导读:本文包含了叶片特异表达启动子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,水稻,玉米螟,叶片,荔枝,衰老,玉米。
叶片特异表达启动子论文文献综述
孙琴[1]（2016）在《荔枝组织特异表达基因分析及叶片特异启动子的分离与鉴定》一文中研究指出转基因育种具有可定向改良性状,育种周期短等优势,是荔枝遗传改良的重要潜在育种手段。适宜的植物表达载体是转基因育种技术的关键,启动子是构建载体的核心元件。包含组织特异型启动子的载体可介导外源基因在特定组织表达,具有更多应用价值。本研究通过比较荔枝叶、根、果皮、果肉以及果核等不同组织的转录组差异,筛选获得组织特异性表达基因。以获得的其中两个叶片特异表达基因为对象,分别克隆获得了其启动子,构建连有荔枝类甜蛋白(LcTLP)基因的植物表达载体,通过基因枪进行了瞬时表达验证,并用花粉管通道法转入了荔枝基因组中。本研究的主要结果如下：1、对荔枝转录组数据进行了比较分析,获得了荔枝5个组织共2072个组织特异表达基因,分别是：1123个叶片特异表达基因,556个根特异表达基因,98个果皮特异表达基因,128个果肉特异表达基因,167个果核特异表达基因。对部分基因表达的定量PCR分析发现,这些基因的表达特征与转录组分析结果一致。2、应用PCR法克隆了两个叶片特异表达基因LcFKBP16-2和LcGRX的启动子。对这两个启动子的碱基序列进行分析,发现这两个启动子有很多相似性,如两个启动子均含有大量CAAT-box、TATA-box及与光应答作用相关的元件等。两个启动子序列均包含很多其它顺式调控元件。3、分别将LcFKBP16-2、LcGRX基因启动子与LcTLP基因、去CAMV 35S启动子的pCAMBIA1304质粒按一定顺序连接,构建了植物表达载体pCAMBIA1304-FKBP16-2-TLP、pCAMBIA1304-GRX-TLP。通过基因枪轰击法检测这两个表达载体在各组织中表达的特性,结果表明,这两个启动子均不能调控GUS基因在果肉中表达,但能调控GUS基因在其它组织如叶片、根、果皮以及果核中表达,表现出组织表达特异性。4、将构建的两个植物表达载体通过花粉管法转化紫娘喜和白糖罂荔枝,获得一批实生苗,从中鉴定出5株含pCAMBIAl304-FKBP16-2-TLP的白糖罂阳性植株。(本文来源于《海南大学》期刊2016-05-01）
刘莉[2]（2008）在《水稻叶片衰老特异性启动子的克隆和利用及剑叶早期衰老上升表达基因的鉴定》一文中研究指出水稻是人类最重要的粮食作物之一。虽然目前杂交水稻的推广很大程度上解决了世界人民的粮食问题,但是一些优良品种尤其是一些籼型品种在中后期衰老快,限制了更多有机物的形成和积累,不利于结实率和千粒重等产量相关性状的提高。解决这个问题的关键是了解叶片衰老的机制,创造延缓水稻叶片衰老的途径,进而提高有机物在籽粒中的积累。利用衰老特异性启动子驱动细胞分裂素基因表达、抑制衰老上升基因表达或者过量表达衰老下降基因都有可能实现持绿性水稻的目标。本实验针对这个问题,克隆鉴定了水稻来源的衰老特异性启动子,并用该启动子驱动农杆菌来源的细胞分裂素合成酶基因转化籼稻和粳稻,筛选持绿性家系,并且构建了中花11剑叶的早期衰老上升表达文库,主要结果如下:1.克隆水稻启动子P_(SAG39),通过报告基因GUS融合表达载体转化水稻鉴定其时空组织特异性表达谱。经过组织化学鉴定发现其在叶、茎、根、花、颖壳及未成熟种子的种皮、愈伤组织中表达,在成熟种子及胚乳中不表达,而且在叶片衰老晚期表达量达到高峰,揭示该启动子是叶片衰老特异性,而且可以应用于基因工程育种改良研究。2.鉴于启动子序列预测出多种激素响应相关的顺式作用位点,本实验用瞬时表达体系检测激素和冷胁迫对一系列5'端缺失启动子的表达情况,并且研究了缺失启动子的衰老特异性表达谱,确定P_(SAG39)启动子的衰老相关的顺式作用位点存在的区段。通过凝胶阻滞实验鉴定了可能对衰老上升表达起作用的顺式因子。揭示顺式作用位点HBOXCONSENSUSPVCHS和WRKY71OS与叶片衰老特异表达有关。3.在粳稻中成功转化了P_(SAG39):IPT表达系统,繁殖并筛选了单拷贝插入的转基因纯合家系,5个以牡丹江8~#为受体:MT1、MT2、MT3、MT4、MT5:3个以中花11为受体:ZT1、ZT2、ZT3。4.