导读:本文包含了人补体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:补体,受体,蛋白,酵母,血清,序列,活性。
人补体论文文献综述
张超[1]（2018）在《表达人补体调节蛋白的异种移植供体猪的制备》一文中研究指出猪是异种器官移植的优良供体,但从猪到灵长类的异种器官移植中,会发生免疫排斥反应,这也是异种器官移植研究中亟待解决的难题。敲除α-1,3半乳糖苷转移酶基因(α-1,3-galactosyltransferase knockout,GTKO)供体猪的制备,基本解决了异种器官移植超急性免疫排斥反应。但补体介导的排斥反应,仍是机体排斥外源移植物的主要方式之一。高效表达人补体调节蛋白(Human complement regulatory protein,hCRP)基因hCD55、hCD46等,能有效地降低异种器官移植的免疫排斥反应。本研究采用随机整合的方法,在转入人膜辅助因子蛋白(Membrane cofactor protein,MCP)基因hCD46的GTKO巴马五指山杂交小型猪(Sus scrofa)耳成纤维细胞的基础上,转入人衰变加速因子(Decay accelerating factor)hCD55基因,获得了hCD55转基因猪1头;又采用定点敲入的方法,利用GTKO巴马小型猪耳成纤维细胞,转入hCD55基因,以期制备高效表达DAF的定点整合hCD55的耳成纤维细胞系。具体研究结果如下:1.转hCD55和hCD46克隆猪制备利用GTKO/hCD46巴马五指山杂交猪的耳成纤维细胞系,将人衰变加速因子蛋白基因hCD55随机整合到猪基因组中,制备表达人双补体调节蛋白的异种移植供体猪。构建广泛性表达启动子CAG调控的hCD55基因表达载体pCAGhCD55,转染猪耳成纤维细胞,嘌呤霉素筛选阳性细胞52个。PCR鉴定目的基因hCD55的整合情况,获得整合hCD55基因的克隆点27个。RT-PCR鉴定目的基因hCD55的表达情况,表达hCD55的克隆点有17个。选取表达较高的克隆点细胞,利用体细胞核移植技术制备hCD55转基因猪,选取596个融合胚胎移植4头代孕母猪,获得阳性仔猪1头。PCR鉴定克隆仔猪基因型(genotype),克隆仔猪成功整合hCD55基因。RT-PCR鉴定hCD55、hCD46的表达情况,结果显示,hCD55、hCD46基因在仔猪体内能正常表达。实时荧光定量PCR(qPCR)检测hCD55在转基因猪的各个器官中的表达量,检测发现hCD55基因在克隆仔猪心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰脏、肌肉、小肠和大肠等器官都有表达,在肝脏、肺脏、肾脏中的表达水平较高。2.猪Rosa26位点敲入Loxp修饰的hCD55成纤维细胞系的建立高效表达人补体调节蛋白基因hCD55,在异种器官移植中尤为重要。本研究在GGTA1基因敲除(α-1,3-galactosyltransferase knockout,GTKO)巴马小型猪(Sus scrofa)耳成纤维细胞的基础上,利用CRISPR/Cas9技术在猪Rosa26基因座敲入hCD55基因,以制备hCD55基因高效表达的细胞系。分别构建靶向切割pRosa26(Reverse orientation splice acceptorβ-geo26,Rosaβgeo26)位点intron 1(内含子1)的Cas9表达载体,及pRosa26位点同源重组hCD55的表达载体,后者包含异源Loxp序列间的EF1α(polypeptide chain elongation factor 1α)启动子调控的hCD55基因、潮霉素B磷酸转移酶(hygromycin B phosphotransferase,HPH)基因、胸腺激酶(thymidine kinase,TK)基因为正负筛选基因。