导读:本文包含了种植前胚胎论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:胚胎,遗传学,小鼠,原位,荧光,囊胚,单倍体。
种植前胚胎论文文献综述
黄玉玲[1]（2015）在《人配子、种植前胚胎及体外成熟卵来源桑椹胚全基因组CpG岛及启动子的甲基化模式》一文中研究指出原始生殖细胞到成熟配子的产生、受精合子全基因组重新启动是人和哺乳动物的生命周期中最为重要的两个阶段。已有研究对人及哺乳动物配子及早期胚胎全基因组甲基化位点进行定量分析,证实了人及哺乳动物成熟配子的产生、受精合子及种植前胚胎发育过程中DNA甲基化呈现动态变化,该甲基化动态变化图谱,对我们了解哺乳动物早期胚胎的基因表达及其调控和转座子抑制的功能相关性提供了重要理论依据：研究采用简化代表性亚硫酸氢盐测序法(Reduced representation bisulfite sequencing RRBS)可准确的区分5-甲基胞嘧啶(5-methylcytidine,5-mC)及5-羟甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5-hmC),并定量分析全基因组的甲基化水平,但该方法的覆盖率不够。为解决覆盖率不足的问题,乔杰等人采用改良的全基因组亚硫酸氢盐测序法(Whole genome bisulfite sequencing, WGBS)检测了囊胚内细胞团(ICM)和种植后胚胎全基因组甲基化水平,但配子及囊胚前期的胚胎全基因组甲基化位点变化情况未用覆盖率高的WGBS法检测。本研究采用半定量但几乎完全覆盖全基因组启动子和CpG岛甲基化芯片法(MeDIP-Chip)1分析人精子、卵母细胞及种植前胚胎各发育阶段全基因组CpG岛及启动子区域甲基化动态变化情况,以了解CpG岛及启动子甲基化的动态变化模式、该甲基化动态变化的可能调节机制及在早期胚胎发育过程中的功能。卵母细胞在第一次减数分裂中期(prophase I,M1)开始去甲基化,出生后在始基卵泡向窦卵泡发育过程中的次级卵母细胞的粗线后期重新建立甲基化模式,受精前完成。窦卵泡期取出未成熟卵,在体外进行24-48h的培养达成熟后可受精,但研究认为这个时间不足以让卵母细胞在成熟前完成甲基化的重建,而使在后期的胚胎发育过程中出现各种异常。从体外受精胚胎移植(In vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)患者小卵泡中得到的不成熟卵,进行体外成熟培养(in vitro maturation, IVM)后获得的成熟卵受精后行胚胎移植可成功获得临床妊娠,但各研究中心妊娠率的比率相差甚远,有研究认为这部分未成熟卵来源的胚胎质量差、发育潜能低下,移植后妊娠率极低,而质疑其利用价值：由此看来对于促排卵患者中获得的未成熟卵是否有利用价值存在争议。因此,本研究通过对IVM来源的处于合子基因组启动活化的关键时期-细胞融合的桑椹胚,对比分析IVM与体内成熟(In vivo maturation IVO)来源桑椹胚全基因组CpG岛及启动子的甲基化水平,从表观遗传学的角度来评价IVM胚胎发育潜能低下的可能机制及安全性。第一部分人配子、种植前胚胎全基因组CpG岛及启动子区域甲基化动态变化图谱研究目的既往研究采用RRBS的方法证实了人及哺乳动物成熟配子的产生、受精合子及种植前胚胎发育过程中DNA甲基化呈现动态变化,但该方法覆盖率不够。本研究采用几乎完全覆盖启动子和CpG岛(大部分甲基化发生区域)甲基化芯片法(MeDIP-Chip)分析人精子、卵母细胞及种植前胚胎各发育阶段全基因组CpG岛及启动子区域甲基化动态变化情况,以了解CpG岛及启动子甲基化的动态变化模式、该甲基化动态变化的可能调节机制及在早期胚胎发育过程中的功能。