导读:本文包含了细胞冻存论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,软骨,血清,瘤胃,造血干细胞,纤维,百分率。
细胞冻存论文文献综述
李莹,王英,罗浩虹,吴娟英[1]（2019）在《冻存复苏及4℃存放对成纤维细胞的影响》一文中研究指出目的:探索冻存复苏及4℃存放对细胞活性的影响。方法:培养细胞,冻存复苏后,利用台盼蓝染色和MTT法检测细胞的活性。结果:台盼蓝染色显示,未冻存的活力平均为96. 57±1. 21 (%),而冻存细胞的细胞活力平均为74. 29±2. 14 (%),两组有显着性差异(P <0. 01)。4℃保存的细胞存放超过3h以上(第4h开始),细胞的存活显着降低。两组细胞之间的吸光度也出现同样趋势。结论:细胞在4℃保存,3h内可保持活力不变。(本文来源于《科技视界》期刊2019年29期）
于瑶,殷宗琦,李丹,周广东,曹谊林[2]（2019）在《人耳软骨细胞冻存复苏后的体外成软骨能力及体内转归的研究》一文中研究指出目的以无支架软骨膜片为模型,研究冻存对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力的影响。方法将小耳畸形患者术中废弃的残耳软骨,以胶原酶消化、分离,得到原代软骨细胞。将软骨细胞扩增至第1代(P1)后,分为实验组及对照组。实验组(Exp)以含有FBS和DMSO的冻存液,经程控降温仪和液氮冻存1个月后复苏,高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨;对照组(Ctrl)不经冻存继续扩增至第3代(P3),高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨。通过光学显微镜、CCK-8、活/死细胞染色、HE和阿利新蓝染色等,检测细胞形态、活力、增殖能力及软骨特异基质(ECM)的表达能力。通过每组体外软骨膜片的湿重、体积及生化成分定量检测,确定软骨细胞的体外成软骨能力。将每组软骨膜片制成新生软骨颗粒(可注射软骨),注射至裸鼠皮下(n=5),8周后取材,行大体观察、HE染色和生化成分定量检测,比较每组软骨细胞的体内成软骨能力。结果两组细胞的形态、活力、增殖能力和软骨特异的糖胺聚糖(GAG)形成能力无明显差异。相比对照组,实验组体外再生软骨的湿重及总胶原表达升高;但体内软骨再生能力两组亦无明显差异。结论细胞冻存复苏对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力无明显影响。(本文来源于《组织工程与重建外科杂志》期刊2019年03期）
李强,庞玉娟,武艺,张焱如,曹俊伟[3]（2019）在《玻璃化冻存对蒙古驴卵母细胞甲基化及GFM1、MRPL15基因表达水平的影响》一文中研究指出旨在探讨玻璃化冷冻对驴卵母细胞发育的影响。采集新鲜驴卵巢组织,将收集的卵母细胞分别按以下3种方式进行处理:直接冷冻(T1组)、冷冻复苏+成熟处理20 h(T2组)、冷冻复苏+成熟处理40 h(T3组);同时,取新鲜的GV期卵母细胞,分别设置相应的对照处理方式:新鲜细胞不进行成熟处理(C1组)、成熟处理20 h(C2组),成熟处理40 h(C3组)。各处理组细胞经转录组测序后,采用Trimmomatic(v0.36)软件对原始数据进行过滤,并对后续数据进行分析。过滤后将原始数据与参考基因库比对,进行注释分析和甲基化位点识别,比较各处理组之间的甲基化水平。结果显示,T1、T2组甲基化水平分别大于C1、C2组,T3组甲基化水平小于C3组;各冷冻处理组卵母细胞的CpGs甲基化水平为T1组>T2组>T3组。共选择出总体差异基因1 269个,玻璃化冷冻处理细胞与未冷冻处理细胞之间具有差异的基因确定为677个。GFM1与MRPL15基因甲基化差异最为显着,基因通路富集到线粒体延伸途径中,这是导致玻璃化冷冻后驴卵母细胞成熟率较低的因素。研究结果为确定卵母细胞冷冻最佳条件奠定了试验基础。(本文来源于《畜牧与饲料科学》期刊2019年05期）