研究转P_(SAG39):IPT表达系统的阳性转基因水稻的叶片持绿性变化,发现持绿性增强,且这个表型与外源基因IPT的表达量共分离。5.调查了转化植株表达的细胞分裂素在光照下对幼苗生长及抽穗期产生的影响,P_(SAG39):IPT的转基因植株表达细胞分裂素在一定光照条件下(14小时或24小时)影响了种子刚萌发时芽的生长,但是不会影响茎杆的继续伸长。在长日照条件下,转基因中花11植株表达细胞分裂素刺激了OsMADS50的表达,从而提前开花。6.探明结实期间碳氮代谢水平是否发生变化,通过分析纯合家系ZT1可溶性糖含量和全氮含量发现,糖及氮素水平的改变引起叶片的库源转换发生变化从而引发叶片衰老。7.完成纯合家系的随机区组试验,每个小区设置叁个重复,调查转基因植株的持绿性和其他农艺性状。转基因阳性株系ZT1、ZT2的生物学产量相对其阴性株系降低约8-10%,千粒重增加约5-9%。8.以绿色叶片为driver,早期衰老叶片为tester,用抑制差减杂交法完成水稻剑叶早期衰老特异基因文库的构建,以driver和tester的总RNA为探针分别进行文库克隆的Macroarray杂交,筛选出815个差异表达的ESTs。通过生物信息学分析(阳性克隆聚类及GO分析),一共确定了533个单基因,其中183个有GO注释,涉及大分子物质代谢、调控蛋白质合成、能量代谢、调节基因、解毒、病原性和逆境、细胞骨架构成和花发育。121个与已报导过的持绿相关QTLs共线性,其余是功能未知的新基因。9.从文库中随机挑选50个阳性克隆的Northern杂交验证了差减杂交的效率和准确度,达到60%以上。对几个未知功能的基因进行定量PCR实验,发现它们不仅在自然衰老早期上升表达,而且不同程度的受到激素的诱导。这些基因为阐明衰老机制提供了一定基础。(本文来源于《华中农业大学》期刊2008-06-01）
黄海群,林拥军[3]（2004）在《水稻茎杆和叶片特异表达启动子的分离克隆及鉴定》一文中研究指出转基因作为一项新兴的技术已广泛应用于农业。在我国,水稻、玉米、棉花、大豆、油菜、马铃薯等10多种转基因作物已被批准进入田间环境释放,转基因抗虫棉已进入商业化生产。与此同时,转基因作物及其食品也成了环境和健康的中心议题。目前用于转基因作物的启动子多是组成型表达的,这使得转基因作物(特别是粮食作物)在环境安全性和食品安全性方面存在一定的风险。为缓解转基因水稻在环境释放时存在的这一问题,也利于转基因技术的更好利用,本试验(本文来源于《湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集》期刊2004-05-01）
韩翠丽[4]（2004）在《玉米幼嫩叶片中特异表达基因Zmglp1的表达分析和启动子缺失突变研究》一文中研究指出Zmglpl是从玉米中克隆得到的一个基因，该基因在玉米幼嫩叶片中特异表达。本文首次分析该基因的表达，研究启动于的缺失突变，以期了解其表达活性，掌握表达规律，用来驱动抗虫基因在玉米中稳定表达，减少国家因虫害造成的损失，提高玉米的产量。 启动子缺失突变研究表明Zmglpl基因在双子叶植物拟南芥中的表达存在周期节律，不同的缺失片段驱动下的周期节律也不相同。组织特异性分析证明了—70nt——98nt序列中含有调控基因在拟南芥绿色组织及花丝中表达的必要元件，△1215序列中—171nt——70nt片段则为基因在根中表达的必要条件。 启动子缺失片段—70——171nt和—359——749nt可能含有增强基因表达活性的顺式调控元件，而它们的上游序列—171——359nt和—749——1255nt能够抑制这些元件的功能，或者—70nt——98nt和—171——359nt区段含有降低基因表达活性的顺式调控元件，而它们的上游序列—70——171nt和—359——749nt能够抑制这些元件的负调控作用。 △637在拟南芥大部分发育时期都有很高的表达活性；在16 h／8 h光照／黑暗周期条件下，平均活性约为35S CaMV启动子的3倍。因此，玉米Zmglpl基因启动子的△637片段在今后改良作物或蔬菜品质及提高抗虫性的基因工程育种研究中，有潜在的应用价值。 以上结果为进一步研究调控高等生物基因的组织特异表达和周期节律提供了初步的线索，也为玉米抗螟基因工程提供了一个高效率的启动子。(本文来源于《山东师范大学》期刊2004-04-28）
叶片特异表达启动子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
