导读:本文包含了巨核祖细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:细胞,肝素,胃癌,骨髓,脐带血,地榆,紫癜。
巨核祖细胞论文文献综述
代燕平,高小平,吴建明,李翔,黄飞鸿[1]（2014）在《地榆总皂苷对巨核祖细胞增殖分化及相关受体表达的影响》一文中研究指出目的:观察地榆总皂苷(DYS)对Baf3细胞和32D细胞的促增殖和分化作用,以及对IL-3受体和干细胞因子受体c-kit表达水平的影响。方法:培养依赖IL-3生长的Baf3细胞和32D细胞,在加或不加IL-3条件下,用质量浓度为5,10,20,30,40 mg·L-1的DYS分别处理细胞24,48,72,96 h后,采用CCK8方法检测细胞增殖;并用Giemsa染色检测细胞分化;另以RT-PCR方法检测DYS对Baf3细胞IL-3受体及对32D细胞c-kit表达水平的影响。结果:DYS单独处理细胞48 h,明显促进Baf3细胞和32D细胞增殖;与对照细胞比较,DYS处理32D细胞呈现成簇生长并形成许多大的细胞团;在加入IL-3的条件下,DYS也能明显增强IL-3的促细胞增殖作用。此外,DYS高浓度单独处理32D细胞可明显诱导多倍体巨核细胞数增加,促进巨核细胞分化。在mRNA水平,DYS单独处理细胞也能明显上调IL-3受体和c-kit的表达。结论:地榆总皂苷单独作用能促使2种巨核祖细胞的增殖和分化,其作用与上调IL-3受体和c-kit表达水平有关。(本文来源于《中国中药杂志》期刊2014年09期）
雷慧芬[2]（2011）在《构建人巨核祖细胞/胃癌细胞融合体生成血小板的实验研究》一文中研究指出目的:探讨通过聚乙二醇(PEG)细胞化学融合法构建人脐带血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,并通过RPMI1640培养基继续培养使其产生功能性血小板的可行性。这一研究可为临床大量制备血小板提供一种新方法。方法:第一部分:人脐带血干细胞体外扩增为巨核祖细胞及胃癌SGC7901细胞的复苏培养。用免疫磁珠分选人脐带血CD34~+细胞,通过RPMI1640培养基体外静态培养,加入定向分化因子促血小板生成素(TPO)、Flt-3配体(FL)、白介素-3(IL-3)、白介素-6(IL-6)产生巨核祖细胞,并对其培养7天(d)的增殖程度进行观察,检测其表面标志CD41、CD61的表达水平;复苏胃癌SGC7901细胞。第二部分:采用PEG化学融合法制备巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,HAT筛选系统分选融合细胞,继续培养;流式细胞计数仪(FACS)检测培养孔上层液中类血小板颗粒表面CD41、CD62p的表达情况,瑞氏染色观察颗粒形态,血小板聚集试验、粘附试验检测其功能,并与正常单采血小板(保存5d)作比较。结果:1. CD34~+细胞培养及胃癌SGC7901细胞复苏:脐带血CD34~+细胞培养第7d,可见细胞生长旺盛,出现许多集落。胃癌SGC7901细胞复苏第3d,细胞处于对数生长期。2.巨核祖细胞表面标志鉴定:免疫磁珠分选的脐带血CD34~+细胞计数,培养第7d,增殖达80倍,同时流式细胞仪检测其表面标志CD41和CD61,测得其双阳性率第1d为13.59±2.20%,第7d上升至30.66±2.38%。3.细胞融合及类血小板颗粒产生:巨核祖细胞与胃癌细胞融合第1d,倒置显微镜下可见两细胞间部分胞质胞膜已融合,融合部分胞膜完整连续,体积变大,形态规则。融合后第10~d细胞多呈圆形,单个存在,生长状态良好。观察细胞融合率(细胞效靶比:10~:1),融合后细胞计数可达(2.03±1.08)×10~6,融合率为36.91±1.08%。