247株猪源沙门菌对四环素类药物耐药性和耐药基因的检测分析

247株猪源沙门菌对四环素类药物耐药性和耐药基因的检测分析

论文摘要

为探究猪源沙门菌分离株对四环素类抗菌药物耐药性及四环素耐药基因(tet)的流行与分布情况,从7省的合作猪场采集病死猪肝脏、肺脏、肠道作细菌分离,利用沙门菌属特异性侵袭基因(invA)和16S rDNA扩增、测序等方法进行鉴定,并用微量肉汤稀释法测定沙门菌分离株对四环素类抗菌药物的敏感性,PCR方法测定tet基因,以及ERIC-PCR方法分析猪源沙门菌之间的相关性和遗传关系。从823份病料中分离鉴定出247株猪源沙门菌,分离率为30.01%。药敏结果显示,对多西环素、土霉素的耐药率分别为87.45%和94.74%。PCR检测发现,分别有62,66,3株单独携带tetA、tetB、tetC基因;分别有38,8,4,7,1株菌同时携带两种不同的tet基因(tetA+B、tetA+C、tetA+D、tetB+C、tetC+D);分别有9,6,1,6,1,4,3株菌同时携带3种不同的tet基因(tetA+B+C、tetA+B+D、tetA+B+M、tetA+C+D、tetA+D+M、tetB+C+D、tetB+C+M);分别有6,2株菌同时携带4种不同的tet基因(tetA+B+C+D、tetA+C+D+M);没有检测到单独携带tetD、tetM以及同时携带5种tet基因的菌株。接合试验表明,tetM可与tetA或tetC共同在沙门菌与大肠杆菌间转移,导致菌株多西环素抗性水平转移。试验菌共分为A~δ共30个ERIC型,tet基因分布于不同ERIC型菌株中,表明其在试验菌株间水平扩散。本试验首次在猪源沙门菌中发现了编码核糖体保护蛋白的四环素类耐药基因tetM。猪源沙门菌对四环素类药物耐药严重,对多西环素、土霉素具有普遍耐药性,tetA、tetB基因在7省猪源沙门菌中流行最广泛,分离菌对四环素类药物的普遍耐药性与单个或多个tet基因的普遍存在密切相关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 菌株来源
  •   1.2 药物及培养基
  •   1.3 细菌的分离与鉴定
  •   1.4 药敏试验
  •   1.5 tet基因检测
  •     1.5.1 提取基因组
  •     1.5.2 tet基因的PCR及测序
  •     1.5.3 ERIC-PCR分型
  •   1.6 接合试验
  • 2 结果
  •   2.1 细菌的分离与鉴定
  •   2.2 药敏试验
  •   2.3 tet基因检测结果
  •   2.4 ERIC分型结果
  •   2.5 接合试验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李帆,魏单单,刘建华,吴宁鹏,贺丹丹,潘玉善,苑丽,胡功政

    关键词: 沙门菌,四环素类药物,耐药性,四环素耐药基因

    来源: 中国兽医学报 2019年10期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 河南农业大学牧医工程学院,河南省兽药饲料监察所

    基金: 十三五国家重点研发计划资助项目(2016YFD0501304)

    分类号: S852.61

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.10.08

    页码: 1927-1933

    总页数: 7

    文件大小: 409K

    下载量: 195

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