导读:本文包含了肝脏特异表达基因论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:肝脏,特异性,转录,四环,斑马,系统,亮氨酸。
肝脏特异表达基因论文文献综述
张力,刘超,周昕,谢英,刘树锋[1]（2015）在《四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立》一文中研究指出目的探索tet-on四环素诱导表达系统在斑马鱼体内应用策略与技术路线,构建四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白的转基因斑马鱼,为条件型功能基因研究及组织特异转基因斑马鱼疾病模型的建立奠定基础。方法构建肝脏特异启动子fabp10启动rt TA蛋白表达的重组质粒pfabp10-rt TA,联合p TRE-Tight-BI-Ac GFP1质粒转染He La细胞后给予doxycycline诱导,Western blot法验证;pfabp10-rt TA联合p TRE-Tight-BI-Ac GFP1质粒注射斑马鱼1-细胞期受精卵后,30μg/m L doxycycline诱导,荧光筛选稳定整合个体。结果共转染pfabp10-rt TA与p TRE-Tight-BI-Ac GFP1的He La细胞经1μg/m L浓度doxycycline诱导培养液诱导,GFP表达量显着高于不加doxycycline培养液对照组;筛选获得的稳定整合斑马鱼幼鱼,在浓度为30μg/m L doxycycline条件下,肝脏明显有绿色荧光表达,对照组幼鱼肝脏位置未有明显绿色荧光。结论 Tet-On四环素诱导表达系统可用于建立四环素调控斑马鱼肝脏特异表达外源基因;利用该技术可建立诱导肝脏表达GFP建立转基因斑马鱼品系,为建立条件型转基因斑马鱼疾病模型、探索肝脏器官发生发育等研究提供良好的模式动物工具。(本文来源于《中国实验动物学报》期刊2015年01期）
陈将飞,陈元红,靳大庆[2]（2012）在《一种斑马鱼肝脏特异表达转基因载体的制备方法》一文中研究指出目的:建立一套快速制备斑马鱼肝脏特异表达转基因载体的新方法。方法:首先利用multi-site gateway技术将斑马鱼肝脏脂肪酸结合蛋白(fabp10a)启动子片段与入门载体进行BP重组获得启动子的入门克隆pENTR-fabp10a,然后将目的基因克隆到载体pME-MCS中形成入门克隆pENTR-interest,最后通过multi-site gateway技术将pENTR-fabp10a、pENTR-interest和含有EGFP标记基因的p3E-IRES-EGFPpA质粒在Tol2转座载体pDestTol2pA2上进行定向重组即可获得斑马鱼肝脏特异性表达转基因载体pTol2-fabp10a-interest-IRES-EGFP。本研究采用红色荧光蛋白基因DsRed2作为目的基因,用上述方法构建了转基因载体pTol2-fabp10a-DsRed2-IRES-EGFP,并将其注射至单细胞期斑马鱼胚胎中进行表达分析。结果:转基因载体pTol2-fabp10a-DsRed2-IRES-EGFP在斑马鱼肝脏组织中能实现红色和绿色荧光蛋白同步特异表达。结论:利用Tol2转座系统以及multi-site gateway技术构建斑马鱼肝脏特异性表达转基因载体是一套行之有效的方法。(本文来源于《温州医学院学报》期刊2012年05期）