融合细胞培养动态计数:随着培养时间的延长,融合细胞培养10~d,第1、3、5、10~d分别计数,细胞浓度分别为:(5.00±0.00)×10~4/ml、(7.30±0.29)×10~4/ml、(1.50±0.56)×10~5/ml、(2.30±0.93)×10~5/ml,平均增殖约4倍。产生的类血小板颗粒动态计数,第1、3、5、10~d分别为:0、(5.00±0.12)×10~5/ml、(2.60±0.88)×10~6/ml、(6.10~±1.21)×10~6/ml。4.类血小板颗粒鉴定:①形态观察:融合细胞培养10~d,取其培养上层液沉淀颗粒与正常血小板瑞氏染色后比较,其形态相似。②聚集功能鉴定:正常单采血小板和融合细胞培养10d后获得的上层液中沉淀颗粒在未加凝血酶时呈散在分布;加入凝血酶后,两者均发生聚集,且其凝集强度相似,表示类血小板颗粒具有正常血小板相似的聚集功能。③黏附功能鉴定:.融合细胞培养10d产生的类血小板颗粒和正常单采血小板的粘附率分别为40.43±1.63%和35.53±4.06%,两者间无明显差异(t=1.94,P>0.05)。④表面标志测定:融合细胞培养10~d产生的类血小板颗粒和正常单采血小板分别进行血小板表面CD41、CD62p检测,两者CD62p(血小板活化指标)表达相似(t=2.24,P>0.05),CD41表达在类血小板颗粒中明显减少(t=6.59,P<0.05)。结论:1.人脐带血CD34~+细胞在特定的培养体系中可定向分化为巨核祖细胞。2.胃癌SGC7901细胞与巨核祖细胞经化学法诱导融合和选择性培养,可成功获得融合细胞。3.融合细胞通过RPMI1640培养基继续培养可产生类血小板颗粒,且具有与正常血小板相似的功能。(本文来源于《第叁军医大学》期刊2011-05-01）
雷慧芬,范娅涵,孟强,尹智平,陆华[3]（2011）在《体外构建人巨核祖细胞/胃癌细胞融合体生成血小板的研究》一文中研究指出目的构建脐血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体产生功能性血小板。方法免疫磁珠分选人脐带血CD34+细胞,通过RPMI1640培养基体外静态培养,加入定向分化因子TPO、FL、IL-3、IL-6产生巨核祖细胞;复苏胃癌SGC7901细胞;采用聚乙二醇(PEG)化学融合法制备巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,HAT筛选系统分选融合细胞,继续培养;流式细胞仪检测培养孔上层液中类血小板颗粒表面CD41、CD62p表达,血小板聚集试验、粘附试验检测血小板功能,瑞氏染色观察颗粒形态。结果免疫磁珠分选的CD34+细胞培养7 d可增殖80倍,与胃癌SGC7901细胞株经PEG化学融合法融合成巨核祖细胞/胃癌细胞,融合率为(36.91±1.08)%;融合细胞培养10 d可增殖4倍,产生(6.1±1.21)×106/ml的类血小板颗粒;瑞氏染色后观察,其形态与正常血小板相似。类血小板颗粒表达血小板特异性标志CD41及血小板活化后标志CD62p,与正常血小板比较,CD62p在类血小板颗粒中表达略降低:正常血小板(74.11±1.71)%、类血小板颗粒(71.04±1.64)%;CD41表达明显降低:正常血小板(88.83±3.26)%、类血小板颗粒(72.51±2.79)%(t=6.59,P<0.05);聚集试验表明具有正常血小板相似的聚集功能;血小板粘附试验:正常血小板(40.43±1.63%)、类血小板颗粒(35.53±4.06%)。结论通过PEG细胞化学融合法构建的脐带血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体能产生功能性血小板。(本文来源于《中国输血杂志》期刊2011年04期）