研究方法经医院伦理委员会批准,收集2010年7月-2013年7月于广州医科大学附属第叁医院生殖医学中心助孕的患者,卵母细胞来自助孕患者及自愿者捐赠,精子来自助孕患者,原核及2-4cell胚胎来自自愿者捐赠获得卵子受精后所得,其余早期胚胎来自助孕妊娠成功患者的捐赠,所有标本的使用得到了捐赠者的知情同意。分组标本按发育阶段分为8组,①精子组,标本30份；②MII期卵细胞组：25枚；③2PN期合子,25枚；④4细胞期胚胎,5枚；⑤8细胞期胚胎；4枚；⑥桑椹胚胚胎；6枚；⑦5枚囊胚的ICM(内细胞团)；⑧5枚囊胚的TE(滋养层细胞)。DNA的提取①精子采用差异裂解法,并结合使用Genomic DNA urification Kit(Promega)的试剂盒提取精子DNA；②-⑥组,卵及囊胚前期胚胎使用酸性Tyrode's solution去除透明带及粘附的颗粒细胞,移入PCR管裂解细胞提取DNA；⑦和⑧囊胚的ICM(内细胞团细胞)与TE(滋养层细胞),用拉细的巴氏管钝性分离ICM与TE后,分别移入PCR管裂解细胞收集DNA。(3)甲基化芯片(MeDIP-Chip)各组DNA采用超声波将DNA碎裂成大小约200-1000 bp的随机片段,经鼠5-甲基单克隆抗体进行免疫沉淀、纯化后,采用Cy3和Cy5标记WGA试剂盒进行全基因组扩增,然后与包含了NimbleGen人DNA甲基化3x720k启动子和CpG岛的微阵列杂交,用GenePix 4000B微阵列扫描仪读取数据。(4)芯片甲基化数据的统计Peak Score:探针上峰值的-log 10 (P-value)值,反应甲基化程度(Cut off=2);PeakMvalue:探针测得峰值中位数值的log2 (IP/Input)-比值；n指Peak Score≥2的峰值数,或者每个PeakMvalue对应的峰值数。实验结果(1)提取DNA的纯度及免疫共沉淀所富集的DNA片段均符合实验要求。(2)人配子、种植前胚胎全基因组CpG岛甲基化独特的动态变化模式①精子的全基因组CpG岛的甲基化程度最高(sperm, n=15604),受精后由原核期开始逐步去甲基化(2PN, n=3744),4cell期胚胎时全基因组CpG岛的甲基化程度达最低(4cell, n=2826),8cell胚胎期(8cell, n=3073)后CpG岛甲基化水平逐步恢复重建,桑椹胚期CpG岛甲基化水平进一步升高(Morula,n=5374)直至囊胚期ICM (ICM,n=5706)的CpG岛甲基化水平接近卵母细胞水平(Oocyte,n=6062),而TE细胞CpG岛甲基化水平处于卵母细胞与精子之间(TE,n=8376)。②种植前胚胎全基因组CpG岛甲基化的动态变化主要区域在高甲基化(Peak Mvalue≥0.7)和低甲基化(Peak Mvalue≤0.4)区域。③种植前胚胎基因组CpG岛的甲基化程度的变化,存在叁个剧烈变化期。这种变化的趋势为：第一期为精子、卵母细胞受精后到2PN的转变,即精子及卵母细胞甲基化程度降低(迅速去甲基化)；第二期：桑椹胚到囊胚期的转变,甲基化的迅速重建,第叁期囊胚形成过程中细胞向ICM与TE分化阶段,且TE的甲基化重建程度大于ICM。④在Intragenic、intergenic及Promotor区域CpG岛甲基化的动态变化情况：全基因组CpG岛甲基化动态变化主要由Promotor区域CpG岛甲基化变化引起,精子甲基化信号来自Promotor区域的比例为73.7%,卵母细胞为60.8%,2PN期合子为57.9%,4cell期胚胎为52.2%,8cell期胚胎为50.3%,桑椹期胚胎为68.8%,囊胚期ICM为66.6%,滋养层细胞为66.8%,CPG岛在intergenic与Intragenic区域甲基化变化无Promotor区域明显。