将Cas9-Rosa26表达载体和pEF1α-hCD55表达载体共电转染猪耳成纤维细胞系,培养液中加入丙氧鸟苷(Ganciclovir,GCV)和潮霉素(Hygromycin,Hyg)进行筛选,培养至单细胞克隆,获得94个克隆点。利用跨5’端和3’端同源臂的两对引物PCR检测目的基因整合情况,定点整合hCD55的阳性克隆点2个。RT-PCR和Western blot检测hCD55在细胞中的表达情况,阳性细胞都能正常表达hCD55基因。结论:本研究利用GTKO/hCD46巴马五指山杂交猪的耳成纤维细胞系,成功制备了GTKO/hCD46/hCD55表达人双补体调节蛋白的异种移植供体猪;在GTKO巴马小型猪耳成纤维细胞系基础上,成功构建了定点整合并表达目的基因hCD55的细胞系。验证了克隆实验平台的稳定性,为异种移植供体猪的制备提供了资料基础。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2018-06-01）
胡金川,田亚平,刘丽丹,温新宇,王玲[2]（2015）在《健康人补体受体1基因单核苷酸多态性位点与其红细胞表面分子水平的相关性》一文中研究指出目的探讨健康人补体受体1(complement receptor type 1,CR1)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点与红细胞表面CR1分子水平的相关性。方法采用多重PCR-荧光标记单碱基延伸-标签微阵列杂交基因分型技术,检测215例受试者CR1基因5个标签SNP,并采用流式细胞术测定其中81例样本红细胞CR1分子水平。采用Arlequin3.11软件对各SNP位点基因型频率进行哈温平衡(Hardy-Weinberg equilibrium,HWE)检验,采用SPSS 13.0软件对健康人CR1基因SNP位点基因型及等位基因分布的性别差异、不同基因型人群红细胞CR1分子水平差异和影响红细胞CR1分子水平的单因素和多因素进行统计学分析。结果健康人CR1基因SNP位点基因型及等位基因分布性别间的差异无统计学意义(P>0.05);健康人红细胞CR1几何平均荧光强度比值(the geometric mean fluorescence intensity ratio of CR1,CR1-GMFIR)为3.36±1.26。rs11118167T>C和rs9429945C>T位点各基因型组对应的红细胞CR1分子水平总体比较,差异具有统计学意义(分别为P<0.01和P<0.05),两两比较时,rs11118167T>C位点TC、CC基因型携带者低于TT基因型者,rs9429945C>T位点CT、TT基因型携带者低于CC基因型者(P值均<0.01)。在年龄、性别、5个标签SNP位点各基因型中,CR1-GMFIR与rs4844600G>A(GG/GA/AA)、rs9429945C>T(CC/CT/TT)、rs11118167T>C(TT/TC/CC)均呈负相关(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01),影响CR1-GMFIR的最主要因素为rs11118167T>C(P<0.01),其次为rs9429945C>T(P<0.01)。结论 rs11118167T>C和rs9429945C>T是红细胞CR1分子水平的主要影响因素。(本文来源于《标记免疫分析与临床》期刊2015年08期）
