导读:本文包含了单管巢式论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:瘟病,病毒,肝炎,基因,细胞体,麻风,特异性。
单管巢式论文文献综述
闫伟,李葱葱,夏蔚,邵改革,李飞武[1]（2016）在《应用单管巢式和半巢式PCR检测转基因玉米MON89034》一文中研究指出根据MON89034玉米的5’端和3’端边界序列分别设计1组转化体特异性的巢式PCR引物,采用中途进退式PCR策略建立MON89034玉米的转化体特异性检测方法,扩增产物分别为491 bp和188 bp。以转基因玉米MON89034及8种其他转基因作物为材料,证明此方法对MON89034玉米具有高度特异性。灵敏度测试结果表明,此方法的相对检出限达到0.01%,绝对检出限为4个单倍体基因组拷贝数,比普通PCR提高了5倍。建立的单管巢式和半巢式PCR方法可准确、高效地检测转基因玉米MON89034及其产品。(本文来源于《玉米科学》期刊2016年04期）
覃晓琳,黄进梅,薛耀华,曾维英,吴兴中[2]（2014）在《单管巢式实时PCR检测麻风杆菌方法的建立及初步应用》一文中研究指出目的:明确单管巢式实时PCR检测麻风杆菌的特异性、灵敏性和重复性。方法:以麻风杆菌hsp18基因为靶基因设计引物和探针,建立单管巢式实时PCR方法检测麻风杆菌并与抗酸染色及普通PCR进行特异性和灵敏性的比较。结果:单管巢式实时PCR检测下限为2.1fg质粒DNA,普通PCR为21fg质粒DNA,敏感性高10倍;与8种非麻风杆菌无交叉反应;批内相对标准偏差(RSD)为0.24%~1.08%,批间RSD为0.09%~2.8%。对比检测54例麻风疑似标本中,抗酸染色、普通PCR和单管巢式实时PCR的敏感性分别为81.3%(26/32)、87.5%(28/32)和96.9%(31/32)。结论:单管巢式实时PCR特异性强、敏感性高且重复性好。(本文来源于《中国麻风皮肤病杂志》期刊2014年10期）
阚松鹤[3]（2014）在《弓形虫单管巢式PCR检测方法的建立及奶山羊弓形虫ITS1与529bp基因序列分析》一文中研究指出弓形虫病是由刚地弓形虫（Toxoplasma gondii）感染引起的疾病，可感染几乎所有的恒温动物，是最流行的寄生原虫之一。引起山羊胎儿死亡的重要原因之一就是刚地弓形虫这种寄生原虫。卵囊是由初次感染的猫产生的，这一寄生虫阶段与弓形虫传播感染有很大关系。妊娠期山羊初次感染弓形虫可发生胎盘和胎儿感染，从而导致胎儿死亡和重吸收，流产或死胎。因此，及时、准确的诊断弓形虫病是很有必要的。病原学检测方法耗时长，敏感性低；而血清学检测结果易出现假阴性或假阳性；分子生物学诊断中，常规PCR敏感性较低，而巢式PCR敏感性、特异性都较高，但与常规PCR方法相比操作繁琐且更易污染。为了尽量避免污染、简化试验步骤，本研究基于529bp重复序列，建立一套单管巢式PCR检测弓形虫的方法，并应用于奶山羊血液样品中弓形虫的检测。其结果如下：弓形虫RH虫株DNA（阳性对照）PCR扩增有216bp大小条带且无杂带，以阿米巴原虫、微小隐孢子虫、蓝氏贾第虫DNA为模板及阴性对照无条带。用连续倍比稀释的弓形虫RH虫株DNA为模板进行扩增，最低可检测到1fg的DNA。应用单管巢式PCR检测奶山羊血液DNA样品137份，其中有38份为阳性。通过ITS1和529bp重复序列对奶山羊感染的弓形虫进行序列分析，发现样品序列与弓形虫RH虫株遗传距离最近。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2014-05-01）
唐彦[4]（2013）在《单管巢式PCR结合测序技术检测HBV YMDD突变》一文中研究指出目的为了进一步提高HBV低载量标本YMDD突变检测灵敏度,建立一种快速检测方法。方法分别采用单管巢式PCR、双管巢式PCR和单管PCR对临床选择的35例标本进行PCR扩增,然后进行Sanger测序验证,对几种方法进行比较。结果实验结果显示,单管巢式PCR和双管巢式PCR的吻合度一致,阳性率均为[91.4%(32/35)],而单管PCR的阳性率[54.3%(19/35)]显着低于单管巢式PCR和双管巢式PCR,差异有统计学意义(P<0.05)。结论单管巢式PCR不仅能够显着提高HBV YMDD突变检测灵敏度,而且相比于双管巢式PCR,具有显着降低污染、缩短实验时间的优点,为一种高效、安全的检测方法。(本文来源于《国际检验医学杂志》期刊2013年11期）