(3)人种植前胚胎全基因组promoter甲基化水平的动态变化情况。①精子全基因组的promoter甲基化程度最高(Sperm,n=10634),受精后从原核期开始逐步去甲基化(2PN,n=5951),4cell胚胎期(4cell,n=6451)略微升高但低于卵母细胞(Oocyte,n=6578)基因组promoter区甲基化水平,之后又逐步去甲基化,桑椹期胚胎(Morula,n=5581)降至最低,囊胚期的ICM略升高(ICM,n=5723),而TE细胞甲基化程度最高(TE,n=7323),处于卵母细胞与精子之间。②人种植前胚胎全基因组的promoter甲基化的动态变化主要由高甲基化(Peak Mvalue≥0.7)的promoter和低甲基化(Peak Mvalue≤0.4)的promoter区域的变化引起。③HCP、LCP对人种植前胚胎全基因组promoter甲基化的动态变化的影响大于ICP:4cell期其全基因组HCP的比例最低占(40.2%),之后逐渐升高,囊胚期的ICM(58.1%)与TE(59.5%)的HCP比例处于卵母细胞(75.2%)与精子细胞(53%)之间；而promoter区LCP比例则与之相反,4cel1期胚胎的LCP比例最高(38.8%)；ICP的变化不明显。研究结论(1)人种植前胚胎全基因组CpG岛甲基化呈独特的动态变化模式：受精后由原核开始逐步去甲基化,4cell期全基因组CpG岛的甲基化程度最低,之后逐步重新建立甲基化模式：囊胚期ICM甲基化水平接近卵母细胞,而TE的甲基化水平处于卵母细胞与精子之间；而人及哺乳动物种植前胚胎在全基因组的总体甲基化水平最低点在ICM阶段。(2)基因组在不同发育阶段种植前胚胎CpG岛的甲基化存在叁个剧烈变化期,CpG岛甲基化擦除的主要阶段是4cell期,而全基因组总体的擦除则在2cell期。(3)基因组CpG岛甲基化动态变化主要由Promoter区域CpG岛甲基化动态变化引起。(4)人种植前胚胎基因组promoter甲基化同样呈现独特动态变化：受精后由原核开始逐步去甲基化,4cell期略微升高但低于卵母细胞水平,之后又逐步开始去甲基化直至桑椹胚期降至最低,而全基因组CpG岛最低点在4cell期,全基因组总的甲基化水平最低点在ICM阶段；HCP、LCP对全基因组promoter甲基化的动态变化的影响大于ICP。第二部分IVM及1VO桑椹胚CpG岛及启动子甲基化模式比较研究目的IVF-ET患者小卵泡中得到的不成熟卵,大部分可在体外培养24-48h后达成熟,成熟卵受精后行胚胎移植可成功获得临床妊娠,但各研究中心妊娠率的波动较大(0-25%),有些研究认为这部分未成熟卵获得的胚胎质量差、发育潜能低下,移植后几乎无妊娠者,而质疑其利用价值；由此看来促排卵患者获得的未成熟卵是否有利用价值存在争议。此外,窦卵泡期取出未成熟卵,在体外进行24-48h的培养达成熟后可受精,但研究认为这个时间不足以让卵母细胞在成熟前完成甲基化的重建,而使其在后期的胚胎发育过程中出现各种异常。因此,本研究通过对IVM来源处于细胞融合期,即合子基因组启动活化的关键时期一桑椹胚及体内成熟(In vivo maturation IVO)来源的桑椹胚全基因组CpG岛及启动子甲基化情况进行配比分析,从表观遗传学的角度来评价IVM胚胎发育潜能低下的可能机制及安全性。研究方法(1)实验对象实验组：收集2012年1月至2013年12月,ICSI患者和短时受精患者的MI期卵子168枚,IVM成熟的卵受精后一部分进行桑椹胚培养,提取桑椹胚DNA进行甲基化芯片实验；一部分行囊胚培养,行发育潜能观察实验。