导读:本文包含了结合反应论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:白蛋白,血清,荧光,永磁,蛋白质,鼻疽,空肠。
结合反应论文文献综述
张立志[1]（2019）在《荧光碳点的制备及其应用于恩诺沙星的检测与人血清白蛋白结合反应研究》一文中研究指出碳点(Carbon Dots,CDs)作为一种有前途的荧光探针,与有机染料和传统半导体量子点相比具有许多优越的性能,如良好的生物相容性、低毒性、光稳定性以及原料廉价易得等。本实验采用熔融法制备了两种荧光碳点,并分别用于恩诺沙星的检测和与蛋白质相互作用的研究。主要研究工作如下:1、以DL-苹果酸和甘氨酸为制备原料,通过熔融法成功地合成出一种氮掺杂的蓝色荧光碳点(N-CDs)。利用透射电子显微镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、傅里叶变换红外光谱(FT-IR)、X射线光电子能谱(XPS)、荧光光谱、紫外-可见吸收光谱等技术对所合成的碳点进行了表征。实验结果指出,合成的荧光碳点具有激发波长依赖性特征,最佳激发和发射波长分别为368 nm和452 nm,荧光量子产率为20.5%,平均粒径为2.6 nm且大小均匀。此外,X射线衍射光谱图证明N-CDs具有石墨化结构,红外光谱和XPS谱图表明碳点主要由C、N、O组成,而表面富含-OH、-COOH和-NH_2等亲水基团,进一步说明所合成的碳点具有良好的水溶性。恩诺沙星(ENR)是许多废水处理过程中需要去除的环境污染物之一。传统的ENR测量方法通常很复杂且耗时。由于灵敏度高、成本低以及环境友好等优点,荧光碳点作为荧光探针已被广泛应用于环境和医药等领域。实验中发现,N-CDs的荧光可以被Cu~(2+)有效猝灭,而加入ENR后碳点荧光又可以恢复。基于这种碳点荧光的猝灭-恢复策略,我们构建了一种操作简单快速、成本低、选择性好、灵敏度高,准确可靠的ENR传感器。在最佳条件下,ENR的浓度在1.0~15.0μg/mL范围内与碳点荧光强度恢复量成良好的线性关系(R~2=0.982),方法的检出限为0.16μg/mL,相对标准偏差RSD为1.7%(n=5)。此外,将所建立的方法用于实际水样中的ENR含量的测定,加标回收率在96.5%~109%的范围内。最后,基于共振瑞利散射、紫外-可见吸收和FT-IR光谱结果,提出了可能的荧光传感机制。2、以叁聚氰胺和柠檬酸为制备原料,通过熔融法制备出一种水溶性良好的荧光碳点。利用TEM、XRD、FT-IR、XPS、荧光光谱、紫外-可见吸收光谱等技术对所合成的碳点形貌、结构及光学性质等进行了表征。实验结果指出,合成的荧光碳点表现出激发波长依赖性行为,最大激发和发射波长分别为392nm和470 nm,荧光量子产率为12.8%,平均粒径为2.8±0.7 nm且大小均匀。此外,X射线衍射光谱指出所制备的碳点主要为无定形碳,FT-IR和XPS谱图显示该碳点主要由C、O、N组成,而其表面含有-OH、-COOH和-NH_2等亲水基团,有利于增加碳点的水溶性。在模拟生理条件下,利用荧光、紫外-可见光谱、圆二色谱和叁维荧光光谱等方法,研究了所合成的CDs与人血清白蛋白(HSA)之间的相互作用。通过Stern-Volmer方程计算,得到猝灭常数随温度升高而降低,初步指出碳点对HSA的荧光应属于静态猝灭。此外,所测得的紫外-可见吸收差谱和循环伏安法结果又进一步佐证蛋白质的荧光猝灭是形成了CDs-HSA基态复合物的静态猝灭。根据双对数方程得出CDs与HSA的表观结合常数达10~5 L/mol数量级,位点数n近似为1,说明二者之间的亲和力很高,以摩尔比为1:1结合形成复合物。