饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的数字PCR测定法

饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的数字PCR测定法

论文摘要

目的建立饮用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫的数字PCR定量检测方法。方法过滤水样,收集贾第鞭毛虫和隐孢子虫,提取DNA,分别选择β-Giardin和18S r RNA基因作为靶基因,设计合成特异性引物与探针,使用数字PCR技术进行检测,计算两种靶基因的浓度,进而对贾第鞭毛虫和隐孢子虫个数进行定量。结果数字PCR法的检出限为0.02~0.03个/L,加标回收率>20%,RSD为12.81%~15.35%。结论该方法具有较高的灵敏度和特异性,可应用于饮用水中极少数量贾第鞭毛虫和隐孢子虫的测定。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 标准菌株、仪器与试剂
  •   1.2 DNA样品制备
  •     1.2.1 标准样品的测定
  •     1.2.2 DNA提取和纯化
  •   1.3 PCR测定
  •     1.3.1 PCR引物与探针
  •     1.3.2 qPCR扩增
  •     1.3.3 数字PCR扩增
  •   1.4 贾第鞭毛虫和隐孢子虫个数的数字PCR法测定
  •   1.5 方法的特异性、检出限及准确性
  •   1.6 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 qPCR标准曲线建立及检出限
  •   2.2 数字PCR检测结果测定
  •   2.3 方法的特异性、检出限及准确性
  •     2.3.1 方法特异性结果
  •     2.3.2 方法检出限结果
  •     2.3.3 方法准确性结果
  •   2.4 实际水样检测结果
  • 3 小结
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李罗英,李红岩,于志勇,李洁,张艳芬

    关键词: 数字技术,贾第鞭毛虫,隐孢子虫,饮用水

    来源: 环境与健康杂志 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 环境科学与资源利用,预防医学与卫生学

    单位: 中国科学院生态环境研究中心中国科学院饮用水科学与技术重点实验室

    基金: 国家住建部水体污染控制与治理科技重大专项(2014ZX07402001)

    分类号: R123.1

    DOI: 10.16241/j.cnki.1001-5914.2019.05.014

    页码: 436-439

    总页数: 4

    文件大小: 236K

    下载量: 144

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