水痘-带状疱疹病毒主要衣壳蛋白ORF40单克隆抗体的制备及初步应用

水痘-带状疱疹病毒主要衣壳蛋白ORF40单克隆抗体的制备及初步应用

论文摘要

目的:制备抗水痘-带状疱疹病毒(VZV)主要衣壳蛋白ORF40的单克隆抗体,对该蛋白在VZV感染细胞内的表达、分布以及在VZV病毒颗粒中的包含情况进行初步探究。方法:设计并合成VZV ORF40多肽片段,偶联牛血清白蛋白后免疫小鼠,制备与筛选抗VZV ORF40单克隆抗体,使用获得的抗体通过Western blot和免疫荧光法对VZV感染细胞进行检测,并通过Western blot对纯化的VZV病毒颗粒进行检测。结果:获得VZV ORF40单克隆抗体10F2,该抗体可特异性识别VZV感染细胞表达的以及VZV病毒颗粒包含的ORF40蛋白;本研究应用该抗体确定了ORF40蛋白在VZV感染细胞中的核定位,并且发现ORF40蛋白在核周有点状聚集现象,在细胞质区域偶尔也能检测到ORF40蛋白的分布。结论:本研究筛选获得抗VZV ORF40的特异性单克隆抗体,为后续开展该蛋白在VZV感染与病毒颗粒组装过程中的功能研究奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 主要试剂
  •     1.1.2 菌种与质粒
  •     1.1.3 细胞株、病毒株和实验动物
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 多肽合成与偶联
  •     1.2.2 单克隆抗体制备
  •     1.2.3 筛选杂交瘤细胞的间接ELISA检测
  •     1.2.4 VZV病毒衣壳的初步纯化
  •     1.2.5银染检测
  •     1.2.6 Western blot检测
  •     1.2.7 免疫荧光检测
  • 2 结果
  •   2.1 VZV ORF40单克隆抗体的制备与鉴定
  •   2.2 VZV感染细胞中ORF40的Western blot及免疫荧光检测
  •   2.3 VZV衣壳中ORF40蛋白的Western blot检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 蔡琳俐,王玮,付文锟,潘德全,叶江辉,朱桦,程通,夏宁邵

    关键词: 水痘带状疱疹病毒,主要衣壳蛋白,单克隆抗体

    来源: 中国免疫学杂志 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 厦门大学生命科学学院国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门大学公共卫生学院,分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室,美国罗格斯大学新泽西医学院,微生物学与分子遗传学系

    基金: 国家自然科学基金项目(81601762)资助

    分类号: R392-33

    页码: 1095-1099

    总页数: 5

    文件大小: 1351K

    下载量: 228

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