依据所计算求出的热力学参数值推出CDs与HSA之间的作用力类型主要是氢键和范德华力。根据F_?rster非辐射能量转移理论计算出结合距离为2.2nm,指出CDs与HSA之间能够发生非辐射能量转移。位点探针取代实验表明,CDs主要结合在HSA的Site I位点(SubdomainIIA)。圆二色光谱、同步荧光光谱以及叁维荧光光谱结果指出,CDs和HSA的结合诱导了蛋白质构象变化,但色氨酸和酪氨酸残基所处的微环境极性未受影响。本研究结果为进一步了解蛋白质结构和功能,以及荧光碳点在生物体内运输和代谢具有一定的理论和实际意义。(本文来源于《辽宁大学》期刊2019-06-01）
周莹[2]（2019）在《基于RA血清抗体结合反应关节滑膜组织抗原的质谱鉴定及瓜氨酸修饰表位验证》一文中研究指出目的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种具有高度异质性的多系统自身免疫性疾病。本研究探究RA滑膜组织差异表达的蛋白,瓜氨酸化蛋白及瓜氨酸修饰位点,对上调的蛋白和瓜氨酸短肽进行生物学功能分析,寻找与RA具有高相关性的短肽,并研究瓜氨酸修饰短肽与血清ACPA的结合活性及用于RA的诊断价值。方法采用Thermo Q Exactive HF质谱技术鉴定RA血清抗体结合反应滑膜组织的抗原,瓜氨酸化蛋白及其修饰位点;采用在线软件STRING、Cytoscape软件、在线软件SYFPEITHI进行生物信息分析;利用ELISA检测原理,以合成COL6A3、KRT10的2条瓜氨酸修饰短肽(COL6A3_C:QDVVNAV-(Cit)-QLTLLGG;KRT10-C:RLAADDF-(Cit)-LKYENEV)为靶抗原,分别用HRP标记抗人IgA、IgG和IgM抗体为二抗,检测血清ACPA与两种抗瓜氨酸短肽抗体的结合活性,并对两种短肽用于RA诊断进行效果评价。结果(1)质谱共鉴定出594种蛋白,其中RA抗CCP抗体(+)组有125种蛋白表达上调,RA(-)抗CCP抗体组有87种蛋白表达上调,共鉴定57种瓜氨酸修饰蛋白及97个修饰位点;(2)RA抗CCP抗体(+)组上调蛋白主要参与白细胞活化、调节胞吐作用、补体激活、调节凝血过程和急性炎症反应;RA抗CCP抗体(-)组上调蛋白主要参与组织发育、上皮细胞角化、蛋白质折迭和物质分解代谢过程。COL6A3的短肽序列QDVVNAVRQLTLLGG与MHC-Ⅱ类分子的结合力较高;(3)抗COL6A3_C短肽抗体的ELISA检测值(以抗人IgM为二抗)用于RA诊断的灵敏度为65.52%,特异度为78.95%,阳性预测值82.61%,阴性预测值60%,ROC曲线下面积为0.724,但该类抗体在用于诊断抗CCP抗体(-)RA患者的ROC曲线下面积可达0.956。抗KRT10_C短肽抗体的ELISA检测值(以抗人IgG为二抗)用于RA诊断的灵敏度为58.62%,特异度为52.17%,阳性预测值60.71%,阴性预测值52.17%,ROC曲线下面积为0.686,仅用于诊断抗CCP抗体(+)RA患者的ROC曲线下面积为0.895。结论(1)从RA滑膜组织中鉴定出瓜氨酸修饰抗原,为RA存在瓜氨酸修饰提供了直接证据。(2)RA抗CCP抗体(+)组上调蛋白主要参与免疫反应过程,RA抗CCP抗体(-)组上调蛋白主要参与细胞生长发育。COL6A3与RA的相关性较高,可能是RA自身抗体的靶抗原。(3)抗COL6A3_C短肽抗体仅用于抗CCP抗体(-)RA患者的诊断价值较高,抗KRT10_C短肽抗体仅用于抗CCP抗体(+)RA患者的诊断效果较好,将两种抗短肽抗体加入RA实验室诊断体系,可提高RA的诊断率。(本文来源于《江苏大学》期刊2019-04-18）