韩颢,白虹[4]（2019）在《无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究》一文中研究指出目的:探讨无血清培养基对冻存后的间充质干细胞(HUC-MSCs)免疫调节功能的影响,明确其成脂成骨生物学特性,为临床应用奠定基础。方法:(1)分离脐带中的HUC-MSCs,传代纯化后深低温冻存。(2)冻融后的HUC-MSCs分别以含10%胎牛血清的培养基(SCM),无血清培养基两种培养条件培养。(3)观察两组细胞生长状态,革兰染色计数,计算细胞活率。(4)流式细胞术检测两组细胞的表面标志物。(5)成脂成骨诱导,茜红素染色和油红染色观察诱导情况。结果:(1)两组细胞均以漩涡状贴壁,无血清培养基培养的细胞体积略小。(2)在细胞总数及活性方面,两组细胞有些微差异,可忽略不计。(3)流式细胞术显示其对PE-CD34不表达,对PE-CD105、PE-CD90、PE-CD73、PE-CD44和PE-CD29高表达。(4)对无血清培养基(SFM)所培养得到的HUC-MSCs历经约21 d的成骨细胞和脂肪细胞专向分化诱导,发现其具有可媲美SCM培养的HUC-MSCs的分化能力。结论:无血清培养基同有血清培养基相比,对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫调节功能无明显差异,可替代有血清培养基进行细胞培养。(本文来源于《天津医科大学学报》期刊2019年03期）
金鑫,张曼,王云鹤,魏方,温婧怡[5]（2019）在《绵羊瘤胃上皮细胞的体外分离培养、冻存及复苏方法》一文中研究指出本研究旨在建立绵羊瘤胃上皮细胞(Ovine rumen epithelial cells,ORECs)的分离培养、冻存和复苏方法,为反刍动物瘤胃功能的研究和相关瘤胃疾病的发病机制研究提供功能性的细胞模型。以绵羊瘤胃为研究对象,采用胰蛋白酶连续消化法对瘤胃组织进行不同时间(40、30、20、10、10、8和5 min)的消化,并对每次消化后的瘤胃组织和消化液分别进行H.E染色分析和显微镜观察,以确定细胞开始收集及终止消化的时间,最后将收集的瘤胃上皮细胞进行原代培养。在传代培养时,运用差时消化法和差速贴壁法对ORECs进行纯化,并从细胞形态学、细胞生长曲线、角蛋白18(CK-18)免疫荧光染色和上皮细胞标志物E-钙黏蛋白和碱性磷酸酶基因表达等方面对ORECs进行鉴定。然后设置不同体积配方的冻存液,将传代细胞进行冻存,通过检测复苏后的细胞活力和24 h贴壁率确定最佳冻存液配方。结果表明:第4次消化后就基本消化到瘤胃组织的棘层,此时即可开始收集细胞;第7次消化完后瘤胃上皮的基底层细胞基本被消化掉,此时即可终止消化细胞。经纯化后传代的细胞呈现均一的"铺路石"形态,生长曲线明显呈"S"形,且经CK-18免疫荧光染色后鉴定为阳性,同时PCR检测到上皮细胞特异性标志蛋白E-钙黏蛋白和碱性磷酸酶均有表达。此外,ORECs经不同体积配方冻存液冻存复苏后发现,冻存液配方为V_(FBS)∶V_(DMEM)∶V_(DMSO)=9∶0∶1时ORECs的细胞活力及贴壁率最高,且传代后的细胞生长状况良好。因此本试验成功建立了ORECs的体外分离培养、冻存和复苏方法。(本文来源于《中国农业大学学报》期刊2019年05期）
林科佳,刘赴平,马冬磊,胡锐,魏宗科[6]（2019）在《冻存密度对外周血单个核细胞冻存效果的影响》一文中研究指出探讨冻存密度对外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)冻存效果的影响。设定新鲜PBMC组(F组)及3个PBMC冻存密度组即2.0×10~7/mL(A组),4.0×10~7/mL(B组),6.0×10~7/mL(C组)。通过对冻存前后的PBMC活率及复苏后多种细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokine-induced killer,CIK)的扩增倍数、淋巴细胞亚群、体外杀伤效率进行比较,验证其冻存效果。结果显示,冻存前F组与冻存后A组、B组、C组的细胞活率分别为(96.0±0.3)%、(95.6±0.4)%、(94.7±0.2)%和(94.9±0.4)%,B组与C组显着低于A组,P<0.05;细胞扩增14 d后,F组与A组、B组、C组细胞扩增倍数分别为(156.4±18.2)倍、(160.2±28.4)倍、(126.1±19.8)倍和(110.4±11.3)倍,B组与C组显着低于F组(P<0.05);PBMC冻存前复苏后淋巴细胞亚群结果无显着差异。与F组相比,A组、B组、C组细胞扩增14 d后,CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3-CD56+、CD3+CD56+淋巴细胞亚群无显着差异(P>0.05),体外杀伤效率无显着差异(P>0.05)。过高的冻存密度会影响PBMC冻存效果而间接影响细胞的复苏应用,而过低的冻存密度则增加冻存体积而大大提高冻存成本,因此,选择合适的细胞冻存密度是细胞库或细胞银行必须要考虑的问题。(本文来源于《生物技术通报》期刊2019年06期）
