导读:本文包含了胚胎内细胞团论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:囊胚,胚胎,细胞,干细胞,免疫,小鼠,细胞系。
胚胎内细胞团论文文献综述
孙嘉博[1](2018)在《囊胚孵化位点与内细胞团相对位置对小鼠胚胎着床和发育的影响》一文中研究指出在我国约有10%-15%的育龄妇女不孕,全球多达六分之一的夫妻会遇到生育问题。多数夫妻选择通过辅助生殖技术(Assited Reproductive Technology,ART)来孕育后代。囊胚的挑选和胚胎移植是ART中关键的环节。哺乳动物的胚胎在囊胚时期会形成两种不同的细胞类型:内细胞团(Inner Cell Mass,ICM)和滋养层(Trophectoderm,TE)。处于囊胚时期的胚胎,需要先从透明带(Zona Pellucida,ZP)中孵化出来,才有植入子宫的能力。ZP是一层包裹在哺乳动物卵母细胞和着床前胚胎外的一层非细胞性糖蛋白,具有识别精子、阻止多精受精和保护卵母细胞及孵化前胚胎的作用。囊胚在孵化前会持续性的扩张,ZP变薄并产生小孔,这类小孔被称为孵化位点。胚胎从孵化位点中孵出后会继续完成着床和妊娠过程。孵化过程对于后续胚胎的继续发育至关重要,但是相关的研究却少有报道。孵化位点在透明带上的位置是随机出现还是有着一定规律,孵化位点的位置对于小鼠胚胎后续着床、妊娠以及对子代是否有影响还有待考究。本研究中我们测量了囊胚孵化位点与内细胞团圆弧中点切线夹角θ的角度,并分为叁组:0o≤θ≤30o组,30o<θ≤60o和60o<θ≤90o组。实验采用非手术胚胎移植(Nonsurgical Embryo Transfer,NSET)的方法,在不进行麻醉与外科手术的情况下,将叁组不同孵化角度范围的囊胚通过宫颈直接移入代孕母鼠的子宫内。统计胚胎着床率、妊娠率、产仔率以及后代的生长情况。我们的实验结果表明:囊胚孵化的位置并不影响胚胎的着床率和着床数。但是,囊胚孵化位点的不同会影响到子代小鼠的出生率。对后代进行统计分析,我们发现不同孵化位点囊胚对后代的性别比例和出生重无影响,对雄性后代的生长曲线也无影响,但是对雌性后代的生长曲线却有着影响。我们的实验结果可为临床上挑选发育潜力更高的囊胚提供参考。(本文来源于《内蒙古大学》期刊2018-06-05)
刘世超[2](2015)在《猪早期胚胎发育及滋养层和内细胞团分化机理的相关研究》一文中研究指出哺乳动物第一次胚层分化发生在囊胚腔形成过程中。囊胚形成前,胚胎由一个全能的受精卵分裂形成多个发育潜力几乎相同的卵裂球。随后胚胎的形态会发生显着改变,形成一个空腔,同时卵裂球也会分化形成外层的滋养层细胞(Trophectoderm,TE)和内部的内细胞团细胞(Inner cell mass,ICM)。这两种细胞进一步的发育走向不同,滋养层会成为胎盘部分,而内细胞团成为胎体和少部分胎盘组织。尽管小鼠中TE与ICM分化的进程和分子机理已经得到清晰的阐述,但在其他哺乳动物中却知之甚少。最近一些研究结果表明,猪中TE与ICM分化的相关事件与小鼠中存在差异,这说明小鼠TE与ICM的分化模式并不能代表所有哺乳动物。在小鼠中TE与ICM的分化依赖于转录因子CDX2与OCT4的相互抑制作用。CDX2最初在小鼠桑椹胚部分卵裂求中开始表达,并逐渐在部分外部细胞中富集,最终在囊胚TE中特异性表达。与此相反,OCT4在所有小鼠早期所有卵裂球中均表达,直至囊胚期,OCT4逐渐向ICM中富集,并最终在ICM中特异性表达。