王卓玉[3]（2018）在《百草枯与牛血清白蛋白结合反应的荧光光谱特征研究》一文中研究指出实验用荧光光谱和紫外-可见吸收光谱研究PQ与BSA结合反应的光谱特征,探讨了PQ对BSA的荧光猝灭作用,经处理实验结果得出动态猝灭常数、结合常数、结合位点等数据,并用同步荧光光谱技术来考察BSA构象的变化。对了解PQ与蛋白质的结合方式、明确PQ在动物体内的代谢过程、研究PQ的中毒机制及指导PQ中毒急救、解毒等方面具有重要意义。(本文来源于《广州化工》期刊2018年07期）
陈杰,王雪峰,关平原,王文,李舵[4]（2017）在《马鼻疽补体结合反应检测方法的改进》一文中研究指出为配合国家中长期动物疫病防治规划(2012-2020)对马鼻疽的监测任务,本研究对马鼻疽诊断技术(农业行业标准,NY/T 557-2002)中补体结合试验的体系进行了优化和改进。改进后的方法使用商品化的抗原、补体、溶血素,保证了实验体系的稳定;与原方法相比,该方法将反应的总体系从2.5 m L缩小为0.75 m L,阴阳性血清的稀释度从1∶10降至1∶20,阳性血清、阴性血清、抗原、溶血素、补体、红细胞的使用量均缩减了5倍左右,降低了检测成本,同时将检测用具由试管改为2 m L聚丙烯塑料管,方便了实验室的操作和生物废弃物的无害化处理。利用上述改进的方法和原方法分别对来自河北、北京、天津和上海的47份马血清进行了检测,结果相同,以此验证了两种方法在反应条件和稳定性方面是一致的。(本文来源于《中国预防兽医学报》期刊2017年07期）
曹团武,周坤,黄文兵,时建伟,谭晓平[5]（2017）在《光谱法研究哈巴俄苷与人血清白蛋白的结合反应》一文中研究指出在不同温度及模拟血液pH值条件下,采用荧光光谱法和紫外-可见吸收光谱法研究了哈巴俄苷(Harpagoside,HAR)与人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)的结合反应。结果表明,HAR有规律地使HSA内源荧光猝灭,猝灭常数随温度升高而降低,其猝灭机制为两者形成复合物而引起的的静态猝灭;不同条件下两者结合常数K_A均大于10~5L/mol,结合位点数n≈1。由Van't Hoff方程计算获得了不同条件下HAR与HSA相互作用的热力学参数,由ΔG、ΔH和ΔS均小于0可知,两者结合的主要作用力是氢键和范德华力,且两者结合是吉布斯自由能降低的自发过程。根据Frster非辐射转移理论计,计算了不同条件下HAR与HSA的结合距离r在4.01~4.28 nm范围内,表明两者结合过程发生了非辐射能量转移。同步荧光光谱表征结果表明,HAR使HSA的色氨酸和酪氨酸残基所处的微环境极性增强,疏水性减弱,导致HSA构象发生了一定程度的改变。(本文来源于《分析化学》期刊2017年05期）
冯雪原,耿红民,郜宇超,杜晓波,闫羽[6]（2016）在《正庚烷辅助高能球磨引起的GdCo_5合金的歧化、脱氢及再结合反应》一文中研究指出报导了一种由正庚烷辅助高能球磨引起GdCo5合金的歧化,以及随后的脱氢和再化合反应。在正庚烷中球磨400min,部分GdCo5相发生歧化反应,生成Gd的氢化物GdH2+δ和单质Co。随后在真空中加热到800℃,GdH2+δ脱去H原子与Co重新化合生Gd2Co17。Gd2Co17是面各向异性,但最终产物中还有未歧化的GdCo5相,样品具有460kA/m的矫顽力。球磨更长时间(600、800、1 000min)以上,GdCo5合金的完全歧化,脱氢后的产物中除了Gd2Co17又出现了α-Co和GdCoC2相。由于没有了GdCo5相,产物矫顽力几乎为零。H原子和C原子来源于正庚烷的分解。(本文来源于《金属功能材料》期刊2016年04期）