贺伸[3]（2014）在《人补体调节蛋白CD46转基因猪的生产及其补体调控功能验证》一文中研究指出本试验利用基因工程技术、转基因技术和体细胞克隆技术等方法,研究构建人CD46转基因表达载体,并利用该表达载体制备转基因五指山小型猪；对获得的转基因猪进行体外功能验证。得到了如下结果：1、利用基因捕获技术捕获人CD46基因起始调控序列,人工合成人CD46基因cDNA序列,二者重组拼接形成拼接载体,添加抗性标记基因获得本试验所需转基因表达载体；体外转染成纤维细胞获得较好的转基因表达。2、构建原代五指山小型猪成纤维细胞,利用电转技术对构建的成纤维细胞进行转基因载体的转染；48h后在培养液中添加嘌呤霉素进行筛选；对获得的阳性克隆点进行RT-PCR鉴定和FITC标记抗体染色。3、将筛选到的阳性克隆细胞进行体细胞核移植,并进行胚胎移植；共计移植胚胎数1260枚,移植受体6头,妊娠5头,分娩3头,产仔11头,经PCR和RT-PCR初步鉴定,10头为转基因阳性。4、采集转基因猪不同的组织器官进行免疫组化分析,结果表明所构建的CD46微小基因表达载体具有类似于人体内源性CD46的组织特异性表达模式。不同的组织表现出不同方式的染色,其中多管腔组织染色更明显,并且染色集中在上皮组织和血管内皮细胞。5、采集转基因猪主动脉血管和耳组织分别构建主动脉内皮细胞系和耳组织成纤维细胞,FITC标记抗体染色后,进行流式细胞仪分析显示,所获得的转基因猪内皮细胞表达出高水平的CD46,主动脉内皮细胞转基因表达水平高于耳成纤维细胞。6、对转基因猪主动脉内皮细胞进行人ABO血型血清补体介导的细胞毒性分析表明,CD46转基因猪内皮细胞受到了明显的保护作用；本研究同时观察到B血型血清补体介导的细胞死亡细胞比例要明显低于其它血型血清补体介导的细胞死亡。本研究为异种器官移植研究在小型猪品种上的应用提供了理论依据,将有效地促进在小型猪品种的基础上进行更多的异种器官移植研究,为国内异种移植研究提供研究素材。(本文来源于《四川农业大学》期刊2014-06-01）
路延之[4]（2014）在《人补体受体1型衍生分子融合蛋白CR1-SCR2D的构建及对小鼠脓毒症炎症损伤的保护作用》一文中研究指出脓毒症(sepsis)是由感染引起的全身炎症反应综合征(systemic inflammatoryresponse syndrome, SIRS)，是住院危重患者的主要死亡原因之一。脓毒症的发病机制比较复杂，涉及到各个系统的共同作用。其始动环节之一，是补体系统识别病原微生物发生过度活化。病原菌的菌体成分、内毒素、外毒素等使得补体系统过度激活，产生大量的炎症效应片段，造成后续级联放大的炎症反应。目前抑制补体的过度活化已成为防治脓毒症炎症损伤的重要策略之一。在经典、旁路、凝集素叁条通路中，补体激活的起始位点不同，但都形成C3转化酶，在C3处汇合，进而形成C5转化酶，共同进入终末途径。如果能在C3处防止C3/C5转化酶的形成，可减少炎症效应片段如C3a、C5a、C5b-9等的释放，在一定程度上就能够防止或减轻SIRS的发生与发展。我室曾研制了人补体受体1型(complement receptor type1，CR1)的两个活性片段短同源重复序列(short consensus repeats，SCR)1-3和SCR15-17，分别用毕赤酵母进行表达，证明其具有体外抑制补体的生物活性作用和体内抗炎保护作用。这两个片段分别结合C4b和C3b，只能抑制一条或两条补体激活通路，保护作用有限。因此，本研究构建了能结合C4b、C3b的双功能域CR1衍生分子(complement receptor type1-shortconsensus repeats of two domains, CR1-SCR2D)，检测融合蛋白在体外抑制补体的生物活性，并进行了小鼠脓毒症损伤的保护性研究。本研究主要获得了以下实验结果：1．表达质粒pPICZαB-SCR2D的构建。将毕赤酵母质粒pPIC9k原有的多克隆位点替换为新的多克隆位点pPIC9k(+)；用我室前期构建的pPIC9k-SCR1-3和pPIC9k-SCR15-17作模板，PCR扩增基因SCR1-3和SCR15-17，依次克隆连接到pPIC9k(+)上，在二者中间加入linker序列，构建含有目的基因的重组质粒pPIC9k(+)-SCR2D；最后将目的基因SCR2D克隆到载体pPICZαB上，得到表达载体pPICZαB-SCR2D。