:本研究选用天然水蛭素作为研究药物,采用RT-qPCR、Western blot方法检测IPF大鼠肺组织中PAI-1mRNA及蛋白表达,观察水蛭素干预大鼠IPF的作用,探讨其可能的作用机制,为临床运用水蛭治疗IPF提供理论依据,从而拓宽IPF的治疗途径。方法:选取180只SPF级同月龄健康的Wistar大鼠,随机数字表法抽取18只大鼠作为空白(K)组,剩余162只大鼠气管内注射博莱霉素统一造模,造模成功后随机选取108只分为模型(M)组、激素(J)组、水蛭素高剂量(G)组、水蛭素中剂量(Z)组、水蛭素低剂量(D)组、水蛭素中剂量联合激素(ZJ)组,每组18只,造模成功后第2天开始给药,分别在造模后7 d、14 d、28 d处死大鼠并收集标本,采用Western blot法检测大鼠肺组织中PAI-1的蛋白表达,RT-qPCR法检测PAI-1的基因表达。结果:不同时间点,M组大鼠肺组织PAI-1基因和蛋白表达均最强(P <0.01),而且随着时间的推移,表达强度逐渐增强,说明肺纤维化处于发展趋势,28天大鼠肺间质纤维化程度最重。各用药组进行比较发现:在7 d、14 d、28 d,ZJ组大鼠肺组织PAI-1基因和蛋白表达均最弱(P <0.01),G组次之(P <0.01),J组表达仅次于G组(P <0.01),J组表达显着低于Z组和D组(P <0.01),而Z组和D组相当(P> 0.05)。结论:本实验证明,水蛭素具有治疗大鼠肺间质纤维化的作用,通过降低PAI-1基因和蛋白表达水平从而起到治疗大鼠肺间质纤维化是其作用机理之一。同样发现,水蛭素的治疗作用有明显的剂量依赖性,而水蛭素联合激素治疗大鼠肺间质纤维化的疗效更佳。(本文来源于《中医临床研究》期刊2019年05期）
任桐,朱鹏宇,杨洪涛[10]（2019）在《水蛭素对单侧输尿管结扎大鼠肾间质纤维化的干预研究》一文中研究指出目的:观察水蛭素对单侧输尿管梗阻(Unilateral Ureteral Obstruction,UUO)大鼠肾间质纤维化的干预作用,并探索其作用机制。方法:健康雄性SD大鼠120只,随机分为假手术组(SOR组) 24只和造模组96只。造模组再分为模型组(UUO组) 24只、水蛭素高剂量组(UUO+HI组) 24只、水蛭素低剂量组(UUO+LI组) 24只、贝那普利组(UUO+LOT组) 24只。各组于术后第3天、7天、14天分批随机处死,每次8只。腹主动脉取血以检测血肌酐、血尿素。取梗阻侧肾组织行免疫组织化学技术检测E-Cadherin、FN表达情况,行Western Blot技术检测p38MAPK表达及其磷酸化情况。结果:肾功能检测显示,与UUO组相比:水蛭素低剂量组第7天、第14天,水蛭素高剂量组各时间点血肌酐水平明显降低(P<0. 05);水蛭素高剂量组第7天、第14天,水蛭素低剂量组第14天血尿素氮水平降低(P<0. 05)。免疫组化半定量分析显示,与UUO组相比:水蛭素高剂量组第7天,水蛭素低剂量组各不同时间点E-Cadherin蛋白质表达水平均显着增加(P<0. 01);水蛭素高剂量组第3天FN表达水平显着降低(P<0. 01)。West-ern Blot显示,与UUO组相比:水蛭素高剂量组、水蛭素低剂量组、贝那普利组p38MAPK蛋白质相对表达量变化均无统计学意义(P>0. 05);水蛭素高剂量组磷酸化p38MAPK蛋白质相对表达量显着降低(P<0. 01)。结论:水蛭素能够改善UUO模型大鼠肾功能损伤,抑制促纤维化指标FN的表达,并上调E-Cadherin的表达,其作用机制可能与其抑制了p38蛋白蛋白质的磷酸化有关。(本文来源于《四川中医》期刊2019年02期）
水蛭素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