杨景晶[7]（2016）在《基于肽段N端或组氨酸结合反应的蛋白质混合物简化策略》一文中研究指出复杂生物体系中的蛋白质以及因不同修饰而产生的蛋白质异构体的数量可达百万种。随着蛋白质组学研究的深入进展,这些动态范围过宽、理化性能差异过大的复杂蛋白质为探索生命活动的本质带来了巨大挑战。高丰度蛋白质因其表达水平高而容易被有效分离鉴定,与此相比中低丰度蛋白质由于本身数量庞大,组成复杂而不易被有效检测,在分离和鉴定过程中,高丰度蛋白质的强信号也会掩盖或结合大量的低丰度蛋白质,为中低丰度蛋白质的分离鉴定造成极大干扰。不仅是低丰度蛋白质,对于很多高丰度蛋白质的研究,同样面临质谱分析结果的序列覆盖率低,定量稳定性差等问题,这给蛋白质组研究中的分析鉴定方法学带来了巨大的挑战。针对此问题,科研人员从不同的角度入手提出解决方案。在蛋白质组的研究中,鸟枪法被广泛地应用于蛋白质检测。蛋白质混合物被酶解为肽段的混合物,然后利用质谱进行测序分析,计算机根据科研人员已经设定的计算法则,将实验谱图与理论谱图匹配,并找到鉴定肽段在蛋白质序列中的相应位置,从而确定该混合物中具体的蛋白质成分。鸟枪法的应用摆脱了传统凝胶分离技术中的限制与不足,同时也带来了相应的弊端。通过鸟枪法,混合溶液中不仅产生了易于质谱检测的高丰度肽段,也产生了难以检测到的低丰度肽段。所谓低丰度,并不意味着这些肽段含量非常低,它们可能仅仅是被数量巨大的高丰度肽段抑制,或者在质谱分析时,离子化效率偏低,由于质谱灵敏度的限制,在图谱采集时更容易被遗漏掉。但是,即便是因为各种原因,部分肽段的序列及其翻译后修饰变体,无法有效监测,并不意味着这些序列携带的信息不重要。相反,我们要发展相应的技术体系与方法,帮助发现这些遗漏的肽段或蛋白质。大量的研究结果表明,低丰度肽段、蛋白质,在生物界中往往携带着重要的信息或是发挥着不可取代的作用。经过多年来的研究表明,在疾病治疗方面,低丰度肽段或是蛋白质往往充当了诊断、预后和治疗效果的标记物,同时它们也可能是治疗的靶点。因此,对于高丰度蛋白质去除和低丰度蛋白质的富集、鉴定成为了具有重要意义的研究方向。要改善低丰度蛋白质的鉴定,一般通过叁种机制:(1)消耗高丰度蛋白质;(2)富集低丰度蛋白质;(3)提高质谱对蛋白质的灵敏度与准确度。其中提高色谱、质谱的分离与分辨率成本高,且容易受到仪器本身的条件限制,因此,目前国际上对于中低丰度的分离与鉴定主要在富集低丰度蛋白质方面,例如抗体免疫去除;蛋白均衡器;修饰蛋白质、核酸结合蛋白质富集等,但是这些方法具有选择性,对于复杂样本的通用性较差。现在的问题是,我们缺乏通用性好的蛋白质复杂体系简化策略,因此该研究课题从两个方面展开:第一,利用氨基活性反应基团或羧基活性反应基团与化学基团的无差别反应,达到复杂系统中高丰度蛋白质或肽段的消减;第二,靶向富集含某种特定氨基酸的肽段,从而简化体系,降低基质效应。本论文共分为叁个部分,第一章概述了蛋白质组研究中低丰度蛋白质的富集、鉴定技术,以及靶向富集含特定氨基酸肽段的意义、现状与研究进展,同时对目前国际上低丰度研究的常用方法,例如抗体免疫去除、蛋白均衡器、修饰蛋白质、核酸结合等进行了分析研究,在此基础上提出了本论文的研究内容与目标,即通用性强的高丰度蛋白质去除方法以及特异性肽段富集策略。在第二章,我们开展了通用性强的高丰度蛋白质去除方法的探究。在这一部分中,我们利用酶切后肽段末端氨基活性反应基团或羧基活性反应基团与活性试剂发生结合作用从而去除高丰度肽段,并进一步优化结合氨基或羧基的浓度速率关系实现研究目的。