付亚茹,孙阳阳,王洪星,刘小盾,曲廷瑜[7]（2019）在《冻存脐带血中内皮祖细胞的分离培养及生物学特性鉴定》一文中研究指出目的:建立和开发一种新型的从冻存脐带血中分离培养内皮祖细胞(EPC)的方法,探讨其生物学特性,提高冻存脐带血分离获得EPC的成功率。方法:自液氮罐中收集公共库中2000年至2001年保存的12例冻存脐带血,37℃水浴锅中快速复苏后,磷酸缓冲盐溶液(PBS缓冲液)洗涤,获得总有核细胞(TNCs),将TNCs接种至培养皿中诱导扩增EPC。使用流式细胞术和免疫荧光方法鉴定EPC并确定纯度。采用下列方法体外鉴定内皮祖细胞的功能:荧光显微镜观察细胞特异性摄取Dil-Ac-LDL和FITC-UEA-I的功能、在基质胶中形成毛细管样结构的情况,ELISA法检测释放VEGF因子的功能。结果:培养3周后,出现1-5个鹅卵石铺路石样内皮祖细胞集落。体外培养第1-3代EPC,其表面CD31、CD34、CD144和VEGFR (CD309)标记阳性率分别为(92. 91±5. 20)%、(30. 0±23. 27)%、(88. 55±3. 83)%和(67. 21±12. 12)%。EPC细胞具有特异性内吞Dil-Ac-LDL和FITCUEA-I、形成毛细管结构,释放低浓度VEGF因子等功能。结论:采用本方法从冻存脐带血中分离EPC的稳定性与重复性高,从冻存的脐带血中分离EPC的成功率可提高至85%。该方法为临床应用丰富的内皮祖细胞奠定了基础。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2019年01期）
游小燕,何琦琳,刘雪芹,葛良鹏[8]（2019）在《一种无血清冻存液在猪胎儿成纤维细胞上的应用研究》一文中研究指出在猪胎儿成纤维细胞(porcine fetal fibroblasts, PFF)冻存过程中,血清品质常常制约着细胞的冻存效果。为了解决这个问题,本研究旨在开发一种无血清冻存液应用于猪胎儿成纤维细胞冻存。用3种不同冻存液冻存猪胎儿成纤维细胞,每种冻存10管。冻存30 d后复苏细胞,测定冻存细胞存活率,细胞增殖活力以及电转后细胞活性。结果显示:自制无血清细胞冻存液,冻存猪胎儿成纤维细胞后存活率达95.33%;细胞增殖活力以及电转后细胞活性均显着高于标准胎牛血清冻存液(p<0.05),与特级胎牛血清冻存液效果相当(p>0.05)。因此,自制冻存液冻存猪胎儿成纤维细胞效果稳定,能够替代含血清冻存液,有良好的推广应用前景。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年01期）
宋腾飞[9]（2018）在《单采后造血干细胞CD34~+百分率受冻存前放置时间影响的分析》一文中研究指出目的分析单采后冻存前放置时间对造血干细胞(HSC)CD34~+百分率的影响。方法选取外周血造血干细胞移植(PBSCT)的33例(96次采集数据)患者作为研究对象,对单采后血细胞分别进行采集后0、24、48、72、>72 h的台盼蓝拒染率及CD34~+百分率进行检测分析。结果台盼蓝拒染率随着时间的推移呈上升趋势,在72 h内较稳定,>72 h后下降明显, ISHAGH设门方法检测CD34~+百分率呈逐渐下降趋势,下降不明显,>72 h后下降明显,由此可见单采后动员的细胞尽量在24 h内冻存处理,最长不要超过72 h。结论支持4℃保存造血干细胞只适合于72 h内移植用。(本文来源于《中国现代药物应用》期刊2018年24期）