姚芹,宋浩,陈枫[5]（2013）在《食用精炼大豆油DNA提取及单管巢式PCR检测》一文中研究指出设计了针对转基因Roundup Ready大豆外源基因扩增的内外2对引物,分别位于CaMV35s启动子,CTP基因,CP4EPSPS基因区域,并成功对精炼大豆油中的外源基因进行单管巢式PCR检测。结果表明,用改良试剂盒法和冷冻干燥法提取大豆油中的DNA均可以满足单管巢式PCR检测要求;单管巢式PCR扩增对内外引物的Tm值有特殊要求,外引物的退火温度高于内引物。本实验建立的精炼大豆油转基因成分的单管巢式PCR检测方法特异性强,灵敏度高且快速方便。(本文来源于《食品工业科技》期刊2013年21期）
郑秀红,贾立军,邢莹,张守发[6]（2011）在《猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法的建立及应用》一文中研究指出根据GenBank上发表的猪附红细胞体16S rRNA基因序列(登录号U88565)设计合成2对引物,建立了猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法,经酶切分析、单管巢式PCR进一步鉴定后进行序列测定,并与血涂片染色镜检、常规PCR进行了比较。结果:扩增的猪附红细胞体基因序列与GenBank中发表的猪附红细胞体基因序列(U88565)同源性为96%;特异性试验表明,设计的引物不能扩增弓形虫、链球菌、大肠杆菌、葡萄球菌及羊附红细胞体等病原体;敏感性试验表明,单管巢式PCR诊断方法最低能够检测出0.116 fg的标准模板DNA。通过对75份血液样本的检测表明,建立的单管巢式PCR方法明显优于血涂片染色镜检法及常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性。本试验建立的单管巢式PCR诊断方法具有特异、敏感、实用等优点,为猪附红细胞体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2011年02期）
李淑华,方美玉,刘世建,常文军,王珊珊[7]（2010）在《应用单管巢式多重PCR技术检测登革病毒及分型》一文中研究指出目的建立一种单管巢式多重RT-PCR方法,以用于临床对于不同型别登革病毒混合感染的检测并分型。方法将1~4型登革病毒RNA混合,首先用1~4型病毒通用外引物进行一步法RT-PCR,然后以混合病毒RT-PCR产物为模板,在同一反应管内同时加入4对(5条)型特异性引物进行巢式多重PCR,结果用EB染色的3%琼脂糖凝胶电泳观察;并将其检测敏感性和特异性与该方法的单一病毒模板RNA扩增进行比较。结果经反应条件的优化,混合病毒模板单管巢式多重PCR可以在同一反应管内同时扩增出4条病毒特异性目的条带,分别为482、119、290、389 bp。其敏感性和特异性与单一病毒RNA的扩增相当,对模板RNA检测的敏感性可以达到66.068 copies/μl。结论该方法简便、快速、敏感、特异,可以根据扩增目的片段的大小进行诊断和分型,对于临床登革病毒混合感染病例的诊断和快速分型有应用价值。(本文来源于《第二军医大学学报》期刊2010年02期）