帅丽芳[3]（2006）在《严密型四环素调控系统的肝脏特异表达的双转基因小鼠模型的研究》一文中研究指出动物模型研究是疾病研究中的重要手段,合适的动物模型对于人类疾病的研究意义尤其重大。但是由于转基因技术是一种基因全表达或不表达的技术,基因表达常不局限在一个器官,一个组织,简单的转基因技术无法回答基因功能的细节问题。此外,转基因动物转入的外源基因常常由于某些基因表达产物使细胞或胚胎不耐受,从而妨碍了转基因动物的建立。随着转基因技术的进步,转移至细胞和动物体内的外源基因的不可调控性正逐渐被克服。条件转基因使转基因技术有了革新性的发展,其中四环素调控系统应用最广,为转基因动物转入外源基因的诱导表达开辟了一个崭新的领域。但随着时间的验证发现该系统在缺乏诱导剂的诱导下,目的基因产生较高的基础表达水平,故迫切需要建立一个严密型四环素调控系统来克服该系统的基础泄漏表达,阻断目的基因在转基因动物胚胎期就有的基础泄漏表达,有效防止其形成“免疫耐受”。本实验构建了严密型四环素调控系统的调控部分pApoE-rtTA-tTS,首先在人HepG2细胞进行表达研究,结果表明,该系统可以在真核细胞里严密有效地调控目的基因的表达。随后,我们将构建好的片段进行显微注射制作转基因小鼠,得到了二只调控部分的首建鼠。然后,我们利用携带有目的基因HCV-C的四环素调控系统的反应部分TRE-C小鼠与我们得到的调控部分的首建鼠进行交配,得到了二只双转基因小鼠,结果表明,无诱导剂存在时,加有沉默子的四环素调控系统可以有效抑制或消除目的基因的基础泄漏表达。(本文来源于《吉林大学》期刊2006-06-01）
蒋道军[4]（2002）在《人肝脏特异表达基因TCP10L的克隆和功能研究》一文中研究指出肝脏是人体多能性器官,具有解毒,物质合成,调节营养代谢平衡的功能。一些疾病如:肝癌,乙肝,肝硬化会引起肝功能的失调。这些疾病的治疗尚依靠于人们对肝功能的进一步了解。以肝癌组织中下调表达的cDNA片段为探针,我们克隆到一个957bp的cDNA,并命名为TCP10L,利用人16种组织的杂交膜对TCP10L基因的表达谱进行了检测,Northern杂交结果显示该基因只在睾丸和肝脏中表达。生物信息学分析表明TCP10L定位于人21q22.11,由5个外显子和4个内含子组成。其转录本包含一个645bp的开放阅读框,编码一条215个氨基酸的多肽。多肽的N端具有一个典型的亮氨酸拉链结构。亮氨酸拉链是转录因子的基本识别模块,因此我们用双荧光酶检测系统研究了TCP10L基因的转录活性。实验结果显示与阴性对照相比,TCP10L基因显着抑制报告基因pGAL45tkLuc在CHO,HEK293和SK-HEP-13种不同的细胞株中的表达。将TCP10L基因的ORF装到原核表达载体pET32a,并在原核系统E.coli.(BL21DE3)中进行了重组表达。纯化到的重组融合蛋白约42kD,并以其为抗原,在新西兰大白兔中制备了多克隆抗体。利用纯化的多克隆抗体,我们在人的睾丸、肝脏等组织进行了免疫组化研究。多克隆抗体在睾丸,肝脏组织有较强的杂交信号,而在其它组织中检测不到,这与TCP10L的Northern Blot结果相一致。在肝脏组织切片中,杂交信号出现在肝癌和癌旁组织的细胞中,而在结缔组织细胞中信号很弱;在睾丸组织切片中,杂交信号在生精小管中出现,并且特异的出现在初级精母细胞阶段。 通过酵母双杂技术,我们得到了可能与TCP10L基因相互作用的2个基因。一个基因为PMF1,另一个为MAD4基因,这两个基因都是转录因子。鉴于酵母双杂交存在假阳性,我们将TCP10L基因及PMF1和MAD4进行了亚细胞共定位,以进一步验证酵母双杂交的结果。TCP10L基因的表达蛋白(发红色光)与PMF1和MAD4表达蛋白(发绿色光)共同在细胞核中表达,具有较好的重迭性。但这叁个基因的表达蛋白在核内部都呈弥散分布,这为准确判定它们的共定位带来了困难。我们将进一步摸索它们共定位的条件,以获得更有说服力的照片,同时进行免疫共沉淀的研究,从另一个方面验证它们的相互作用。(本文来源于《复旦大学》期刊2002-12-09）