任召祺,张铮,原杰,杜彬,李军[10]（2018）在《外周血造血干细胞的采集、冻存与质量检测的研究》一文中研究指出目的探讨外周血造血干细胞(peripheral blood stem cells,PBSCs)的采集、低温冷冻保存、复苏与质检的方法。方法 2014年6月至2016年12月火箭军总医院成功采集191人次PBSCs,在无菌条件下加入主要成分为二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide, DMSO)的冷冻保存液,经程序降温仪降至-80℃后置于-196℃液氮保存。冻存前和解冻后分别进行单个核细胞(mononuclear cell, MNC)和CD34+细胞计数及粒单系祖细胞集落(colony forming unit granu-locyte-macrophages, CFU-GM)培养。结果共成功冻存266份的造血干细胞。采集的干细胞成品量、细胞浓度、MNC计数、CD34+计数、CFU-GM均值分别为(164.12±97.71)ml、(3.00±0.87)×10~(11)个、(4.36±1.39)×10~8/kg、(5.76±1.32)×10~6/kg、(80.00±19.00)×10~6。对复苏的178份造血干细胞进行质量检测,MNC和CD34+细胞计数、CFU-GM回收率及台盼蓝拒染率分别为(95.64±2.72)%、(93.92±3.51)%、(91.25±3.13)%和(94.10±6.00)%。冻存前后的外周血干细胞均可满足临床移植的需求。结论本研究采用的PBSCs采集、低温冷冻保存、复苏与质检的方法对干细胞损伤较小,安全有效,适合临床推广使用。(本文来源于《北京医学》期刊2018年11期）
细胞冻存论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的以无支架软骨膜片为模型,研究冻存对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力的影响。方法将小耳畸形患者术中废弃的残耳软骨,以胶原酶消化、分离,得到原代软骨细胞。将软骨细胞扩增至第1代(P1)后,分为实验组及对照组。实验组(Exp)以含有FBS和DMSO的冻存液,经程控降温仪和液氮冻存1个月后复苏,高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨;对照组(Ctrl)不经冻存继续扩增至第3代(P3),高密度接种,制备软骨膜片及可注射软骨。通过光学显微镜、CCK-8、活/死细胞染色、HE和阿利新蓝染色等,检测细胞形态、活力、增殖能力及软骨特异基质(ECM)的表达能力。通过每组体外软骨膜片的湿重、体积及生化成分定量检测,确定软骨细胞的体外成软骨能力。将每组软骨膜片制成新生软骨颗粒(可注射软骨),注射至裸鼠皮下(n=5),8周后取材,行大体观察、HE染色和生化成分定量检测,比较每组软骨细胞的体内成软骨能力。结果两组细胞的形态、活力、增殖能力和软骨特异的糖胺聚糖(GAG)形成能力无明显差异。相比对照组,实验组体外再生软骨的湿重及总胶原表达升高;但体内软骨再生能力两组亦无明显差异。结论细胞冻存复苏对人耳软骨细胞的细胞活力、增殖和体外/体内软骨再生能力无明显影响。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞冻存论文参考文献
[1].李莹,王英,罗浩虹,吴娟英.冻存复苏及4℃存放对成纤维细胞的影响[J].科技视界.2019
[2].于瑶,殷宗琦,李丹,周广东,曹谊林.人耳软骨细胞冻存复苏后的体外成软骨能力及体内转归的研究[J].组织工程与重建外科杂志.2019
[3].李强,庞玉娟,武艺,张焱如,曹俊伟.玻璃化冻存对蒙古驴卵母细胞甲基化及GFM1、MRPL15基因表达水平的影响[J].畜牧与饲料科学.2019
[4].韩颢,白虹.无血清培养基对深低温冻存复苏后的间充质干细胞免疫功能的研究[J].天津医科大学学报.2019
[5].金鑫,张曼,王云鹤,魏方,温婧怡.绵羊瘤胃上皮细胞的体外分离培养、冻存及复苏方法[J].中国农业大学学报.2019
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[7].付亚茹,孙阳阳,王洪星,刘小盾,曲廷瑜.冻存脐带血中内皮祖细胞的分离培养及生物学特性鉴定[J].中国实验血液学杂志.2019
[8].游小燕,何琦琳,刘雪芹,葛良鹏.一种无血清冻存液在猪胎儿成纤维细胞上的应用研究[J].基因组学与应用生物学.2019
[9].宋腾飞.单采后造血干细胞CD34~+百分率受冻存前放置时间影响的分析[J].中国现代药物应用.2018
[10].任召祺,张铮,原杰,杜彬,李军.外周血造血干细胞的采集、冻存与质量检测的研究[J].北京医学.2018
论文知识图