水稻是人类最重要的粮食作物之一。虽然目前杂交水稻的推广很大程度上解决了世界人民的粮食问题,但是一些优良品种尤其是一些籼型品种在中后期衰老快,限制了更多有机物的形成和积累,不利于结实率和千粒重等产量相关性状的提高。解决这个问题的关键是了解叶片衰老的机制,创造延缓水稻叶片衰老的途径,进而提高有机物在籽粒中的积累。利用衰老特异性启动子驱动细胞分裂素基因表达、抑制衰老上升基因表达或者过量表达衰老下降基因都有可能实现持绿性水稻的目标。本实验针对这个问题,克隆鉴定了水稻来源的衰老特异性启动子,并用该启动子驱动农杆菌来源的细胞分裂素合成酶基因转化籼稻和粳稻,筛选持绿性家系,并且构建了中花11剑叶的早期衰老上升表达文库,主要结果如下:1.克隆水稻启动子P_(SAG39),通过报告基因GUS融合表达载体转化水稻鉴定其时空组织特异性表达谱。经过组织化学鉴定发现其在叶、茎、根、花、颖壳及未成熟种子的种皮、愈伤组织中表达,在成熟种子及胚乳中不表达,而且在叶片衰老晚期表达量达到高峰,揭示该启动子是叶片衰老特异性,而且可以应用于基因工程育种改良研究。2.鉴于启动子序列预测出多种激素响应相关的顺式作用位点,本实验用瞬时表达体系检测激素和冷胁迫对一系列5'端缺失启动子的表达情况,并且研究了缺失启动子的衰老特异性表达谱,确定P_(SAG39)启动子的衰老相关的顺式作用位点存在的区段。通过凝胶阻滞实验鉴定了可能对衰老上升表达起作用的顺式因子。揭示顺式作用位点HBOXCONSENSUSPVCHS和WRKY71OS与叶片衰老特异表达有关。3.在粳稻中成功转化了P_(SAG39):IPT表达系统,繁殖并筛选了单拷贝插入的转基因纯合家系,5个以牡丹江8~#为受体:MT1、MT2、MT3、MT4、MT5:3个以中花11为受体:ZT1、ZT2、ZT3。4.研究转P_(SAG39):IPT表达系统的阳性转基因水稻的叶片持绿性变化,发现持绿性增强,且这个表型与外源基因IPT的表达量共分离。5.调查了转化植株表达的细胞分裂素在光照下对幼苗生长及抽穗期产生的影响,P_(SAG39):IPT的转基因植株表达细胞分裂素在一定光照条件下(14小时或24小时)影响了种子刚萌发时芽的生长,但是不会影响茎杆的继续伸长。在长日照条件下,转基因中花11植株表达细胞分裂素刺激了OsMADS50的表达,从而提前开花。6.探明结实期间碳氮代谢水平是否发生变化,通过分析纯合家系ZT1可溶性糖含量和全氮含量发现,糖及氮素水平的改变引起叶片的库源转换发生变化从而引发叶片衰老。7.完成纯合家系的随机区组试验,每个小区设置叁个重复,调查转基因植株的持绿性和其他农艺性状。转基因阳性株系ZT1、ZT2的生物学产量相对其阴性株系降低约8-10%,千粒重增加约5-9%。8.以绿色叶片为driver,早期衰老叶片为tester,用抑制差减杂交法完成水稻剑叶早期衰老特异基因文库的构建,以driver和tester的总RNA为探针分别进行文库克隆的Macroarray杂交,筛选出815个差异表达的ESTs。通过生物信息学分析(阳性克隆聚类及GO分析),一共确定了533个单基因,其中183个有GO注释,涉及大分子物质代谢、调控蛋白质合成、能量代谢、调节基因、解毒、病原性和逆境、细胞骨架构成和花发育。121个与已报导过的持绿相关QTLs共线性,其余是功能未知的新基因。9.从文库中随机挑选50个阳性克隆的Northern杂交验证了差减杂交的效率和准确度,达到60%以上。对几个未知功能的基因进行定量PCR实验,发现它们不仅在自然衰老早期上升表达,而且不同程度的受到激素的诱导。这些基因为阐明衰老机制提供了一定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
叶片特异表达启动子论文参考文献
[1].孙琴.荔枝组织特异表达基因分析及叶片特异启动子的分离与鉴定[D].海南大学.2016
[2].刘莉.水稻叶片衰老特异性启动子的克隆和利用及剑叶早期衰老上升表达基因的鉴定[D].华中农业大学.2008
[3].黄海群,林拥军.水稻茎杆和叶片特异表达启动子的分离克隆及鉴定[C].湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集.2004
[4].韩翠丽.玉米幼嫩叶片中特异表达基因Zmglp1的表达分析和启动子缺失突变研究[D].山东师范大学.2004
论文知识图