在TE细胞中,OCT4直接受到CDX2转录水平的抑制,而ICM中由于没有CDX2的表达,OCT4可以正常表达。有报道表明,小鼠中CDX2受到YAP-TEAD转录共激活因子的调控,而YAP的活性受到其上游信号通路Hippo和ROCK的调控。而猪中的相关研究结果表明,虽然CDX2在TE细胞中特异性表达,但是OCT4即使在晚期孵化囊胚中还仍然在TE和ICM中广泛表达。这两个因子如此长时间的共表达于TE细胞说明CDX2不能够高效的抑制OCT4的表达,OCT4也不是一个对于滋养层分化反映敏感的转录因子。这说明在猪中TE与ICM分化的分子基础可能与小鼠不同。更为重要的是,目前猪TE与ICM分化的进程没有得到清晰的阐述,滋养层与内细胞团特异性因子也不清楚。这些基础信息的未知极大阻碍了进一步研究猪滋养层与内细胞团分化的分子机理。为此,我们首先对猪滋养层和内细胞团标记因子进行了筛选,通过免疫荧光追踪CDX2在猪体内和体外胚胎中的表达模式发现虽然CDX2在猪滋养层细胞中特异性表达,但是CDX2在猪囊胚期才开始表达,这在发育时程上晚于小鼠(桑椹胚期开始表达),说明滋养层分化的调控机理或者关键事件在猪与小鼠中可能不同。之后我们通过免疫荧光的方法筛选了在猪内细胞团中特异性表达的因子,结果发现,SOX2特异性的在猪胚胎部分、内细胞团和上胚层中表达,并且与CDX2呈现互斥的表达模式,这些结果说明SOX2是猪早期胚胎多潜能特异标记因子。根据这些因子的表达,与小鼠已有资料对比,我们总结了猪早期胚胎发育过程中的多个转录因子表达时程,首次系统的揭示了猪特有的滋养层与内细胞团分化的分子基础和特有的胚层分化进程。已有报道显示FBS可以促进猪体外囊胚孵化,提高体外囊胚细胞数,但FBS是成分不明确的混合物质,且以往由于没有明确的分子标记可以反应猪ICM和TE细胞,无法准确FBS对猪胚胎发育的影响。这不但大大限制了FBS在猪体外培养过程的应用,也限制了猪体外培养优化相关研究工作的进展。而本文在揭示了猪滋养层与内细胞团分化分子基础之后利用CDX2和SOX2分别标记猪滋养层与内细胞团细胞,进一步评价了FBS对于猪早期胚胎发育胚层分化的影响,结果显示,FBS可以提高猪体外胚胎囊胚孵化率和细胞数,同时CDX2和SOX2免疫荧光结果显示,FBS可以提高猪内细胞团细胞数,内细胞团细胞比例以及内细胞团进一步分化的能力。由此我们明确了FBS在改善猪体外胚胎培养体系中的价值,为我们下一步体外获得发育进程更加接近体内的胚胎提供了重要线索。之前我们的结果发现CDX2在猪胚胎中起始表达晚于小鼠,为此我们系统地比较了猪与小鼠相同细胞数的胚胎中CDX2的表达情况,结果发现CDX2在猪囊胚期开始表达,而小鼠桑葚胚期便已开始表达。因此我们进一步检测了CDX2上游调控因子YAP的表达,发现YAP的核定位与CDX2表达同时发生,同时利用Y27632阻断ROCK通路进而抑制YAP入核也会抑制CDX2的表达,这说明猪中同小鼠一样CDX2的表达受ROCK-YAP通路调控。由于有报道显示ROCK通路通过与细胞极性互作来调控YAP入核和CDX2表达,我们也检测了猪胚胎极化的进程。免疫荧光检测极性蛋白P-EZRIN表达的结果显示,与小鼠相比,猪胚胎细胞极化时间发生在桑椹胚期,晚于小鼠(8-细胞期开始),此外只有部分猪桑椹胚和早期囊胚外层卵裂球发生极化,而小鼠中几乎所有外层卵裂球此发育阶段均已发生极化。这些结果说明,猪中CDX2起始表达晚于小鼠可能是由于极化这一胚层分化重要前提事件在猪中的进程与小鼠中不同,这为我们进一步研究猪特有的胚层分化机理奠定了理论基础。