何祎,孟恒星,张宇光,侯士芳,王华[4]（2008）在《脐血和骨髓来源的CD34~+细胞体外扩增巨核祖细胞差异的研究》一文中研究指出本研究探讨脐血(CB)和骨髓(BM)来源的CD34+细胞体外扩增巨核祖细胞的差异。采用Ficoll-Hypaque分离法分离人CB及BM单个核细胞,免疫磁珠法制备CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO)、TPO+白介素11(IL-11)或TPO+IL11+肝素的无血清液体培养体系中培养14天。流式细胞术检测扩增产物(CD34+、CD41a+及CD34+CD41a+细胞)免疫表型、巨核细胞凋亡率及DNA含量,并以集落形成单位测定法进行粒巨-噬细胞集落形成单位(CFU-GM)、红系爆式集落形成单位(BFU-E)及巨核细胞集落形成单位(CFU-Mk)计数。结果表明:14天培养中,CB来源细胞在总细胞数、CD41a+及CD34+CD41a+细胞扩增倍数上均高于BM(p均<0.05)。0天CB及BM来源CD34+细胞在CFU-GM、BFU-E及总的CFU-Mk的形成能力上无显着性差异(p均>0.05),但CB来源CD34+细胞形成的CFU-Mk以大集落为主,其数量高于BM(p<0.05);在培养7、10和14天,CB及BM来源细胞CFU-GM扩增倍数无显着性差异(p均>0.05),但CB来源细胞的BFU-E及总的CFU-Mk扩增倍数均高于BM(p均<0.05)。14天培养中CB和BM来源巨核细胞的凋亡率无显着性差异(p均>0.05)。DNA含量检测发现,14天培养中CB来源巨核细胞始终以2N细胞为主(比例>90%),而BM来源巨核细胞随着培养时间延长,4N、8N及以上倍体巨核细胞比例逐渐增加。结论:CB来源CD34+细胞体外扩增巨核祖细胞能力高于BM,它可能是巨核祖细胞体外扩增较好的来源。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2008年06期）
何祎,孟恒星,张宇光,侯士芳,李茜[5]（2008）在《脐血CD34~+细胞体外扩增脐血巨核祖细胞的研究》一文中研究指出本研究探讨人脐血CD34+细胞体外扩增的巨核祖细胞的生物学特性及其免疫原性变化,为体外扩增脐血巨核祖细胞的临床应用提供实验依据。采用Ficoll-Hapaque分离法分离人脐血单个核细胞,应用免疫磁珠法(MACS)再分离富集CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO,50ng/ml)、白介素-11(IL-11,50ng/ml)和肝素(25U/ml)的无血清液体培养体系中培养14天。用流式细胞术检测扩增产物免疫表型(CD34+、CD41a+、CD61+、CD34+CD41a+及CD34+CD61+)、巨核细胞凋亡率及其表面HLAⅠ、Ⅱ类分子的表达,并进行巨核细胞集落形成单位(CFU-Mk)的检测。结果显示:脐血CD34+细胞能够有效地向巨核细胞分化,CD41a+和CD61+细胞比例在培养第14天达到峰值,CD34+CD41+和CD34+CD61+细胞比例在扩增第7天达到最高峰〔分别为(3.41±2.80)%和(1.89±1.43)%〕;CFU-Mk大集落在扩增第7天达到高峰〔(20.66±32.79)倍〕,小集落在扩增第10天达到高峰〔(435.62±482.65)倍〕;在培养7、10和14天时巨核细胞的凋亡率分别为(19.48±9.64)%、(26.87±9.03)%和(52.46±11.74)%,其中培养7天和10天的凋亡率无显着性差异(p>0.05),培养14天的凋亡率显着高于7天和10天(p均<0.05);巨核细胞表面HLAⅠ、Ⅱ类分子的表达随着扩增天数的延长逐渐降低,其中培养0到10天阶段下降明显。结论:采用TPO+IL11+肝素组合,可以有效地扩增脐血巨核祖细胞;培养7天,CFU-Mk大集落扩增倍数、CD34+CD41+和CD34+CD61+细胞比例均达高峰,这是巨核祖细胞体外扩增的较佳培养时间。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2008年05期）
