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大肠埃希菌生物被膜对抗生素和消毒剂药效的影响

2020-12-10阅读(869)

大肠埃希菌生物被膜对抗生素和消毒剂药效的影响

论文摘要

奶牛乳房炎是世界范围内奶牛最常见的疾病,其中以大肠埃希菌为主的环境致病菌是主要致病因素。近年来,随着抗生素和消毒剂等药物的应用,多重耐药菌株在全球流行。研究发现,细菌生物被膜是导致细菌耐药的重要因素,由于生物被膜易黏附于生物体或非生物体的表面,对环境具有很强的适应能力,同时可以阻止药物与菌体的接触,增强细菌对抗生素和消毒剂的耐药性。本论文通过筛选大肠埃希菌中生物被膜阳性菌株,并测定其形成能力,研究培养条件对生物被膜形成能力的影响,以选择适宜的成膜条件,探究生物被膜形成后细菌对耐药性的变化,以期为预防大肠埃希菌感染提供资料。其研究结果如下:1.在35株大肠埃希菌中生物被膜阳性19株（54.29%）,生物被膜阴性16株（45.71%）。阳性菌株中强成膜能力6株（31.58%）、中等成膜能力10株（52.63%）、弱成膜能力3株（15.79%）,其中既产生卷曲菌毛又产生胞外纤维素（rdar）有12株（63.16%）、只产生卷曲菌毛（bdar）有1株（5.26%）、只产生胞外纤维素（pdar）有2株（10.53%）、不产生卷曲菌毛和胞外纤维素（saw）有4株（21.05%）。经泳动培养基测定,生物被膜形成能力越强大肠埃希菌泳动能力越大。2.当用葡萄糖含量为2%,NaCl含量为0.5%,pH为7的LB肉汤37℃培养48 h时生物被膜形成量最大。3.生物被膜形成后,链霉素、头孢噻呋、四环素、庆大霉素、青霉素、环丙沙星的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度分别提高了4-16倍、8-64倍。随药物浓度增大,抑制生物被膜形成和清除成熟生物被膜的作用均增强,其中环丙沙星的效果最好,青霉素的效果最差。4.生物被膜形成后,“84”消毒液、苯扎溴铵、碘伏、2%戊二醛、75%乙醇的杀菌率均降低,其中1000 mg/L苯扎溴铵、2%戊二醛、75%乙醇对浮游菌的杀菌效果最好,2%戊二醛对生物被膜菌的杀菌效果最好,杀菌率均在1 min时达到100%。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 细菌生物被膜研究进展
  •   1.1 细菌生物被膜的结构特征
  •   1.2 细菌生物被膜的形成过程及其影响因素
  •     1.2.1 细菌生物被膜的形成过程
  •     1.2.2 生物被膜形成的影响因素
  •   1.3 细菌生物被膜与致病性的关系
  •   1.4 细菌生物被膜与耐药性的关系
  •     1.4.1 生物被膜的屏障作用
  •     1.4.2 膜内营养限制
  •     1.4.3 免疫逃逸
  •     1.4.4 诱导产生耐药基因
  •   1.5 牛乳房炎源大肠埃希菌生物被膜研究进展
  •     1.5.1 牛乳房炎源大肠埃希菌研究进展
  •     1.5.2 大肠埃希菌生物被膜研究进展
  • 第二章 大肠埃希菌生物被膜形成能力鉴定
  •   2.1 材料
  •     2.1.1 菌株
  •     2.1.2 主要仪器
  •     2.1.3 主要培养基及试剂材料
  •   2.2 方法
  •     2.2.1 生物被膜阳性菌株的筛选
  •     2.2.2 结晶紫染色法测定生物被膜形成能力
  •     2.2.3 生物被膜阳性菌株卷曲菌毛和胞外纤维素的检测
  •     2.2.4 生物被膜阳性菌株泳动性测定
  •     2.2.5 培养条件对生物被膜形成能力的影响
  •     2.2.6 统计学处理
  •   2.3 结果
  •     2.3.1 生物被膜阳性菌株的筛选
  •     2.3.2 结晶紫染色法测定生物被膜形成能力
  •     2.3.3 卷曲菌毛和胞外纤维素的检测
  •     2.3.4 生物被膜阳性菌株泳动性测定
  •     2.3.5 培养条件对生物被膜形成的影响
  •   2.4 讨论
  •   2.5 小结
  • 第三章 浮游菌和生物被膜菌对抗生素药效的影响
  •   3.1 材料
  •     3.1.1 菌株
  •     3.1.2 主要仪器
  •     3.1.3 主要培养基及试剂材料
  •   3.2 方法
  •     3.2.1 抗生素贮存液的制备
  •     3.2.2 浮游菌最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定
  •     3.2.3 生物被膜菌最小抑制浓度和最小清除浓度的测定
  •     3.2.4 不同浓度抗生素对生物被膜形成的影响
  •     3.2.5 不同浓度抗生素对成熟生物被膜的影响
  •     3.2.6 荧光显微镜观察生物被膜内细菌状态
  •     3.2.7 统计学处理
  •   3.3 结果
  •     3.3.1 生物被膜形成前后对抗生素耐药性的影响
  •     3.3.2 不同浓度抗生素对生物被膜形成的抑制作用
  •     3.3.3 不同浓度抗生素对成熟生物被膜的清除作用
  •   3.4 讨论
  •   3.5 小结
  • 第四章 浮游菌及生物被膜菌对消毒剂药效的影响
  •   4.1 材料
  •     4.1.1 菌株
  •     4.1.2 主要仪器
  •     4.1.3 消毒剂的配制及试剂材料
  •   4.2 方法
  •     4.2.1 菌悬液的制备
  •     4.2.2 中和剂的制备
  •     4.2.3 悬液定量杀菌试验
  •     4.2.4 生物被膜菌杀灭试验
  •   4.3 结果
  •     4.3.1 悬浮定量杀菌试验测定结果
  •     4.3.2 生物被膜菌杀灭试验测定结果
  •   4.4 讨论
  •   4.5 小结
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 致谢
  • 个人简历

    • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 范玉堂

    导师: 李勤凡

    关键词: 大肠埃希菌,生物被膜,耐药性,消毒剂

    来源: 西北农林科技大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 西北农林科技大学

    基金: 陕西省重点研发计划项目(编号:2017ZDXM-NY-079)

    分类号: S852.61

    总页数: 52

    文件大小: 2276K

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