心肌纤维化是众多心血管疾病,如心肌梗死、冠心病、心肌病等发展至后期的共同病理改变。如何防治心肌纤维化是当前世界医学研究的难点和热点。心肌梗死后心肌纤维化(Cardiac fibrosis after myocardial infraction,CFMI)是心肌纤维化常见的临床类型之一,其核心病理环节是CFMI的主要效应细胞心肌成纤维细胞(Cardiac fibroblasts,CFs)在氧化应激、炎症因子等促纤维化因素的诱导下,出现增殖、表型分化、迁移、分泌等生物学行为的改变,导致细胞外基质(Extracellularmatrix,ECM)大量沉积,影响心脏舒缩功能和电信号传导,出现心力衰竭、心律失常,影响CFMI患者预后。AMPK介导的Integrin β1信号通路在CFs参与的ECM过度沉积中发挥重要作用。现代中医理论认为,CFMI属于“胸痹”、“症瘕”等范畴,与血瘀证的病因病机密切相关。课题组前期研究发现,活血化瘀中药在调节AMPK代谢通路、优化心肌能量代谢的同时,下调CollagenⅠ、CollagenⅢ、骨桥蛋白、腱糖蛋白-C等ECM关键蛋白,抑制心肌梗死后心室重构和心功能异常。但是目前对于CFMI中ECM表达情况的研究局限于个别蛋白,活血化瘀中药在其中发挥的关键调节机制亦尚不明确。水蛭是祖国医学中经典的活血化瘀中药,具有破瘀血、通经络、消症瘕等确切功效,以及抗凝、抗栓、抗血小板、抗心肌纤维化等药理作用。目前含水蛭中成药和水蛭素衍生物比伐芦定在抗心肌纤维化、减少心梗面积方面获得一些证据,但缺乏对水蛭素单一成分抗CFMI的疗效和机制研究。本研究采用Label-free亚蛋白质组学技术探索CFMI主要病理产物ECM的组成特点,通过建立大鼠CFMI模型和AngⅡ诱导乳鼠CFs模型,以水蛭主要有效组分水蛭素为治疗手段,从AMPK介导的Integrinβ1及其下游FAK/PI3K/Akt、TGF-β1/Smad2/3信号通路,观察水蛭素对CFMI修复过程中关键ECM蛋白表达的影响,为中医药延缓CFMI、改善心梗患者预后提供科学依据。1文献综述分别阐述CFMI的病理机制、早期识别、临床干预,突出中医药活性成分在CFMI治疗中的潜力。对传统活血化瘀中药水蛭的基源、典籍记载、成药组方、制剂开发,以及水蛭主要活性成分水蛭素治疗心血管疾病的药理学机制进行了综述,为研究水蛭素干预CFMI的实验研究奠定理论基础。2实验研究研究一心肌梗死后纤维化心肌ECM蛋白表达谱的构建与生信分析目的:通过Label-free亚蛋白质组学技术分析大鼠CFMI组织中ECM蛋白的组成特点和差异蛋白的互作机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支建立Wistar大鼠CFMI模型,随机分为假手术组(Sham)、模型2周组(Model 2W)、模型4周组(Model 4W),每组10 只。运用Label-free亚蛋白质组学技术分析CFMI后2周、4周大鼠心肌ECM差异蛋白改变,GO分析从细胞组分、分子功能、生物过程描述ECM差异蛋白特征,KEGG分析参与ECM差异蛋白表达的调控通路,最后通过Western Blot技术对筛选出的ECM差异蛋白进行验证。结果:共筛选出243个ECM差异蛋白。与Sham 比较,Model 2W上调显着的是骨甘氨酸(Osteoglycin),Model 2W下调显着的是巢蛋白-1(Nidogen-1),Model 4W上调显着的是光蛋白聚糖(Lumican)、胶原Ⅵ型α2链(Collagen 6A2),Model 4W 下调显着的是 Nidogen-1;与 Model 2W 比较,Nidogen-1、踝蛋白-1(Talin-1)在Model4W显着下调(P<0.05)。