立体选择性酯酶的基因挖掘、生物信息学分析及其功能验证

立体选择性酯酶的基因挖掘、生物信息学分析及其功能验证

论文摘要

从基因数据库中挖掘具有优良性能的酶蛋白已成为酶筛选的一个新方向。以选择性水解R-CNDE为目标反应,以能选择性水解R-CNDE的酯酶EstZF172的氨基酸序列信息在GenBank数据库中进行基因挖掘,筛选出同源性为90%、来源于荧光假单胞菌的酯酶PFE。根据PFE的氨基酸序列,对其进行生物信息学分析。合成PFE的基因序列并连接到表达载体pET-28b,转化E. coli BL21(DE3),成功构建PFE的工程菌。对PFE功能验证发现其对CNDE表现出良好的立体选择性,能选择性水解R-CNDE。最终获得了具有应用潜力、选择性水解R-CNDE的新酶,为其后续的应用奠定基础。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 试剂
  •     1.1.2 菌种和质粒
  •     1.1.3 培养基
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 GenBank数据库中基因挖掘
  •     1.2.2 生物信息学分析
  •     1.2.3 基因与异源表达
  •     1.2.4 功能验证
  • 2 结果与分析
  •   2.1 挖掘
  •   2.2 生物信息学分析
  •   2.3 诱导表达
  •   2.4 选择性水解
  • 3 结语
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 黎小军,张仪靖,韩美子

    关键词: 基因挖掘,立体选择性,酯酶,表达

    来源: 新余学院学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 社会科学Ⅱ辑,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 新余学院护理与康复学院

    基金: 江西省教育厅科技项目“立体选择性酶基因挖掘及其应用”(GJJ151211)

    分类号: Q55

    页码: 13-16

    总页数: 4

    文件大小: 707K

    下载量: 102

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