由于之前我们的结果表明OCT4和CDX2长时间共同表达于猪滋养层中,这可能说明OCT4和CDX2在猪早期胚胎中的互作方式及猪中滋养层与内细胞团分化的分子机制与小鼠中存在不同。为此,我们以猪卵裂期胚胎为研究对象进一步研究了CDX2和OCT4在猪早期胚胎中的作用方式。结果显示早期胚胎中CDX2的过表达会导致猪胚胎发育阻滞,而这种阻滞可以通过过表达OCT4来挽救,这说明CDX2的过表达是通过抑制OCT4的表达或者功能导致的胚胎发育阻滞。进一步研究发现早期胚胎中CDX2的过表达不会影响OCT4转录及翻译水平,而会在翻译后水平通过竞争机制抑制OCT4与DNA的可触性,从而促进OCT4出核降解。而这种作用模式与小鼠中已有的CDX2与OCT4直接相互抑制彼此表达的研究结果有所不同,为我们进一步研究猪胚层分化过程中CDX2与OCT4的互作模式提供了研究基础。这些研究结果发现了猪特有的胚层分化进程及分子基础,补充了我们对哺乳动物胚层分化模式的了解,也为进一步研究猪早期胚胎胚层分化机理提供的大量的研究依据和理论基础。(本文来源于《东北农业大学》期刊2015-06-01)
张翠平,邱小燕,肖雄,赵海龙,邓玉金[3](2012)在《昆明小鼠胚胎收集时间和培养液对囊胚内细胞团集落分离培养的影响》一文中研究指出本研究旨在筛选获取优质ICM集落的实验方法。以昆明系小鼠为实验动物,采集3.5、4 d和4.5 d的胚胎,分别移入DMEM培养液、DMEM+白血病抑制因子(LIF)和小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系中进行培养,观察比较内细胞团(ICM)从透明带中孵出的时间、孵化囊胚贴壁情况以及ICM集落形成情况。结果表明:妊娠3.5 d的胚胎61%为桑椹胚,需要经过4~5 d的体外培养才能形成ICM集落;妊娠4 d的扩张囊胚经过3~4 d的共培养后形成ICM集落;妊娠4.5 d的孵化囊胚经过1~2 d的共培养即可形成ICM集落;ICM形成率以妊娠4.5 d的胚胎最高,显着高于妊娠4 d和3.5 d的胚胎(P<0.01),但妊娠4.5 d冲出孵化囊胚数量显着降低(P<0.01);小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系优于DMEM和DMEM+LIF培养液。因此,采集妊娠4 d的昆明小鼠胚胎,选择小鼠胎儿成纤维细胞共培养体系,在体外培养3~4 d,能够有效分离培养出可用于胚胎干细胞研究的优质ICM。(本文来源于《中国畜牧杂志》期刊2012年07期)
胡敏华,区颖蕾,李莉,郭欣政,张守全[4](2010)在《胚胎干细胞饲养层的优化及影响内细胞团贴壁率的探讨》一文中研究指出胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells,ES细胞)是一种多潜能(Pluripotent)细胞,在体外具有自我更新(Self-renewal)并向机体各组织细胞定向分化能力。ES细胞在研究胚胎发育,治疗性克隆及转基因动物上的应用使其成为生命科学研究的热点。本文诣在探索ES细胞饲养层的优化处理以及囊胚的获得时间对内细胞团(Inner Cell Mass,ICM)贴壁率的影响。结果表明:原代小鼠成纤维(Mouse EmbryonicFibroblast,MEF)中杂细胞较多,不适宜作为饲养层使用。第二、叁代MEF不但细胞较纯,而且生长最旺盛,是作为饲养层的最佳选择,也可使用冻存半年内的MEF细胞作为饲养层。在处理MEF过程中,丝裂霉素C浓度为10-15ug/ml处理3小时能有效支持ES细胞的生长、增殖。