白松婷,盛光耀,赵晓明,邹湘[6]（2007）在《体外无血清培养骨髓巨核祖细胞对ITP早期分型的临床意义》一文中研究指出目的:探讨体外无血清培养骨髓巨核祖细胞对特发性血小板减少性紫癜(idiopathic throm bocytopenic purpura,ITP)早期分型的临床意义。方法:分别检测27例急性ITP(急性组)、14例慢性ITP(慢性组)患儿和10例骨髓检查造血功能正常、排除血液系统疾病儿童(对照组)的骨髓巨核细胞标化计数、体外无血清培养的骨髓巨核细胞集落形成单位(colony forming unit-megakaryocyte,CFU-MK)和骨髓巨核细胞爆式集落形成单位(burst forming unit-megakaryocyte,BFU-MK),并进行比较。结果:急性组骨髓巨核细胞标化计数高于对照组(P<0.01),且CFU-MK、BFU-MK均明显高于慢性组和对照组(P<0.05,P<0.01);慢性组骨髓巨核细胞标化计数高于对照组(P<0.05),CFU-MK、BFU-MK与对照组比较差异均无统计学意义(均为P>0.05)。慢性组2例BFU-MK缺如。结论:在体外无血清培养的条件下,因去除了血小板抗体的影响,急性ITP及慢性ITP患儿的骨髓巨核祖细胞均呈增生活跃,但在集落形成数量方面则出现明显差异,说明急性ITP及慢性ITP患儿的病理生理过程存在差异,因此,可应用体外无血清培养骨髓巨核祖细胞来观察BFU-MK、CFU-MK的形成差异来进行ITP的早期分型,对治疗方案的选择有重要的指导作用。(本文来源于《新医学》期刊2007年04期）
冯义,肖志坚,徐世才,卢士红,刘斌[7]（2006）在《脐带血巨核祖细胞的体外扩增》一文中研究指出目的联合血小板生成素(TPO)、白细胞介素-11(IL-11)和肝素用脐带血CD34+细胞定向扩增巨核祖细胞。方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34+细胞,用TPO、IL-11和肝素定向扩增巨核祖细胞,巨核祖细胞集落分析(CFU-MK)测定巨核祖细胞扩增倍数,流式细胞术检测巨核祖细胞分化过程中不同细胞组群(CD34+、CD41a+、CD61+、CD34+CD41a+和CD41a+CD61+)的变化,免疫组织化学染色(CD41a)和透射电镜观察巨核细胞形态及趟微结构,血小板体外活化实验及非肥胖性糖尿病／严重联合免疫缺陷鼠异种体内移植实验评价扩增的巨核祖细胞功能。(本文来源于《生物医学工程与临床》期刊2006年S1期）
夏婷,方建培,吴燕峰,徐宏贵,魏菁[8]（2006）在《动员人外周血巨核祖细胞体外扩增的研究》一文中研究指出本研究探讨多种细胞因子(TPO、SCF、FL、IL-1、IL-3、IL-6)组合的几种培养体系对人外周血CD34+细胞体外诱导扩增生成巨核细胞的作用,研究人外周血来源的巨核细胞体外扩增的最佳细胞因子组合及培养时间。用Ficoll-Hapaque分离法分离动员的外周血(MPB)单个核细胞,免疫磁珠法分离纯化CD34+细胞,并将其在含胎牛血清的液体培养体系中、各组细胞因子诱导下培养15天。在不同时间点采用血细胞计数板进行细胞计数,采用流式细胞术检测培养体系中CD41+细胞的含量;同时采用甲基纤维素半固体培养法进行巨核细胞集落培养,测定巨核细胞集落形成单位(CFU-MK)的数量。结果表明经过15天的培养,在MPB来源的CD34+细胞体外诱导并扩增巨核祖细胞体系中,以TPO/FL/IL-6/IL-3组合的扩增效果最好,明显高于其它3组,CD41+细胞第5天、10天分别扩增了93.97±17.27倍、131.23±18.26倍。第15天CD41+细胞含量及CD41+细胞数迅速下降。CFU-MK产率(/1×103个细胞)第5天、10天分别为83.33±10.02个、120.67±13.01个,明显高于其余3组。结论以TPO/FL/IL-6/IL-3因子组合为体外诱导扩增巨核祖细胞的最佳组合,动员外周血的巨核祖细胞体外诱导扩增以培养第10天为宜。本实验建立了动员人外周血来源的巨核祖细胞体外扩增体系。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2006年04期）