首先是对该实验的基础部分进行研究,我们考察了模型生物酵母细胞叁种常用的不同方法,对比了它们的提取效率,提取方法的重复性考察,不同提取方法得到酵母蛋白质的丰度与其相对谱图数的线性关系的考察,可鉴定到的蛋白质丰富范围与理论值的比较。经过该部分实验,我们发现虽然NETN超声破碎法的提取效率最高,但经过FASP酶切处理,质谱分析的结果显示SDS碱裂解法与Urea超声破碎法鉴定到了蛋白质数量更多,其中SDS碱裂解法对肽段的修饰作用明显,因此Urea超声破碎法是理想的提取方法。在第二部分的研究中,我采用Urea超声破碎法进行酵母蛋白质提取。通过调研对比其他活性试剂,我选用了通用性强的CNBr活化琼脂糖珠作为肽段氨基端反应试剂,质谱分析结果显示经过多次结合后,部分肽段有损失,但是高丰度与低丰度之间拉平作用明显。在第叁章中,由于随着高通量蛋白质组研究技术的发展,液相色谱-串联质谱被广泛的运用于深度地鉴定并定量分析目标肽段和蛋白质。但由于峰容量限制、基质效应等问题,在液相色谱-质谱(LC-MS)分析中,只能获得有效的蛋白质序列覆盖度,大量隐含肽段、色谱分离时的共洗脱肽段,严重影响以二级质谱为核心的定量方法的准确度。为了简化分析体系,提高质谱定量分析的准确度,本研究对含组氨酸肽段开展选择性富集方法的探索,建立组氨酸肽段与定量蛋白质组研究串联的分析方法。实验结果表明,Cu-beads与肽段反应30mins,肽段上样量与C u-beads比例为1:1(μg:ul)的情况下为最优条件,可以实现稳定性好,重现性高的his肽段选择性富集。在i TRAQ按比例标记试验中,含组氨酸肽段富集可以明显改善定量分析的准确度。因此,his肽段富集,可以作为一种简单、有效的复杂蛋白质组简化策略,并提高定量蛋白质组研究的准确性。(本文来源于《中国人民解放军军事医学科学院》期刊2016-06-01）
武群政[8]（2016）在《减重手术对2型糖尿病大鼠血清胆汁酸组分和结合反应的影响》一文中研究指出背景2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus, T2DM)是当今社会严重危害人类健康的慢性疾病之一,临床研究表明减重手术可以迅速而持久地缓解T2DM。近期的研究发现：减重手术后机体血清胆汁酸水平升高,这可能对于减重手术后糖耐量和胰岛素敏感性的改善有重要作用,而胆汁酸组分的改变和导致这种改变的潜在机制可能在减重手术改善T2DM中有重要的意义。本项研究的目的是利用T2DM大鼠模型来研究不同的减重手术对血清胆汁酸组分的影响,并探究其可能的机制。方法用高脂饮食喂养联合腹腔注射低剂量链脲佐菌素的方法建立T2DM大鼠模型,将大鼠分为十二指肠空肠旁路术组(Duodenal-jejunal bypass,DJB)、袖状胃切除术组(Sleeve gastrectomy, SG)和假手术组(SHAM),每组10只,分别给予相应的手术处理。在特定的时间点检测各组的体重、进食量情况,行口服葡萄糖耐量试验(Oral glucose tolerance test, OGTT)和胰岛素耐量试验(Insulin tolerance test, ITT)。术后12周检测血清总胆汁酸和各组分情况,采用RT-PCR和Western blotting技术从转录水平和蛋白水平测定肝脏胆固醇7-羟化酶(cholesterol 7-alpha hydroxy-lase,CYP7A1)、胆汁酸辅酶A合成酶(bile acid-CoA synthase, BACS)和胆汁酸辅酶A：氨基酸N-酰基转移酶(bile acid-CoA:amino acid N-acyltransferase, BAAT)的表达情况。