王暖成,鲁承,杜鑫,王中光,杜秋明[8]（2009）在《小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用》一文中研究指出小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性。高度接触性和败血性传染病,给养鹅业造成了严重危害.该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断,但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术。病原学检查和血清学方法均存在不够敏感、检测所需时间长等不足,不能满足临床快速诊断小鹅瘟的需要.而PCR技术具有敏感性高、特异性强等优点,能够较好满足临床快速准确诊断疾病的需要.本试验根据GenBank发表的小鹅瘟病毒B株全基因序列,针对VP3基因保守区,设计了两对扩增主要结构蛋白VP3基因的特异性引物,对小鹅瘟病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增,建立了小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法,扩增出了与预期片段大小相符的长度为406bp的基因片段.特异性试验表明,只有小鹅瘟病毒模板能扩增出特异性条带.敏感性试验表明,当病料中小鹅瘟病毒核酸含量为0.02175fg/μL时,仍可以检测到,出现清晰的特异性片段.应用小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法对延边地区疑似小鹅瘟病死雏鹅80只进行了检测,有典型病理变化的20只病死雏鹅,阳性检出率均为100%(20/20),无典型病理变化的60只病死雏鹅,阳性检出率为93.3%(56/60).由此可见。本实验建立的小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法具有极高的敏感性和特异性且检出率极高,可作为一种有效的临床诊断方法。(本文来源于《中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十叁次学术研讨会论文集（下册）》期刊2009-09-01）
杜鑫[9]（2008）在《小鹅瘟病毒延边分离株VP3基因克隆及单管巢式PCR诊断方法的建立》一文中研究指出小鹅瘟是由小鹅瘟病毒引起的主要侵害4-20日龄雏鹅和雏番鸭的一种急性或亚急性、高度接触性和败血性传染病,给养鹅业造成了严重危害。该病可从临床症状及流行病学特点作出初步诊断,但确诊需借助病原学检查、血清学方法和分子生物学技术。病原学检查和血清学方法均存在不够敏感、检测所需时间长等不足,不能满足临床快速诊断小鹅瘟的需要。而PCR技术具有敏感性高、特异性强等优点,能够较好满足临床快速准确诊断疾病的需要。本试验根据GenBank发表的小鹅瘟病毒B株全基因序列,针对VP3基因保守区,设计了一对扩增主要结构蛋白VP3基因的特异性引物,对小鹅瘟病毒延边分离株基因组DNA进行了PCR扩增,得到了与预期大小一致的VP3完整基因片段,将其回收纯化后与pGEM-T Easy载体连接;然后转化至大肠杆菌感受态细胞JM109中进行克隆,经酶切分析、PCR鉴定及序列分析,验证了所克隆的基因是小鹅瘟病毒VP3基因。同时,建立了小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法,扩增出了与预期片段大小相符的长度为406bp的基因片段。特异性试验表明,只有小鹅瘟病毒模板能扩增出特异性条带。敏感性试验表明,当病料中小鹅瘟病毒核酸含量为0.02175fg/μL时,仍可以检测到,出现清晰的特异性片段,比小鹅瘟病毒常规PCR诊断方法敏感性高100倍。应用小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法和小鹅瘟病毒常规PCR诊断方法分别对延边地区疑似小鹅瘟病死雏鹅80只进行了检测,有典型病理变化的20只病死雏鹅,阳性检出率均为100%(20/20),无典型病理变化的60只病死雏鹅,小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法阳性检出率为93.3%(56/60),而小鹅瘟病毒常规PCR诊断方法阳性检出率为80%(48/60)。由此可见,所建立的小鹅瘟病毒单管巢式PCR诊断方法较常规PCR诊断方法特异性和敏感性更强,可避免常规PCR诊断方法检测时造成的假阴性结果,为临床更快速准确诊断小鹅瘟提供一种有效的诊断手段。(本文来源于《延边大学》期刊2008-06-03）