冯义,肖志坚,徐世才,卢士红,刘斌[9]（2006）在《脐带血巨核祖细胞的体外扩增》一文中研究指出目的联合血小板生成素(YPO)、白细胞介素-11(IL-11)和肝素用脐带血 CD34~+细胞定向扩增巨核祖细胞。方法采用免疫磁珠法(MACS)分选 CD34~+细胞,用 TPO、IL-11和肝素定向扩增巨核祖细胞,巨核祖细胞集落分析(CFU-MK)测定巨核祖细胞扩增倍数,流式细胞术检测巨核祖细胞分化过程中不同细胞组群(CD34~+、(本文来源于《天津市生物医学工程学会2006年学术年会论文摘要集》期刊2006-06-30）
陈舒,朱发明,何吉,刘晋辉,秦斐[10]（2005）在《GM-CSF对脐血CD34~+巨核祖细胞体外扩增及分化的影响》一文中研究指出本实验旨在研究GMCSF对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞的影响。采用免疫磁珠法分选CD34+细胞,在含有TPO+IL3+SCF并添加了不同浓度(5、20、100ng/ml)的GMCSF的无血清培养基中进行培养。培养6、10、14天后计数单个核细胞(MNC),检测CD41+细胞比例和CFUMK。结果表明,培养14天后3种不同浓度GMCSF对MNC均有明显的扩增作用,其中以20和100ng/mlGMCSF的扩增效果较好。3种不同浓度的GMCSF均使CD41+细胞比例增加,20和100ng/ml与5ng/mlGMCSF相比更能提高CD41+细胞的比例。5和20ng/ml的GMCSF能促进CFUMK的形成,但100ng/ml的GMCSF却抑制CFUMK的形成。结论:在TPO+IL3+SCF细胞因子组合中添加GMCSF有利于促进脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞。(本文来源于《中国实验血液学杂志》期刊2005年06期）
巨核祖细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨通过聚乙二醇(PEG)细胞化学融合法构建人脐带血巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,并通过RPMI1640培养基继续培养使其产生功能性血小板的可行性。这一研究可为临床大量制备血小板提供一种新方法。方法:第一部分:人脐带血干细胞体外扩增为巨核祖细胞及胃癌SGC7901细胞的复苏培养。用免疫磁珠分选人脐带血CD34~+细胞,通过RPMI1640培养基体外静态培养,加入定向分化因子促血小板生成素(TPO)、Flt-3配体(FL)、白介素-3(IL-3)、白介素-6(IL-6)产生巨核祖细胞,并对其培养7天(d)的增殖程度进行观察,检测其表面标志CD41、CD61的表达水平;复苏胃癌SGC7901细胞。第二部分:采用PEG化学融合法制备巨核祖细胞/胃癌SGC7901细胞融合体,HAT筛选系统分选融合细胞,继续培养;流式细胞计数仪(FACS)检测培养孔上层液中类血小板颗粒表面CD41、CD62p的表达情况,瑞氏染色观察颗粒形态,血小板聚集试验、粘附试验检测其功能,并与正常单采血小板(保存5d)作比较。结果:1. CD34~+细胞培养及胃癌SGC7901细胞复苏:脐带血CD34~+细胞培养第7d,可见细胞生长旺盛,出现许多集落。