严俊,徐永华[5]（2002）在《小鼠肝脏特异表达基因MFREP-1的克隆与鉴定》一文中研究指出肝脏特异表达的蛋白HFREP-1/LFIRE-I(Human Fibrinogen-RelatedProtein-I/Live Fibrinogen-Related Protein=1)属于一个有着多种不同生物学活性的纤维蛋白原超家族的成员,但是至今HFREP-1/LFIRE-1蛋白在肝脏中的功能仍然知之甚少。鉴于此,我们克隆了它的小鼠同源基因—一MFREP-1(Mouse Fibrinogen-Related Protein-1)。该基因编码一个314个氨基酸的蛋白,与HFREP-1/LFIRE-1蛋白有80.4%的同源性。Northern blot杂交分析显示在检测的16例多组织样品中,惟有肝脏中检测到1.2kb的MFREP-1 mRNA。为了进一步解析MFREP-1基因的功能,我们检验了MFREP-1 mRNA在70%部分肝切除的肝再生模型中表达量的改变情况。MFREP-1 mRNA在再生的肝脏中表达上升,第一个肩峰出现在部分切除2-4小时。Cycloheximide的预处理能够抑制MFREP-1的表达上升,提示了该基因在肝再生过程中表达量的上调需要蛋白重新合成。MFREP-1 mRNA在部分切除6小时后继续上升,并且在24小时达到第二个尖峰。增强的MFREP-1表达量持续到部分切除72小时,随后缓慢地下降至最初表达基线,免疫组织化学的分析验证了MFREP-1蛋白在肝脏实质细胞中的表达量上升。上述的实验数据提示了MFREP-1蛋白可能在肝再生过程中扮演了一个非常重要的角色,可能参与了细胞的生长调节。(本文来源于《中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编》期刊2002-12-01）
肝脏特异表达基因论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:建立一套快速制备斑马鱼肝脏特异表达转基因载体的新方法。方法:首先利用multi-site gateway技术将斑马鱼肝脏脂肪酸结合蛋白(fabp10a)启动子片段与入门载体进行BP重组获得启动子的入门克隆pENTR-fabp10a,然后将目的基因克隆到载体pME-MCS中形成入门克隆pENTR-interest,最后通过multi-site gateway技术将pENTR-fabp10a、pENTR-interest和含有EGFP标记基因的p3E-IRES-EGFPpA质粒在Tol2转座载体pDestTol2pA2上进行定向重组即可获得斑马鱼肝脏特异性表达转基因载体pTol2-fabp10a-interest-IRES-EGFP。本研究采用红色荧光蛋白基因DsRed2作为目的基因,用上述方法构建了转基因载体pTol2-fabp10a-DsRed2-IRES-EGFP,并将其注射至单细胞期斑马鱼胚胎中进行表达分析。结果:转基因载体pTol2-fabp10a-DsRed2-IRES-EGFP在斑马鱼肝脏组织中能实现红色和绿色荧光蛋白同步特异表达。结论:利用Tol2转座系统以及multi-site gateway技术构建斑马鱼肝脏特异性表达转基因载体是一套行之有效的方法。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
肝脏特异表达基因论文参考文献
[1].张力,刘超,周昕,谢英,刘树锋.四环素诱导肝脏特异表达绿色荧光蛋白转基因斑马鱼模型建立[J].中国实验动物学报.2015
[2].陈将飞,陈元红,靳大庆.一种斑马鱼肝脏特异表达转基因载体的制备方法[J].温州医学院学报.2012
[3].帅丽芳.严密型四环素调控系统的肝脏特异表达的双转基因小鼠模型的研究[D].吉林大学.2006
[4].蒋道军.人肝脏特异表达基因TCP10L的克隆和功能研究[D].复旦大学.2002
[5].严俊,徐永华.小鼠肝脏特异表达基因MFREP-1的克隆与鉴定[C].中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编.2002
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