并且应该选取丝裂霉素C处理后一周内的MEF作为饲养层,在ES细胞培养过程中及时更换新的饲养层。4d冲出的胚胎基本为囊胚,3.5d冲出的大部分为桑葚胚,尽管在体外也不断发育,但桑椹胚在贴壁后往往发育缓慢甚至不发育、易退化。4d胚龄的胚胎中囊胚率显着高相对于3.5d胚龄的,ICM的出现率和贴壁率也显着高于3.5d的。因此4d胚龄的胚胎更适用于ES细胞的提取,分离和传代。通过形态鉴定、AP染色和OCT-4免疫荧光对ES细胞进行初步检测,证明所提取的ICM是具有多能性的ES细胞。(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)》期刊2010-08-01)
吴娟,曹云霞,章志国,叶四云,周平[5](2006)在《用囊胚内细胞团建立小鼠胚胎干细胞系的尝试》一文中研究指出目的建立小鼠129品系胚胎干细胞(ES)系。方法分离囊胚内细胞团接种至小鼠胚胎成纤维细胞,培养、传代以获得细胞系,通过形态观察、碱性磷酸酶检查、体内外分化实验予以鉴定。结果共获取12个囊胚,培养后有9个内细胞团增殖,消化传代,分离出2株克隆;形态观察具有明显的ES细胞形态,染色体核型检查为XY,碱性磷酸酶检查细胞呈阳性,体外分化实验表明可自发分化为外、中和内胚层细胞,体内分化实验获得典型的畸胎瘤,并具备小鼠特异性表面标志物Oct-4、SSEA-1。结论应用本方法建立了两株129品系胚胎干细胞系,并证实其符合小鼠胚胎干细胞的特征。(本文来源于《生殖医学杂志》期刊2006年05期)
张秀珍,采克俊,王淑芬,胡智兴,裴轶劲[6](2006)在《兔抗人外周血单核细胞、兔抗猴脾脏淋巴细胞免疫血清的制备及其在分离人和猕猴胚胎内细胞团中的应用》一文中研究指出采用梯度离心的方法用淋巴细胞分离液从浓缩的人白细胞悬液中分离人外周血单核细胞,从猕猴新鲜脾脏中研磨分离猕猴脾脏淋巴细胞;分别将人外周血单核细胞和猕猴脾脏淋巴细胞作为免疫原,每次通过耳缘静脉注射4×108个细胞免疫日本大耳白兔,每周免疫一次,共免疫3次,制备兔抗人外周血单核细胞和兔抗猕猴脾脏淋巴细胞免疫血清。体外培养人和猕猴胚胎至囊胚,采用制备的免疫血清,分离人和猕猴囊胚内细胞团,用于建立人和猕猴胚胎干细胞系。结果如下:(1)用半微量细胞毒实验法测得兔抗人外周血单核细胞免疫血清和兔抗猕猴脾脏淋巴细胞免疫血清的效价分别为1∶320和1∶640;(2)两种免疫血清成功地裂解了15个人囊胚和33个猕猴囊胚的滋养层细胞,分离出了内细胞团,表明免疫血清的制备取得了成功,为建立人和猕猴胚胎干细胞系奠定了基础。(本文来源于《动物学研究》期刊2006年01期)
邹亚芬,郑瑞珍,张苏明[7](2005)在《不同饲养层细胞对胚胎干细胞和内细胞团的影响》一文中研究指出目的探讨不同饲养层细胞对小鼠胚胎干细胞(ESC)和兔囊胚内细胞团(ICM)的影响。方法分别用成系小鼠胚胎成纤维细胞(SNL)、兔胚胎成纤维细胞(REF)、兔肾脏成纤维细胞(RRF)作为饲养层饲养小鼠ESC和兔囊胚,观察它们的生长状态,并分别检测其碱性磷酸酶活性。结果生长在REF上的小鼠ESC具有最显着的未分化形态,保持未分化时间最长,碱性磷酸酶活性最强。在REF上呈聚集生长的兔囊胚ICM的比例最高。结论REF能维持小鼠胚胎干细胞的未分化状态及促进兔囊胚ICM聚集生长,可以作为ESC的饲养层细胞。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2005年04期)