胃癌SGC7901细胞复苏第3d,细胞处于对数生长期。2.巨核祖细胞表面标志鉴定:免疫磁珠分选的脐带血CD34~+细胞计数,培养第7d,增殖达80倍,同时流式细胞仪检测其表面标志CD41和CD61,测得其双阳性率第1d为13.59±2.20%,第7d上升至30.66±2.38%。3.细胞融合及类血小板颗粒产生:巨核祖细胞与胃癌细胞融合第1d,倒置显微镜下可见两细胞间部分胞质胞膜已融合,融合部分胞膜完整连续,体积变大,形态规则。融合后第10~d细胞多呈圆形,单个存在,生长状态良好。观察细胞融合率(细胞效靶比:10~:1),融合后细胞计数可达(2.03±1.08)×10~6,融合率为36.91±1.08%。融合细胞培养动态计数:随着培养时间的延长,融合细胞培养10~d,第1、3、5、10~d分别计数,细胞浓度分别为:(5.00±0.00)×10~4/ml、(7.30±0.29)×10~4/ml、(1.50±0.56)×10~5/ml、(2.30±0.93)×10~5/ml,平均增殖约4倍。产生的类血小板颗粒动态计数,第1、3、5、10~d分别为:0、(5.00±0.12)×10~5/ml、(2.60±0.88)×10~6/ml、(6.10~±1.21)×10~6/ml。4.类血小板颗粒鉴定:①形态观察:融合细胞培养10~d,取其培养上层液沉淀颗粒与正常血小板瑞氏染色后比较,其形态相似。②聚集功能鉴定:正常单采血小板和融合细胞培养10d后获得的上层液中沉淀颗粒在未加凝血酶时呈散在分布;加入凝血酶后,两者均发生聚集,且其凝集强度相似,表示类血小板颗粒具有正常血小板相似的聚集功能。③黏附功能鉴定:.融合细胞培养10d产生的类血小板颗粒和正常单采血小板的粘附率分别为40.43±1.63%和35.53±4.06%,两者间无明显差异(t=1.94,P>0.05)。④表面标志测定:融合细胞培养10~d产生的类血小板颗粒和正常单采血小板分别进行血小板表面CD41、CD62p检测,两者CD62p(血小板活化指标)表达相似(t=2.24,P>0.05),CD41表达在类血小板颗粒中明显减少(t=6.59,P<0.05)。结论:1.人脐带血CD34~+细胞在特定的培养体系中可定向分化为巨核祖细胞。2.胃癌SGC7901细胞与巨核祖细胞经化学法诱导融合和选择性培养,可成功获得融合细胞。3.融合细胞通过RPMI1640培养基继续培养可产生类血小板颗粒,且具有与正常血小板相似的功能。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
巨核祖细胞论文参考文献
[1].代燕平,高小平,吴建明,李翔,黄飞鸿.地榆总皂苷对巨核祖细胞增殖分化及相关受体表达的影响[J].中国中药杂志.2014
[2].雷慧芬.构建人巨核祖细胞/胃癌细胞融合体生成血小板的实验研究[D].第叁军医大学.2011
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[4].何祎,孟恒星,张宇光,侯士芳,王华.脐血和骨髓来源的CD34~+细胞体外扩增巨核祖细胞差异的研究[J].中国实验血液学杂志.2008
[5].何祎,孟恒星,张宇光,侯士芳,李茜.脐血CD34~+细胞体外扩增脐血巨核祖细胞的研究[J].中国实验血液学杂志.2008
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[8].夏婷,方建培,吴燕峰,徐宏贵,魏菁.动员人外周血巨核祖细胞体外扩增的研究[J].中国实验血液学杂志.2006
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[10].陈舒,朱发明,何吉,刘晋辉,秦斐.GM-CSF对脐血CD34~+巨核祖细胞体外扩增及分化的影响[J].中国实验血液学杂志.2005
论文知识图
