基于无机载体的先交联后吸附固定化脂肪酶的方法

论文摘要

目的:使用双功能环氧交联剂新戊二醇二缩水甘油醚和硅藻土载体固定化海洋脂肪酶,并探究固定化酶的酶学性质.方法:采用先交联后吸附的方法固定化海洋脂肪酶,交联和吸附分别进行单因素与正交实验结合的实验方案,并测定固定化酶的酶活力.结果:确定最佳交联条件:pH 5.5,温度35℃,交联剂质量分数0.5%,交联时间2 h;最佳吸附条件:温度40℃,载体质量1.5 g,吸附时间5 h.在此工艺条件下,所制备的固定化脂肪酶活力为1.89μkat,酶活力回收率72.89%.与游离的脂肪酶相比,所制备的固定化脂肪酶具有更好的温度、pH、储存及操作稳定性.结论:基于环氧交联剂新戊二醇二缩水甘油醚和硅藻土载体,进行先交联后吸附固定化海洋脂肪酶的技术具有良好的工业应用前景.

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.2 实验方法

1.2.1 脂肪酶活力的测定

1.2.2 固定化酶活力回收率[20-23]

1.3 脂肪酶交联实验方法

1.3.1 交联剂的筛选

1.3.2 交联剂质量分数优化

1.3.3 交联pH优化

1.3.4 交联温度优化

1.3.5 交联时间优化

1.3.6 交联正交实验

1.4 脂肪酶吸附实验方法

1.4.1 吸附温度优化

1.4.2 吸附载体量优化

1.4.3 吸附时间优化

1.4.4 吸附正交实验

1.5 固定化酶的酶学性质鉴定

1.5.1 最适反应温度

1.5.2 最适反应pH

1.5.3 热耐受性

1.5.4 pH耐受性

1.5.5 储存稳定性

1.5.6 操作稳定性

2 结果与分析

2.1 固定化条件对交联效果的影响

2.1.1 交联剂的筛选

2.1.2 交联剂质量分数优化

2.1.3 pH对交联固定化的影响

2.1.4 温度对交联固定化的影响

2.1.5 时间对交联固定化的影响

2.1.6 交联正交实验结果

2.2 脂肪酶吸附实验

2.2.1 温度对吸附固定化的影响

2.2.2 载体质量对吸附固定化的影响

2.2.3 时间对吸附固定化的影响

2.2.4 吸附正交实验

2.3 酶学性质鉴定

2.3.1 最适反应温度

2.3.2 最适反应pH

2.3.3 热耐受性

2.3.4 pH耐受性

2.3.5 储存稳定性

2.3.6 操作稳定性

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 林海蛟,张云,孙爱君,黄锦煜,胡云峰

关键词: 硅藻土,交联,吸附,脂肪酶,固定化

来源: 暨南大学学报(自然科学与医学版) 2019年03期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 中国科学院南海海洋研究所∥中国科学院热带海洋生物资源与生态重点实验室,中国科学院大学,南方医科大学口腔医院

基金: 中国科学院战略性先导科技专项项目(XDA11030404),中国科学院“科学”号高端用户项目(KEXUE2018G05),广东省自然科学基金项目(2018A030313151),广东省海洋渔业科技攻关与研发方向项目(A201701C12)

分类号: Q814.2

页码: 195-205

总页数: 11

文件大小: 1269K

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