对照组：形态学观察的对照组来自2012年1月-2013年12月期间以男性因素行ICSI治疗患者,且男方精液参数主要为少弱精且无女方因素； 共100枚MⅡ卵母细胞。甲基化芯片(MeDIP-Chip)对照组来自第一部分实验组第⑥组的桑椹胚。(2)胚胎培养： MⅠ期卵子放置低氧分压的叁气培养箱,成熟卵母细胞行ICSI受精,进行桑椹胚及囊胚培养,对照组患者的MⅡ卵母细胞受精后行全胚胎囊胚培养。(3)来自IVM与IVO的桑椹胚先使用酸性Tyrode's solution去除透明带及粘附的颗粒细胞,移入PCR管裂解细胞提取DNA进行甲基化芯片(MeDIP-Chip)实验,实验方法与第一部分实验一致。(4)芯片甲基化数据的统计Peak Score:探针上峰值的-log10 (P-value)值,反应甲基化程度(Cut off=2);PeakMvalue:探针测得峰值中位数值的Iog2(IP/Input)-比值;n指Peak Score>2的峰值数,或者PeakMvalue对应的峰值数；采用差异甲基化信号分析法(Differenttial enrichment peaks,DEP):计算“M”值研究结果1.IVM卵母细胞共168枚,体外成熟率为83.3%(140/168),40枚成熟卵受精后进行桑椹胚培养,共获得6枚碎片<20%桑椹胚进行DNA提取后进入甲基化芯片实验；其余100枚成熟卵受精后进行囊胚培养参与发育潜能评估实验,两组的2PN率、卵裂率及桑椹胚形成率无统计学差别(P>0.05),但优质囊胚形成率IVM组(11.4%)显着性低于IVO组(46.7%)(P<0.01)。2.CpG岛方面(1)IVM桑椹胚全基因组CpG岛高甲基化的比例高于IVO桑椹胚,相反低甲基化区域的比例却低于IVO桑椹胚。(2)来自IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3281)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=611)；(3)IVM桑椹胚的Intragenic、intergenic及Promotor各区域的peakMvalue平均值均高于IVO桑椹胚。3.Promotor方面：(1)IVM桑椹胚全基因组Promotor高甲基化的比例高于IVO桑椹胚,但中、低甲基化区域的比例低于对照组。(2)来自IVM桑椹胚甲基化的信号总数(n=3447)多于IVO桑椹胚甲基化的信号总数(n=2744)。研究结论1两组的2PN率、卵裂率及桑椹胚形成率无统计学差别,但优质囊胚形成率IVM组显着性低于IVO组,证实源自促排后的未成熟卵胚胎发育潜能低下。2来自体外成熟卵的桑椹胚与来自体内成熟卵的桑椹胚,在全基因组CpG岛及Promotor区甲基化表水平上均出现较大的差异： IVM桑椹胚CpG岛甲基化的水平高于IVO桑椹胚,IVM桑椹胚Promotor区甲基化的程度高于IVO桑椹胚,表观遗传学上的差异可能是导致促排后的未成熟卵胚胎发育潜能差、妊娠率低下的主要原因,因此这部分卵母细胞在临床上须谨慎运用。全文小结1、受精后由原核开始的逐步去甲基化, CpG岛4cell期最低,启动子区域在桑椹胚期降至最低；2、种植前期胚胎不同发育阶段全基因组的CpG岛及启动子的甲基化存在叁个剧烈变化期；3、全基因组CpG岛甲基化动态变化主要由Promotor区域CpG岛甲基化动态变化引起,HCP、LCP对人种植前胚胎全基因组promoter甲基化的动态变化的影响大于ICP；5、促排后的未成熟卵经体外成熟培养后获得的胚胎发育潜能低下；6、源自体外成熟卵与体内成熟卵的桑椹胚,在全基因组CpG岛及Promotor区甲基化水平上均出现较大的差异：该差异可能是导致IVM胚胎发育潜能差、妊娠率低下的主要原因。(本文来源于《南方医科大学》期刊2015-05-12）