冯秀亮,高志敏,杨春荣,雷安民,樊敬庄[8](2003)在《由猪囊胚内细胞团分离胚胎干细胞的研究》一文中研究指出以 PMEF为饲养层培养猪 7~ 9日龄囊胚分离 ES细胞 ,ICM初次传代时间为 4~ 7d,ES细胞传代时间为 4~ 5 d,ES细胞传至 1~ 5代的胚胎数分别为 1 2 (1 8.8% ) ,8(1 2 .5 % ) ,5 (7.8% ) ,3(4 .7% ) ,2 (3.1 % ) ,并进行体外分化和 AKP染色鉴定。对影响猪 ES细胞分离与克隆的因素进行比较 ,结果表明 :(1 ) 9和 1 4日龄小鼠胎儿 PMEF饲养层培养 9日龄猪囊胚 ,贴壁率 (83.3% ,88,9% ) ,ICM形成率 (75 .0 % ,77.8% )和 1代 ES细胞克隆率(2 5 .0 % ,2 2 .2 % )无显着性差异 (P>0 .0 5 )。 (2 ) 7,8和 9日龄胚胎随胚龄增加 ,胚胎贴壁率 (5 .9% ,5 7.1 % ,87,9% )和 ICM形成率 (0 .0 % ,2 8.6 % ,81 .8% )升高 ,差异显着 (P<0 .0 1 )。(3) 9日龄囊胚直径 0 .8~ 1 .2 m m培养36~ 4 8h贴壁 ,贴壁率 1 0 0 % ,ICM形成率 1 0 0 % ;直径 >1 .2 mm囊胚贴壁时间为 4 8~ 72 h,贴壁率 5 7.1 % ,ICM形成率 5 7.1 % ,差异显着 (P<0 .0 5 )。去除直径 >1 .2 m m囊胚部分滋养层细胞培养 36~ 4 8h,贴壁率 91 .7% ,ICM形成率 83.3% ;(4 )添加外源 L IF没有提高贴壁率 (86 .4 % ,90 .9% ;P>0 .0 5 )和 ICM形成率 (81 .8% ,81 .8% ;P>0 .0 5 )(本文来源于《西北农林科技大学学报(自然科学版)》期刊2003年03期)
张玉兰,金连弘,陈瑛,李世杰,胡桂英[9](2002)在《由囊胚内细胞团分离人胚胎干细胞》一文中研究指出胚胎干(Embryonic stem,ES)细胞是由着床前胚胎内细胞团(Inner cell mass,ICM)或原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGC)经体外分离培养而建立的克隆细胞系。ES细胞的特点是只生长、不分化,并保持早(本文来源于《中国医学科学院学报》期刊2002年01期)
李昱,张肇英,王达珍,郭继彤[10](1995)在《小鼠早期胚胎内细胞团分化潜能的研究》一文中研究指出用免疫手术去除小鼠早期胚胎的外层细胞或滋养层细胞后,其内细胞团(ICM)经24h体外培养后能够重新形成滋养层,从晚期桑椹胚、早期胚泡和晚期胚泡分离的ICM的滋养层分化率分别为70.3%、69.3%和11.1%,晚期胚泡ICM的滋养层分化率明显低于早期胚泡和桑椹胚的滋养层分化率。实验结果表明小鼠早期胚泡的ICM仍然具有较强的分化为滋养层的能力,但晚期胚泡的ICM分化为滋养层的能力明显减弱.从而推断晚期胚泡的ICM在分化方向上发生了重要的内在变化。(本文来源于《内蒙古大学学报(自然科学版)》期刊1995年02期)
胚胎内细胞团论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