GO分析显示,ECM差异蛋白功能显着富集在细胞外区域、细胞外基质等细胞组分,受体结合、金属离子结合、Integrin结合等分子功能,以及免疫调节、蛋白转运、膜组织、细胞间信号转导、细胞粘附等生物过程。KEGG分析显示,黏着斑激酶(FAK)、磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、Integrinβ1与ECM受体通路显着富集。Western Blot 结果显示,与 Sham 比较,Model 2W 组 Collagen 6A2、Lumican、Talin-1 表达上调,Model 4W组 Collagen 6A2、Lumican 显着升高,Nidogen-1 显着下降(P<0.05)。与 Model2W组比较,Model4W 组 Nidogen-1、Lumican、Talin-1 表达下调(P<0.05)。其中,与 Sham 比较,Model 4W 组 Collagen 6A2、Lumican 表达上调,Nidogen-1 表达下调;与 Model 2W 组比较,Model 4W组Nidogen-1、Talin-1 表达下调,Label-free 结果与 Western Blot 结果一致。结论:参与CFMI发生的ECM差异蛋白调控靶点为Collagen 6A2、Nidogen-1、Lumican、Talin-1、Osteoglycin 等,其作用机制可能涉及 FAK、PI3K/Akt、Integrinβ1等信号通路。研究二水蛭素调节ECM表达干预大鼠心梗后心肌纤维化的效应机制目的:观察水蛭素对CFMI大鼠心脏功能、血清标记物、心肌病理、分子病理的影响,探讨水蛭素干预ECM重建防治CFMI的效应机制。方法:采用结扎左冠状动脉前降支建立Wistar大鼠CFMI模型,随机分为4组:假手术组(Sham,生理盐水)、模型组(Model,生理盐水)、缬沙坦组(Valsartan,144mg·kg-1)、水蛭素组(Hirudin,270mg·kg-1),每组 20 只,每天给药 1 次,连续给药4周。心脏超声检测各组大鼠舒张末期/收缩末期的左室内径(LVD)、室间隔厚度(IVST)、左室后壁厚度(LVPWT)、左室容积(EDV/ESV)、左室射血分数(LVEF);血清学检测心肌损伤(CK-MB、cTnT)、心力衰竭(ANP、BNP)、氧化应激(Ang Ⅱ、MDA、SOD)等标记物;TTC染色、HE染色、Masson染色、天狼星红染色观察心肌梗死及纤维化病变情况;免疫组化和Western Blot技术观察ECM差异蛋白表达;Western Blot技术观察AMPK、Integrin β1、FAK、PI3K p110α PI3K p110(3、Akt、TGF-β1、Smad2/3 等信号通路蛋白表达。结果:(1)与 Sham 组比较,Model 组 IVST、LVPWT 减少,LVD、EDV、ESV增高,LVEF降低(P<0.05),提示CFMI模型建立成功。与Model组比较,Hirudin 组 IVSTs、LVPWT、LVEF 升高,LVD、EDV、ESV 降低(P<0.05)。(2)与 Model 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 CK-MB、cTnT、ANP、BNP、Ang Ⅱ、MDA水平显着下降,SOD显着升高(P<0.05)。(3)与Model组比较,Valsartan组、Hirudin组心重指数、心梗面积减少,胶原容积分数显着降低;Hirudin组血管周围胶原容积分数显着降低(P<0.05)。与Model组比较,Valsartan组、Hirudin 组 Collagen 6A2、Lumican 表达减少,Nidogen-1 表达增多(P<0.05)。