双酶切和测序鉴定表明，表达质粒pPICZαB-SCR2D构建成功。2．表达质粒pPICZαB-SCR2D电转化毕赤酵母后进行表达及鉴定。表达质粒pPICZαB-SCR2D经过Sac I单酶切后电转毕赤酵母X-33感受态，从博来霉素(Zeocin)的YPD平板上挑取单克隆，行PCR鉴定阳性重组子。确立目的蛋白在重组酵母X-33/CR1-SCR2D中有分泌表达。采用小鼠抗人CR1抗体经Western blot鉴定，在分子量约90kDa处出现阳性条带。3．目的蛋白CR1-SCR2D经Ni-NTA柱纯化及糖基化鉴定。表达上清过Ni-NTA柱后，低浓度咪唑洗脱杂蛋白，高浓度咪唑洗脱目的蛋白。SDS-PAGE电泳显示，在分子量约90kDa处有弥散条带，目的蛋白纯度较高。目的蛋白经29kDa的Endo H糖苷酶处理后，分子量达到理论大小的45kDa，带型也变规则，证明CR1-SCR2D存在糖基化。4．目的蛋白CR1-SCR2D的体外抑制补体生物活性鉴定。用CH50和AH50对目的蛋白CR1-SCR2D进行经典途径和旁路途径抑制补体活性检测，结果显示CR1-SCR2D均可抑制两条通路的激活，并且抑制补体活性分别高于SCR1-3和SCR15-17。去糖基化后的CR1-SCR2D对CH50和AH50溶血活性没有影响。另外证明CR1-SCR2D对旁路和MBL途径激活片段C4b、C3b在酵母多糖上沉积有抑制作用。5．目的蛋白CR1-SCR2D对脓毒症小鼠炎症损伤的保护性效应。用盲肠结扎穿刺术(CLP)成功构建小鼠的脓毒症模型。进行分组实验，结果表明CR1-SCR2D在一定程度上能保护小鼠96h的生存率。CR1-SCR2D可以降低脓毒症小鼠24h后血清C5a、IL-6和TNF-α的水平，降低脓毒症小鼠肺脏的MPO水平，降低脓毒症小鼠血液的细菌水平。免疫组化结果表明，CR1-SCR2D使脓毒症小鼠C4b、C3b在肺脏上的沉积减少。小鼠肺脏病理学检查结果显示，CR1-SCR2D明显减轻了肺泡间隔和肺泡腔内出血、水肿、炎细胞浸润、局部实变的病理损伤。综上所述，本实验成功构建毕赤酵母表达质粒pPICZαB-SCR2D，实现了目的蛋白CR1-SCR2D在毕赤酵母中的分泌表达，经过纯化获得了目的蛋白。体外生物活性结果证明，目的蛋白CR1-SCR2D可以抑制补体叁条通路的激活。在小鼠体内，补体在脓毒症炎症损伤中起了重要作用，CR1-SCR2D通过抑制补体的过度激活达到了对脓毒症小鼠炎症损伤的保护效应。研究结果为脓毒症治疗的深入研究提供了新的思路和途径。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2014-05-01）
路延之,李庆伟,杨绍俊,张璇,汪正清[5]（2014）在《人补体受体1型衍生分子融合基因CR1-SCR2D的构建、表达及生物学活性鉴定》一文中研究指出目的构建和表达具有抑制补体生物活性的双功能域人补体受体1型衍生分子CR1-SCR2D。方法基于我室前期工作,将CR1-SCR1-3、人工α螺旋肽段linker、SCR15-17 3个DNA片段依次克隆到改造载体pPIC9k(+)和pPICZαB,构建出表达质粒pPICZαB-CR1-SCR2D;电转化毕赤酵母X-33得到阳性重组子,甲醇诱导目的蛋白CR1-SCR2D表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达结果;经纯化获得CR1-SCR2D并进行糖基化鉴定后,用CH50和AH50法鉴定目的蛋白在体外抑制补体的生物活性。