哺乳动物第一次胚层分化发生在囊胚腔形成过程中。囊胚形成前,胚胎由一个全能的受精卵分裂形成多个发育潜力几乎相同的卵裂球。随后胚胎的形态会发生显着改变,形成一个空腔,同时卵裂球也会分化形成外层的滋养层细胞(Trophectoderm,TE)和内部的内细胞团细胞(Inner cell mass,ICM)。这两种细胞进一步的发育走向不同,滋养层会成为胎盘部分,而内细胞团成为胎体和少部分胎盘组织。尽管小鼠中TE与ICM分化的进程和分子机理已经得到清晰的阐述,但在其他哺乳动物中却知之甚少。最近一些研究结果表明,猪中TE与ICM分化的相关事件与小鼠中存在差异,这说明小鼠TE与ICM的分化模式并不能代表所有哺乳动物。在小鼠中TE与ICM的分化依赖于转录因子CDX2与OCT4的相互抑制作用。CDX2最初在小鼠桑椹胚部分卵裂求中开始表达,并逐渐在部分外部细胞中富集,最终在囊胚TE中特异性表达。与此相反,OCT4在所有小鼠早期所有卵裂球中均表达,直至囊胚期,OCT4逐渐向ICM中富集,并最终在ICM中特异性表达。在TE细胞中,OCT4直接受到CDX2转录水平的抑制,而ICM中由于没有CDX2的表达,OCT4可以正常表达。有报道表明,小鼠中CDX2受到YAP-TEAD转录共激活因子的调控,而YAP的活性受到其上游信号通路Hippo和ROCK的调控。而猪中的相关研究结果表明,虽然CDX2在TE细胞中特异性表达,但是OCT4即使在晚期孵化囊胚中还仍然在TE和ICM中广泛表达。这两个因子如此长时间的共表达于TE细胞说明CDX2不能够高效的抑制OCT4的表达,OCT4也不是一个对于滋养层分化反映敏感的转录因子。这说明在猪中TE与ICM分化的分子基础可能与小鼠不同。更为重要的是,目前猪TE与ICM分化的进程没有得到清晰的阐述,滋养层与内细胞团特异性因子也不清楚。这些基础信息的未知极大阻碍了进一步研究猪滋养层与内细胞团分化的分子机理。为此,我们首先对猪滋养层和内细胞团标记因子进行了筛选,通过免疫荧光追踪CDX2在猪体内和体外胚胎中的表达模式发现虽然CDX2在猪滋养层细胞中特异性表达,但是CDX2在猪囊胚期才开始表达,这在发育时程上晚于小鼠(桑椹胚期开始表达),说明滋养层分化的调控机理或者关键事件在猪与小鼠中可能不同。之后我们通过免疫荧光的方法筛选了在猪内细胞团中特异性表达的因子,结果发现,SOX2特异性的在猪胚胎部分、内细胞团和上胚层中表达,并且与CDX2呈现互斥的表达模式,这些结果说明SOX2是猪早期胚胎多潜能特异标记因子。根据这些因子的表达,与小鼠已有资料对比,我们总结了猪早期胚胎发育过程中的多个转录因子表达时程,首次系统的揭示了猪特有的滋养层与内细胞团分化的分子基础和特有的胚层分化进程。已有报道显示FBS可以促进猪体外囊胚孵化,提高体外囊胚细胞数,但FBS是成分不明确的混合物质,且以往由于没有明确的分子标记可以反应猪ICM和TE细胞,无法准确FBS对猪胚胎发育的影响。这不但大大限制了FBS在猪体外培养过程的应用,也限制了猪体外培养优化相关研究工作的进展。而本文在揭示了猪滋养层与内细胞团分化分子基础之后利用CDX2和SOX2分别标记猪滋养层与内细胞团细胞,进一步评价了FBS对于猪早期胚胎发育胚层分化的影响,结果显示,FBS可以提高猪体外胚胎囊胚孵化率和细胞数,同时CDX2和SOX2免疫荧光结果显示,FBS可以提高猪内细胞团细胞数,内细胞团细胞比例以及内细胞团进一步分化的能力。由此我们明确了FBS在改善猪体外胚胎培养体系中的价值,为我们下一步体外获得发育进程更加接近体内的胚胎提供了重要线索。之前我们的结果发现CDX2在猪胚胎中起始表达晚于小鼠,为此我们系统地比较了猪与小鼠相同细胞数的胚胎中CDX2的表达情况,结果发现CDX2在猪囊胚期开始表达,而小鼠桑葚胚期便已开始表达。