结果术后第2、12周时,DJB组与SG组的OGTT和ITT的曲线下面积均明显减少(P<0.05),表明糖耐量和胰岛素敏感性发生迅速而持久地改善。术后第12周时,DJB组和SG组血清总胆汁酸增多(P<0.05),牛磺酸结合型胆汁酸绝对值和所占比例均明显升高(P<0.05)。术后第12周时,DJB组和SG组肝CYP7A1表达下调,提示胆汁酸合成受到抑制；肝BACS和BAAT表达上调,提示胆汁酸与氨基酸结合的反应增强。除SG术后可引起明显的体重和进食量的减少(P<0.05)外,DJB与SG间无明显统计学差异。结论1、DJB和SG两种手术方式都可以有效地改善T2DM大鼠的糖耐量和胰岛素抵抗。2、DJB和SG都可以使T2DM大鼠术后血清总胆汁酸,特别是结合型胆汁酸升高,两种手术方式间无明显差异。3、DJB和SG术后肝脏BACS和BAAT表达水平升高,提示胆汁酸与氨基酸结合反应增强,这可能是减重手术后血清结合型胆汁酸升高的重要原因。(本文来源于《山东大学》期刊2016-05-15）
周一平,周昱,马颖林,蒋昆谕,孟胜男[9]（2016）在《白杨素在雌雄小鼠肝肠S9中磺酸化结合反应的性别差异》一文中研究指出目的:研究性别差异对FVB小鼠肝肠S9介导的白杨素磺酸化结合反应的影响。方法:分别建立雌雄小鼠与白杨素肝肠S9的体外孵育体系,通过超高效液相色谱法(UPLC)与LC-MS/MS液质联用技术测定其代谢产物。采用Graph Pad Prism 5软件对检测结果进行处理与分析。结果:肝肠中代谢产物均为单磺酸化结合产物且均呈底物抑制的动力学特征,反应速率均存在显着的性别差异(P<0.05)。肝中雌鼠的代谢速率整体趋势高于雄鼠,而小肠中雌鼠的代谢速率明显低于雄鼠。结论:性别差异对白杨素的肝肠代谢动力学有显着性影响,这也许与雌雄小鼠代谢酶mRNA的表达有关。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2016年03期）
江涛,马良,张宇昊,王佳曼[10]（2016）在《光谱法研究黄曲霉毒素B_1与人血清白蛋白的结合反应》一文中研究指出黄曲霉毒素B_1(AFB_1)是目前发现的致癌能力最强的真菌毒素,严重危害人畜健康。人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)在结合、运输内源性和外源性等小分子物质方面具有重要的生理功能。研究AFB_1与HSA的相互作用机理和作用过程,在分子毒理学上具有重要意义。本研究模拟在人体血液pH条件(pH 7.4,离子强度0.1 mol/L),通过荧光淬灭、3D荧光法和圆二色谱(Circular dichroism,CD)等光谱方法研究AFB_1与人血清蛋白的相互作用。结果表明,AFB_1与HSA的内源荧光淬灭属于静态淬灭,AFB_1-HSA在298,303,308和313 K4个温度条件下,结合常数均为10~4数量级,结合位点都约为1。根据Van't Hoff方程AFB_1-HSA体系是熵增焓减的自发过程,分子间主要作用力为疏水作用和氢键。基于Forster's能量转移,得知AFB_1与HSA结合距离为3.31 nm。竞争结合实验表明,AFB_1结合在HSA的siteI位点上,靠近色氨酸Trp-214。通过3D荧光分析,AFB_1的结合作用导致了HSA氨基酸残基微环境和二级构象发生变化。圆二色谱的分析结果表明,二者的结合使得HSA的α-螺旋含量增加。(本文来源于《分析化学》期刊2016年01期）
