哈药集团三精制药哈尔滨市150000
【摘要】目的：建立一套完善的HPLC鉴定黄岑和丹参等药物的方式；方法：针对各种药物中的药材进行分析，通过采用不同的方式来提取其中的有效物质，制备出试验用溶液，通过不同的分析方式的测试选出一种最为可行的HPLC检测方式；结果：针对相同药材中的不同药物成分进行鉴别之后，其具有相同特征的色谱，所以可以将色谱的峰数作为检定标准，通过对比色谱峰面积即可得到成分含量，并且测定效果比较准确；结论：本文所采用的方式对于不同药物中的黄岑丹参成分都具有较好的检定效果，所以在药物筛查工作中可以起到较好的效果。
【关键词】高效液相色谱法；黄芩；丹参；快速检验
目前随着我国社会的发展，人们已经越来越重视自身的健康问题，所以用药的数量在不断提高。在这种前提下，药物的质量也就成为一个越来越重要的问题。目前我国最常用的药物质量及检测方式是HPLC方式，这种技术不仅仅用于药物的相关检验工作当中，其在物质分析工作上起到的作用是相当重要的，在很多化学工业和相关检测工作中都有能充分发挥其技术的优势。这种检测方式本身具备很多优势，例如其速度和效率较高，并且具有足够的灵敏度。在样品分析的过程中，载液具有较高的流动速度，所以大大提高了分析效率；并且这种检验方式分离效果好，所以大大提高了检验效率和准确性，同时其对于紫外检测器的灵敏度非常高，同时也可以回收色谱柱，基于其本身具备的诸多优势，其在药物鉴定工作中的应用范围已经越来越广泛，本次针对其在丹参和黄岑中的检定情况进行了探讨。
1材料与方法
1.1实验材料
采用美国Agilent公司生产的Agilent1260Infinily高效液相色谱以及超声波中药处理机和HypersilODS2色谱柱进行实验。所用试药为黄芩苷及丹参酮ⅡA对照品、黄芩及丹参对照药材以及双黄连口服液、感冒止咳颗粒、冠心丹参胶囊、金龙舒胆胶囊、清热解毒口服液、精制冠心片、复方丹参片等。同时选用色谱纯甲醇、重蒸水和其他分析纯试剂进行本次研究。
1.2实验方法
1.2.1黄芩类实验溶液制备
精密称取黄芩苷对照品，加入甲醇制成每1mL含50μg的溶液，将其用作对照品溶液。之后取0.5g黄芩对照药材置100mL三角瓶中，精密加入50mL甲醇，超声处理15min，放冷，过滤。精密量取滤液1mL，置25mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀即可。将其用作对照药材溶液。
1.2.2丹参类实验溶液制备
精密称取丹参酮ⅡA对照品，加入甲醇制成每1mL含20μg的溶液，将其用作对照品溶液。之后取0.5g丹参对照药材置100mL三角瓶中，精密加入50mL甲醇，超声处理15min，放冷，过滤，将其用作对照药材溶液。1.2.3供试品实验溶液制备以下几种供试品溶液将与黄芩类实验溶液进行对比研究：①取1粒金龙舒胆胶囊内容物置100mL三角瓶中，精密加入50mL甲醇，超声处理10min，放冷，过滤与50mL甲醇充分混合，并对其进行10min的超声处理。精密量取滤液2mL，置10mL容量瓶中，加入甲醇至刻度，摇匀即可；②取1mL双黄连口服液置100mL三角瓶中，精密加入50%甲醇50mL，摇匀，过滤，精密量取滤液2mL，置10mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀即可；③取感冒止咳颗粒，并将其研细后取1g置100mL三角瓶中，精密加入50mL甲醇，超声处理10min。处理完成后，对其进行过滤；④取1mL清热解毒口服液，置100mL三角瓶中，精密加入50mL，50%甲醇，摇匀，对其进行过滤，取其滤液进行实验。
以下几种供试品溶液将与丹参类实验溶液进行对比研究：①取复方丹参片1片，并将其研碎，置50mL三角瓶中，精密加入25mL甲醇，超声处理10min，放冷，取续滤液；②取精制冠心片1片，并将其研碎，置50mL三角瓶中，精密加入25mL甲醇，超声处理10min，放冷，取续滤液；③取1粒冠心丹参胶囊内容物置50mL三角瓶中，精密加入25mL甲醇，超声处理10min，放冷，取续滤液。