(4)与 Model 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 AMPKα、FAK、PI3K p110α、Akt蛋白活性上调,Integrinβ1、TGF-β1、Smad2/3蛋白表达下调(P<0.05),PI3K p110β蛋白表达无显著变化(P>0.05)。结论:水蛭素能够改善CFMI大鼠左室扩张,提高心脏功能,减轻心肌损伤,减少心重指数、心梗面积,减轻心肌组织和血管周围胶原沉积,从而延缓CFMI进展;其机制与调节Collagen 6A2、Lumican、Nidogen-1等ECM差异蛋白代谢,调控心肌 AMPKα/Integrin β1/FAK 及其介导的下游 PI3K/Akt、TGF-β1/Smad2/3 信号通路有关。研究叁水蛭素干预Ang Ⅱ诱导乳鼠心肌成纤维细胞ECM表达的机制目的:通过Ang Ⅱ诱导乳大鼠心肌成纤维细胞(NRCFs)模型,观察水蛭素对NRCFs形态、增殖、表型分化、迁移、分泌等细胞生物学行为的影响机制。方法:分离、提取、培养NRCFs,经免疫荧光鉴定波形蛋白(+)/vWF(-)后,给予不同浓度(10-9 mol·L-1、10-8mol·L-1、10-7mol·L-1、10-6mol·L-1)AngⅡ诱导不同时间(6h、12h、24h、48 h),采用CCK-8法观察NRCFs增殖活力,确立Ang Ⅱ诱导NRCFs促纤维化模型的适宜浓度和时间。NRCFs分为4组:对照组(Control)、模替型组(Ang Ⅱ)、缬沙坦组(Valsartan)、水蛭素组(Hirudin),给予相应药物预干预30 min后加入Ang Ⅱ诱导NRCFs。采用流式细胞法观察各组NRCFs细胞周期,α-SMA法观察NRCFs表型转化,Transwell小室试验和划痕试验观察NRCFs迁移,HYP含量测定法观察NRCFs胶原蛋白分泌,免疫荧光染色技术观察ECM差异蛋白分泌情况,Western Blot技术观察AMPKα1/α2、Integrinβ1、FAK、TGF-β1、Smad2/3、Nideogen-1 蛋白表达情况。结果:(1)NRCFs培养24h后生长良好,波形蛋白(+)/vWF(-)的NRCFs比例在(98.09±1.03)%。选定 Ang Ⅱ以10-6mol·L-1刺激24h作为诱导NRCFs纤维化改变的理想模型。(2)与Ang Ⅱ组比较,Valsartan组、Hirudin组静止期G0G1期细胞百分比增多、增殖期S期细胞百分比降低,α-SMA免疫荧光染色阳性的细胞数量、穿越Transwell小室的细胞数量减少,划痕宽度延长(P<0.05)。(3)与 Ang Ⅱ 组比较,Valsartan 组、Hirudin 组 HYP 含量降低,Lumican、Collagen 6A2荧光强度下降,Hirudin组Nidogen-1、Talin-1荧光强度升高(P<0.05)。(4)与Ang Ⅱ组比较,Valsartan组、Hirudin组AMPKα1/α2、FAK表达上调,Integrin β1 表达下调,Valsartan 组 TGF-β1、Smad2/3 表达下调(P<0.05);Hirudin组 TGF-β1、Smad2/3,Valsartan 组、Hirudin 组 Nidogen-1 表达无差异(P>0.05)。结论:水蛭素能够抑制Ang Ⅱ诱导的NRCFs增殖、表型分化、迁移、分泌等细胞生物学行为的改变,其机制与调节AMPK/Integrin β1/FAK信号通路表达,进而优化NRCFs对Ang Ⅱ诱导的促纤维化因素的处理能力有关。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
水蛭素论文参考文献
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