抗肿瘤多肽基因重组、纯化方法改进及活性研究

抗肿瘤多肽基因重组、纯化方法改进及活性研究

论文摘要

目的改进抗肿瘤多肽30肽纯化方法并测定其活性。方法设计并合成His标签序30肽序列,与PTYB21重组后转化到大肠埃希菌Rosetta(DE3) pLysSS菌株,再经IPTG诱导、镍离子柱纯化后经SDS-PAGE电泳检测融合蛋白表达情况,DTT裂解后G25葡聚糖凝胶层析分离30肽,测定浓度、纯度后,计算产量,MTT检测30肽抗肿瘤活性。结果重组的PTYB21-His-30肽大量地表达融合蛋白,经镍离子柱层析的纯化的30肽与传统提取方法几丁质层析方法总产量基本一致,并且具有较好的抗肿瘤活性。结论重组的抗肿瘤多肽表达载体经镍离子层析后能够纯化出理想的30肽,该纯化方法操作流程简单、节约成本,有利于抗肿瘤多肽的大规模提取。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 30肽质粒构建:
  •     1.2.2 30肽的表达:
  •     1.2.3 30肽的纯化:
  •     1.2.4 MTT比色实验:
  •     1.2.5 统计学处理:
  • 2 结果
  •   2.1 基因重组后的质粒中30肽序列测定结果
  •   2.2 抗肿瘤30肽融合蛋白表达
  •   2.3 抗肿瘤30肽的纯化、提取
  •   2.4 MTT实验结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 郑天虎,刘兴汉,赵玲,王立新

    关键词: 抗肿瘤多肽,组氨酸标签,蛋白质纯化,层析

    来源: 哈尔滨医科大学学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 药学

    单位: 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学研究室,哈尔滨医科大学药学院药理学教研室

    基金: 黑龙江省自然科学基金面上项目(H2015014)

    分类号: R979.1

    页码: 561-564

    总页数: 4

    文件大小: 1206K

    下载量: 73

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