杨建荣,戴利亚,陈占国[10]（2007）在《单管巢式PCR结合熔解曲线分析检测乙肝病毒YMDD变异》一文中研究指出目的:在建立针对乙肝病毒(HBV)聚合酶基因的单管巢式PCR方法的基础上,结合熔解曲线分析,提高HBVYMDD变异检测的灵敏度。方法:针对HBV聚合酶基因段设计两对熔解温度(Tm)差异较大的内、外引物,在一个封闭反应体系中进行二次扩增并结合熔解曲线分析法检测HBVYMDD变异。结果分别与单纯PCR结合熔解曲线分析和测序法进行比较,并对107例未经拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎(CHB)患者血清HBVYMDD的自发变异进行分析。结果:建立在单管巢式PCR方法上的熔解曲线分析检测HBVYMDD变异灵敏度要高于单纯PCR结合熔解曲线分析的方法(P<0.001),与直接测序法的符合率为81.3%。在114例CHB标本中YMDD及其变异检出率为95.6%。用本方法在107例未经拉米夫定治疗的CHB病人中YMDD自发变异检出率为31.8%。结论:单管巢式PCR结合熔解曲线分析法提高了YMDD变异检测的灵敏度,而且是一种简便、特异性较好的方法。(本文来源于《实用医学杂志》期刊2007年02期）
单管巢式论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:明确单管巢式实时PCR检测麻风杆菌的特异性、灵敏性和重复性。方法:以麻风杆菌hsp18基因为靶基因设计引物和探针,建立单管巢式实时PCR方法检测麻风杆菌并与抗酸染色及普通PCR进行特异性和灵敏性的比较。结果:单管巢式实时PCR检测下限为2.1fg质粒DNA,普通PCR为21fg质粒DNA,敏感性高10倍;与8种非麻风杆菌无交叉反应;批内相对标准偏差(RSD)为0.24%~1.08%,批间RSD为0.09%~2.8%。对比检测54例麻风疑似标本中,抗酸染色、普通PCR和单管巢式实时PCR的敏感性分别为81.3%(26/32)、87.5%(28/32)和96.9%(31/32)。结论:单管巢式实时PCR特异性强、敏感性高且重复性好。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
单管巢式论文参考文献
[1].闫伟,李葱葱,夏蔚,邵改革,李飞武.应用单管巢式和半巢式PCR检测转基因玉米MON89034[J].玉米科学.2016
[2].覃晓琳,黄进梅,薛耀华,曾维英,吴兴中.单管巢式实时PCR检测麻风杆菌方法的建立及初步应用[J].中国麻风皮肤病杂志.2014
[3].阚松鹤.弓形虫单管巢式PCR检测方法的建立及奶山羊弓形虫ITS1与529bp基因序列分析[D].西北农林科技大学.2014
[4].唐彦.单管巢式PCR结合测序技术检测HBVYMDD突变[J].国际检验医学杂志.2013
[5].姚芹,宋浩,陈枫.食用精炼大豆油DNA提取及单管巢式PCR检测[J].食品工业科技.2013
[6].郑秀红,贾立军,邢莹,张守发.猪附红细胞体单管巢式PCR诊断方法的建立及应用[J].中国兽医学报.2011
[7].李淑华,方美玉,刘世建,常文军,王珊珊.应用单管巢式多重PCR技术检测登革病毒及分型[J].第二军医大学学报.2010
[8].王暖成,鲁承,杜鑫,王中光,杜秋明.小鹅瘟单管巢式PCR诊断方法的建立及初步应用[C].中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第七届全国会员代表大会暨第十叁次学术研讨会论文集（下册）.2009
[9].杜鑫.小鹅瘟病毒延边分离株VP3基因克隆及单管巢式PCR诊断方法的建立[D].延边大学.2008
[10].杨建荣,戴利亚,陈占国.单管巢式PCR结合熔解曲线分析检测乙肝病毒YMDD变异[J].实用医学杂志.2007
论文知识图