结果成功构建了目的基因的表达质粒pPICZαB-CR1-SCR2D,基因测序正确;SDS-PAGE和Western blot证实目的基因在毕赤酵母中实现了分泌表达;经镍柱纯化后得到较纯的CR1-SCR2D,糖基化鉴定证明其存在糖基化;CH50法和AH50法结果显示CR1-SCR2D均有较CR1-SCR1-3和CR1-SCR15-17更好的抑制补体生物学活性。结论成功构建了双功能域人补体受体1型衍生分子融合基因CR1-SCR2D,在毕赤酵母中实现了CR1-SCR2D的分泌表达,该融合蛋白对经典/MBL途径及旁路途径补体激活均具有较好的抑制作用。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2014年03期）
李鑫鑫,吴志豪,张传福,贾雷立,宋宏彬[6]（2014）在《人补体受体2-Fc融合蛋白真核表达载体的构建与表达》一文中研究指出目的构建人补体受体2(CR2)-Fc融合蛋白基因表达载体,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达人CR2-Fc蛋白。方法将人CR2片段和IgG1 Fc片段进行连接,克隆入PCI-neo表达载体。脂质体法将测序正确的重组真核表达载体转染CHO K1细胞进行蛋白表达,采用SDS-PAGE、Western blot法对蛋白表达进行检测和鉴定。结果利用双酶切及基因测序结果证实CR2-Fc基因序列正确,重组真核表达载体构建成功;SDS-PAGE检测纯化产物的相对分子质量(M r)与预期结果一致,Western blot法在同样位置检出条带。结论成功构建了CR2-Fc重组真核表达载体,获得了有活性的融合蛋白。(本文来源于《细胞与分子免疫学杂志》期刊2014年01期）
吕永强[7]（2013）在《人补体片段C5a蛋白的可溶性表达、纯化及生物学活性检测》一文中研究指出目的:为得到可溶性表达的人补体片段C5a蛋白,并检测其生物学活性。方法:用IPTG对C5a融合蛋白进行诱导表达,表达产物经肠激酶酶切后用Ni2+分离柱纯化得到C5a蛋白,通过对中性粒细胞的趋化作用、呼吸爆发、产生乳铁蛋白等实验检测C5a蛋白的生物学活性。结果:成功获得可溶性表达的C5a融合蛋白,通过肠激酶酶切后得到高纯度的C5a蛋白,C5a蛋白对人中性粒细胞具有明显的趋化作用,能引起人中性粒细胞的呼吸爆发并能诱导人中性粒细胞产生乳铁蛋白。结论:可溶性表达了具有生物学活性的人补体片段C5a蛋白,为进一步的临床研究和应用奠定了基础。(本文来源于《中国医药导刊》期刊2013年10期）
李洪波,胡兴,伍贤进,李娜,吴东海[8]（2013）在《高度特异性人补体C1q/TNF相关蛋白-2抗体的制备及验证》一文中研究指出人体中已发现13种与脂联素在结构和功能上相类似的蛋白,这类蛋白被称为hCTRP(human C1q/TNF-related protein)[1]。在已发现的CTRP中,CTRP2与脂联素最为相似,C-末端球状区是功能区,全长及球状CTRP2蛋白都有良好的降血糖、加速游离脂肪酸氧化及胰岛素增敏作用;除此之外,CTRP2还有其它的生物学功能,但其作用机制尚未明(本文来源于《中国药理学通报》期刊2013年10期）
杨绍俊[9]（2012）在《人补体受体1型功能域SCR1-3基因的克隆表达及对急性脑缺血再灌注损伤的保护作用》一文中研究指出缺血性脑血管病及脑再灌注炎症损伤已成为目前严重威胁人类健康和生命的主要疾病之一。其发病原理比较复杂，研究表明：补体系统被过度激活而产生的炎症效应片段是导致脑缺血再灌注(cerebral ischemia and reperfusion，CI/R)炎症损伤的主要始动因子之一。在经典、甘露糖结合凝集素(mannan-binding lectin，MBL)、旁路叁条补体活化途径中，虽然它们激活的起始位点各不相同，但都在C3处汇合，形成C3/C5转化酶。如能结合C4b、C3b及抑制C3/C5转化酶的活性，则可阻断过量C3a、C4a、C5a、C5b-9等炎症效应片段的生成，即能在始动环节防止脑缺血再灌注炎症损伤的发生和发展。