结合反应论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种具有高度异质性的多系统自身免疫性疾病。本研究探究RA滑膜组织差异表达的蛋白,瓜氨酸化蛋白及瓜氨酸修饰位点,对上调的蛋白和瓜氨酸短肽进行生物学功能分析,寻找与RA具有高相关性的短肽,并研究瓜氨酸修饰短肽与血清ACPA的结合活性及用于RA的诊断价值。方法采用Thermo Q Exactive HF质谱技术鉴定RA血清抗体结合反应滑膜组织的抗原,瓜氨酸化蛋白及其修饰位点;采用在线软件STRING、Cytoscape软件、在线软件SYFPEITHI进行生物信息分析;利用ELISA检测原理,以合成COL6A3、KRT10的2条瓜氨酸修饰短肽(COL6A3_C:QDVVNAV-(Cit)-QLTLLGG;KRT10-C:RLAADDF-(Cit)-LKYENEV)为靶抗原,分别用HRP标记抗人IgA、IgG和IgM抗体为二抗,检测血清ACPA与两种抗瓜氨酸短肽抗体的结合活性,并对两种短肽用于RA诊断进行效果评价。结果(1)质谱共鉴定出594种蛋白,其中RA抗CCP抗体(+)组有125种蛋白表达上调,RA(-)抗CCP抗体组有87种蛋白表达上调,共鉴定57种瓜氨酸修饰蛋白及97个修饰位点;(2)RA抗CCP抗体(+)组上调蛋白主要参与白细胞活化、调节胞吐作用、补体激活、调节凝血过程和急性炎症反应;RA抗CCP抗体(-)组上调蛋白主要参与组织发育、上皮细胞角化、蛋白质折迭和物质分解代谢过程。COL6A3的短肽序列QDVVNAVRQLTLLGG与MHC-Ⅱ类分子的结合力较高;(3)抗COL6A3_C短肽抗体的ELISA检测值(以抗人IgM为二抗)用于RA诊断的灵敏度为65.52%,特异度为78.95%,阳性预测值82.61%,阴性预测值60%,ROC曲线下面积为0.724,但该类抗体在用于诊断抗CCP抗体(-)RA患者的ROC曲线下面积可达0.956。抗KRT10_C短肽抗体的ELISA检测值(以抗人IgG为二抗)用于RA诊断的灵敏度为58.62%,特异度为52.17%,阳性预测值60.71%,阴性预测值52.17%,ROC曲线下面积为0.686,仅用于诊断抗CCP抗体(+)RA患者的ROC曲线下面积为0.895。结论(1)从RA滑膜组织中鉴定出瓜氨酸修饰抗原,为RA存在瓜氨酸修饰提供了直接证据。(2)RA抗CCP抗体(+)组上调蛋白主要参与免疫反应过程,RA抗CCP抗体(-)组上调蛋白主要参与细胞生长发育。COL6A3与RA的相关性较高,可能是RA自身抗体的靶抗原。(3)抗COL6A3_C短肽抗体仅用于抗CCP抗体(-)RA患者的诊断价值较高,抗KRT10_C短肽抗体仅用于抗CCP抗体(+)RA患者的诊断效果较好,将两种抗短肽抗体加入RA实验室诊断体系,可提高RA的诊断率。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
结合反应论文参考文献
[1].张立志.荧光碳点的制备及其应用于恩诺沙星的检测与人血清白蛋白结合反应研究[D].辽宁大学.2019
[2].周莹.基于RA血清抗体结合反应关节滑膜组织抗原的质谱鉴定及瓜氨酸修饰表位验证[D].江苏大学.2019
[3].王卓玉.百草枯与牛血清白蛋白结合反应的荧光光谱特征研究[J].广州化工.2018
[4].陈杰,王雪峰,关平原,王文,李舵.马鼻疽补体结合反应检测方法的改进[J].中国预防兽医学报.2017
[5].曹团武,周坤,黄文兵,时建伟,谭晓平.光谱法研究哈巴俄苷与人血清白蛋白的结合反应[J].分析化学.2017
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[10].江涛,马良,张宇昊,王佳曼.光谱法研究黄曲霉毒素B_1与人血清白蛋白的结合反应[J].分析化学.2016
论文知识图