2结果
2.1几种含黄芩成分中成药的检测结果
经检验，几种实验溶液的主要色谱峰处的其他色谱峰的保留时间都大致相同，约为7.860min。这一特征可以帮助实验研究人员确定该类药品中含有黄芩类成分。同时根据色谱峰数和色谱峰的保留时间可以对其进行定性分析，根据黄芩苷色谱峰的面积以及对照品溶液色谱峰的面积之比可以对含有黄芩成分的中成药中的黄芩苷的含量进行初步判断。根据相应的色谱峰面积之比可以大致判断出：每克黄芩对照药材中大致含有96.2mg黄芩苷；每粒金龙舒胆胶囊中大致含有12.1mg黄芩苷；每毫升双黄连口服液中大致含有12.5mg黄芩苷；每克感冒止咳颗粒中大致含有2.1mg黄芩苷；每毫升清热解毒口服液中大致含有1.2mg黄芩苷。
2.2几种含丹参成分中成药的检测结果
经检验，几种实验溶液的主要色谱峰处的其他色谱峰的保留时间都大致相同，约为12.420min。这一特征可以帮助实验研究人员确定该类药品中含有丹参类成分。同时根据色谱峰数和色谱峰的保留时间可以对其进行定性分析，根据丹参酮ⅡA色谱峰的面积以及对照品溶液色谱峰的面积之比可以对含有丹参成分的中成药中的丹参酮ⅡA的含量进行初步判断。根据相应的色谱峰面积之比可以大致判断出：每克丹参对照药材中大致含有2.2mg丹参酮ⅡA；每片复方丹参片中大致含有0.43mg丹参酮ⅡA；每粒精制冠心片中大致含有0.22mg丹参酮ⅡA；每粒冠心丹参胶囊中大致含有0.31mg丹参酮ⅡA。
三、讨论
目前我国药物检验技术仍然在不断完善的过程中，很多种方式都得到了很大程度的发展。从另一方面来看，中药成分本身都是非常复杂的，并且随着其生长时间和来源的不同也会导致其质量的变化，同时其生产中的提取工艺也往往会对其质量造成影响，引用传统的显微镜观察和近红外方式，其难以取得较好的鉴别效果。从另一方面来说，薄层色谱法这种鉴别方式本身具有较多的干扰因素，并且由于其需要的时间较长，所以效率较低，所以药物快速检验中难以符合具体的要求，并且由于其溶剂较容易受到污染，所以农业难以进行室外快速检验。本文采用HPLC的方式来鉴别几种含有丹参和黄岑等成分的药物，来达到快速检验的目的。通过色谱中的峰面面积进行对比，即可判断出各种样品中有效成分的含量，用这样的方式来进行定量，效率很高，通过对比即可发现某药品中单一成分的含量是否不足，可以对药物的生产流程进行有效规范。
丹参和黄岑这两种药材在中药中的应用范围是非常广泛的，并且经常由于生产工艺中的不同导致其含量的不同。经过测定之后，生成的图谱可能会有一定的区别。所以这就需要我们将具体的生产工艺和提取成分考虑在内。经过具体的实验总结，确定一套合理而完善的色谱条件和溶液制备的方式，这样才能有有效检定出药品中特定成分的含量。
本次实验中所采用的标准为我国官方要点的标准，并且在调整后才进行检定实验，实验结果较为准确，并且溶液的制备较为便利，色谱分离难度较低，并且分析时间段，可以适应当下的快速检验需求。经过实验已经证明其在丹参和黄岑的物质检定工作中可以发挥出较好的效果，可以进行推广，继续探讨其在其他药材成分的检定工作。
参考文献
[1]齐红梅,胡新颖.采用HPLC法快速检验几种含黄芩、丹参中成药的研究[J].中国处方药,2016,14(6):31-32.
[2]赵红光,王志敏,郑心明.高效液相色谱法测定丹黄口服液中的黄芩甙和丹参素[J].实用药物与临床,1998(3).
[3]吴丽红,储忠英,刘惠军.HPLC同时测定丹参清解口服液中原儿茶醛和黄芩苷的含量[C]//全国药品质量分析论坛.2012.
[4]杨顺芳.丹参与黄芩注射液配伍的不良反应[J].护理实践与研究,2012,09(10):37-37.
[5]李智立.四种中药活性成分的生物色谱/质谱研究—丹参、黄芩、当归和川芎[D].中国药科大学,2000.