人补体受体1型(complement receptor type1，CR1)SCR1-3功能域具有结合C4b的能力，能够抑制C3/C5转化酶的活性，阻断过量C3a，C5a及C5b-9的形成，在早期阶段防止补体系统的过度活化，预防CI/R损伤的发生与发展。本研究中从人外周血提取总RNA，RT-PCR扩增获得编码CR1-SCR1-3的目的基因片段，构建pPIC9k-CR1-SCR1-3重组表达质粒，进行核苷酸序列鉴定，在毕赤酵母KM71中诱导分泌表达CR1-SCR1-3蛋白，SDS-PAGE及Western-Blot鉴定目的蛋白，用镍柱亲和层析纯化表达产物，观察目的蛋白CR1-SCR1-3在体外抑制补体的溶血活性以及对大鼠急性脑缺血再灌注损伤的保护作用。该研究获得以下主要结果：1.以人外周血提取的总RNA为模板，根据人CR1-SCR1-3的DNA序列设计一对引物，上游引物包含SnaBⅠ酶切位点，可将目的基因连接到pPIC9k载体的信号肽序列之后，下游引物含有6×His tag，终止密码子以及NotⅠ位点，经RT-PCR扩增成功获得了617bp编码CR1-SCR1-3的目的基因片段；2.经SnaBⅠ和NotⅠ双酶切的目的基因片段CR1-SCR1-3及pPIC9k载体，在T4连接酶的作用下，构建重组表达质粒pPIC9k-CR1-SCR1-3，化学转化法转化DH5α，经菌落PCR初筛、SnaBⅠ和NotⅠ双酶切鉴定及华大基因测序鉴定，结果与GenBank中的相应序列同源性为100%，命名为pPIC9k-CR1-SCR1-3；3.将SalⅠ酶线性化的重组质粒pPIC9k-CR1-SCR1-3，电转化毕赤酵母KM71感受态细胞，MD平板初筛，再经不同浓度的G418平板复筛，菌落PCR鉴定，最终获得了9个高拷贝的阳性克隆子，并命名为pPIC9K-CR1-SCR1-3/KM71；4.挑取阳性重组子，在摇瓶水平发酵并用1%无水甲醇诱导表达，表达产物经SDS-PAGE及Western-Blot鉴定，结果证实CR1-SCR1-3目的蛋白在毕赤酵母中成功分泌表达；5.表达蛋白经镍柱亲和层析纯化后，SDS-PAGE显示目标蛋白纯度较高，用BCA试剂盒测定纯化前及纯化后蛋白浓度，计算目的蛋白所得产率约为35%；6.体外CH50法检测CR1-SCR1-3的生物活性，结果显示：随着蛋白浓度的增加，CR1-SCR1-3的抑制补体活性不断增强，当浓度达到50μg/ml时，CR1-SCR1-3蛋白即具有50%的抑制补体活性，表明CR1-SCR1-3蛋白在体外有良好的抑制补体活性功能；7.成功制备大鼠急性大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion，MCAO)模型，结果显示：保护组神经功能评分及脑梗死体积明显低于CI/R手术组，生化指标方面：保护组MPO活性及MDA含量亦显着低于CI/R手术组，而SOD活性则明显升高。Western-Blot检测结果显示：保护组大鼠缺血侧大脑皮层C4b表达量明显下调；免疫组化结果显示保护组大鼠缺血侧大脑皮层C4b沉积明显减少；病理检测结果发现：假手术组未见明显病理改变，CI/R手术组梗死区血管周围有中性粒细胞侵润，大脑实质水肿，组织疏松、间隙增大，神经元核固缩，胞体缩小变形，出现染色质凝集，胶质细胞增生；而保护组上述病理改变明显减轻，表明CR1-SCR1-3可减轻补体介导的脑缺血再灌注炎症损伤，对急性CI/R损伤起保护作用。综上所述，本实验成功构建了重组酵母表达质粒pPIC9k-CR1-SCR1-3，一分子量约27kD的CR1-SCR1-3目的蛋白在毕赤酵母中分泌表达，镍柱亲和层析纯化一步法可获得纯度较高的目的蛋白，体内外生物活性功能鉴定结果表明：该蛋白具有结合C4b与抑制C3∕C5转化酶的生物活性，并对大鼠急性脑缺血再灌注损伤具有一定的保护作用，为进一步研究脑缺血再灌注损伤等疾病的防治奠定了基础。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2012-05-01）