因此我们进一步检测了CDX2上游调控因子YAP的表达,发现YAP的核定位与CDX2表达同时发生,同时利用Y27632阻断ROCK通路进而抑制YAP入核也会抑制CDX2的表达,这说明猪中同小鼠一样CDX2的表达受ROCK-YAP通路调控。由于有报道显示ROCK通路通过与细胞极性互作来调控YAP入核和CDX2表达,我们也检测了猪胚胎极化的进程。免疫荧光检测极性蛋白P-EZRIN表达的结果显示,与小鼠相比,猪胚胎细胞极化时间发生在桑椹胚期,晚于小鼠(8-细胞期开始),此外只有部分猪桑椹胚和早期囊胚外层卵裂球发生极化,而小鼠中几乎所有外层卵裂球此发育阶段均已发生极化。这些结果说明,猪中CDX2起始表达晚于小鼠可能是由于极化这一胚层分化重要前提事件在猪中的进程与小鼠中不同,这为我们进一步研究猪特有的胚层分化机理奠定了理论基础。由于之前我们的结果表明OCT4和CDX2长时间共同表达于猪滋养层中,这可能说明OCT4和CDX2在猪早期胚胎中的互作方式及猪中滋养层与内细胞团分化的分子机制与小鼠中存在不同。为此,我们以猪卵裂期胚胎为研究对象进一步研究了CDX2和OCT4在猪早期胚胎中的作用方式。结果显示早期胚胎中CDX2的过表达会导致猪胚胎发育阻滞,而这种阻滞可以通过过表达OCT4来挽救,这说明CDX2的过表达是通过抑制OCT4的表达或者功能导致的胚胎发育阻滞。进一步研究发现早期胚胎中CDX2的过表达不会影响OCT4转录及翻译水平,而会在翻译后水平通过竞争机制抑制OCT4与DNA的可触性,从而促进OCT4出核降解。而这种作用模式与小鼠中已有的CDX2与OCT4直接相互抑制彼此表达的研究结果有所不同,为我们进一步研究猪胚层分化过程中CDX2与OCT4的互作模式提供了研究基础。这些研究结果发现了猪特有的胚层分化进程及分子基础,补充了我们对哺乳动物胚层分化模式的了解,也为进一步研究猪早期胚胎胚层分化机理提供的大量的研究依据和理论基础。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
胚胎内细胞团论文参考文献
[1].孙嘉博.囊胚孵化位点与内细胞团相对位置对小鼠胚胎着床和发育的影响[D].内蒙古大学.2018
[2].刘世超.猪早期胚胎发育及滋养层和内细胞团分化机理的相关研究[D].东北农业大学.2015
[3].张翠平,邱小燕,肖雄,赵海龙,邓玉金.昆明小鼠胚胎收集时间和培养液对囊胚内细胞团集落分离培养的影响[J].中国畜牧杂志.2012
[4].胡敏华,区颖蕾,李莉,郭欣政,张守全.胚胎干细胞饲养层的优化及影响内细胞团贴壁率的探讨[C].中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册).2010
[5].吴娟,曹云霞,章志国,叶四云,周平.用囊胚内细胞团建立小鼠胚胎干细胞系的尝试[J].生殖医学杂志.2006
[6].张秀珍,采克俊,王淑芬,胡智兴,裴轶劲.兔抗人外周血单核细胞、兔抗猴脾脏淋巴细胞免疫血清的制备及其在分离人和猕猴胚胎内细胞团中的应用[J].动物学研究.2006
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[8].冯秀亮,高志敏,杨春荣,雷安民,樊敬庄.由猪囊胚内细胞团分离胚胎干细胞的研究[J].西北农林科技大学学报(自然科学版).2003
[9].张玉兰,金连弘,陈瑛,李世杰,胡桂英.由囊胚内细胞团分离人胚胎干细胞[J].中国医学科学院学报.2002
[10].李昱,张肇英,王达珍,郭继彤.小鼠早期胚胎内细胞团分化潜能的研究[J].内蒙古大学学报(自然科学版).1995