许燕,王洪梅,朱其军,武建明,宋玲玲[10]（2012）在《人补体C1INH基因的原核表达及其抗血清的制备》一文中研究指出采用PCR技术获得人补体C1INH基因全长,以其为模板扩增出抗原表位基因片段命名为C1,然后将C1片段重组到pET32a(+)载体中,筛选阳性克隆,转化大肠杆菌;IPTG诱导表达,用超声波裂解重组菌BL21培养物,纯化蛋白后免疫新西兰兔制备抗血清。SDS-PAGE分析表明,pET32a-C1融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中以包涵体形式高效表达;获得的抗血清经间接ELISA法检测效价为1∶6 400;Western-blot检测显示,抗血清可与原核表达的C1INH蛋白进行特异性结合,为进一步检测真核表达蛋白及研究rhC1INH的功能活性,并为C1INH的临床检测奠定基础。(本文来源于《家畜生态学报》期刊2012年02期）
人补体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨健康人补体受体1(complement receptor type 1,CR1)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点与红细胞表面CR1分子水平的相关性。方法采用多重PCR-荧光标记单碱基延伸-标签微阵列杂交基因分型技术,检测215例受试者CR1基因5个标签SNP,并采用流式细胞术测定其中81例样本红细胞CR1分子水平。采用Arlequin3.11软件对各SNP位点基因型频率进行哈温平衡(Hardy-Weinberg equilibrium,HWE)检验,采用SPSS 13.0软件对健康人CR1基因SNP位点基因型及等位基因分布的性别差异、不同基因型人群红细胞CR1分子水平差异和影响红细胞CR1分子水平的单因素和多因素进行统计学分析。结果健康人CR1基因SNP位点基因型及等位基因分布性别间的差异无统计学意义(P>0.05);健康人红细胞CR1几何平均荧光强度比值(the geometric mean fluorescence intensity ratio of CR1,CR1-GMFIR)为3.36±1.26。rs11118167T>C和rs9429945C>T位点各基因型组对应的红细胞CR1分子水平总体比较,差异具有统计学意义(分别为P<0.01和P<0.05),两两比较时,rs11118167T>C位点TC、CC基因型携带者低于TT基因型者,rs9429945C>T位点CT、TT基因型携带者低于CC基因型者(P值均<0.01)。在年龄、性别、5个标签SNP位点各基因型中,CR1-GMFIR与rs4844600G>A(GG/GA/AA)、rs9429945C>T(CC/CT/TT)、rs11118167T>C(TT/TC/CC)均呈负相关(分别为P<0.05,P<0.01,P<0.01),影响CR1-GMFIR的最主要因素为rs11118167T>C(P<0.01),其次为rs9429945C>T(P<0.01)。结论 rs11118167T>C和rs9429945C>T是红细胞CR1分子水平的主要影响因素。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
人补体论文参考文献
[1].张超.表达人补体调节蛋白的异种移植供体猪的制备[D].甘肃农业大学.2018
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