程东凯,翁宁,许蓬,孙晓玲,杨凯[2]（2015）在《采用基因组测序技术进行胚胎种植前遗传学筛查的方法学研究及应用》一文中研究指出目的采用第叁代测序技术(NGS),对辅助生殖种植前的胚胎进行染色体非整倍性筛查,以提高移植胚胎的质量和试管婴儿的成功率。方法首先采用接受试管婴儿技术治疗不孕症的夫妇多余的正常囊胚进行方法学研究。采用多重置换扩增法扩增细胞基因组DNA。在此基础上对一对不孕症夫妇的囊胚进行检测,并指导囊胚选择。结果正常囊胚DNA抽提后,琼脂糖凝胶电泳显示扩增的DNA产物质量符合要求。文库构建后进行测序,数据结果显示为正常样本。在成功建立方法的基础上,选择的囊胚发育良好,成功孕育健康胎儿并导致健康婴儿出生。结论 NGS是一个可靠的胚胎染色体非整倍性筛查技术。该方法具有通量高、可自动化等优点,可以提高异常染色体的诊断水平。(本文来源于《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》期刊2015年02期）
袁媛,袁茜,徐艳文,周灿权[3]（2014）在《非强效卵巢刺激的地中海贫血患者胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗结局》一文中研究指出【目的】观察非强效卵巢刺激的地中海盆血(地贫)患者胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗结局,探讨特殊助孕目的下地贫患者卵巢反应性及合适的刺激强度。【方法】收集70名因地中海贫血行胚胎种植前遗传学诊断治疗(实验组)及57名因男方因素行单精子卵胞浆内注射患者(对照组),比较其在同等强度刺激下的卵巢反应及临床结局。【结果】在基础内分泌水平及卵巢刺激强度可比情况下,实验组可移植胚胎数显着少于对照组,差异具有统计学意义(P=0.021);两组患者的获卵数、临床妊娠率、每移植周期活产率均没有统计学差异。【结论】地贫状态不影响患者卵巢反应性,在非强效卵巢刺激下,行胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗的地贫患者也可获得满意的临床结局。(本文来源于《中山大学学报(医学科学版)》期刊2014年05期）
加拿大,孔德汶[4]（2011）在《单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断(续) 第3讲 单细胞样本的收集,PCR的条件设置、调控和PGD前预初实验》一文中研究指出一、PGD家庭单细胞样本收集(以单淋巴细胞为例)因为SGD-PGD最终实施必须在单细胞(以单卵裂细胞为胚胎的代表,对每一胚胎诊断)中进行,所以在该家庭中建立诊断测定方法一开始就必须使用单细胞样本。在PGD前最常使用的单细胞样本是单颊黏膜细胞和单淋巴细胞。以下介绍取得单淋巴细胞的通用方法。①10×细胞溶解缓冲液(lysis buffer,LB)的配置:0.2mol/L氢氧化钾,50 mmol/L DTT。以上液体必须经高压消毒(本文来源于《国际生殖健康/计划生育杂志》期刊2011年06期）
孔德汶[5]（2011）在《单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断》一文中研究指出因在绝大多数的单基因遗传性疾病(SGD)中基因突变是异质性的,所以对大多数SGD病例行胚胎种植前遗传学诊断(SGD-PGD)时都需个别设计。为此,设计就成为SGD-PGD的重要一环。由于SGD的遗传模式(常染色体显性和隐性,性染色体连锁显性和隐性)和突变种类(点突变,大小片段插入和丢失,重复顺序数超常等)不同,应有相应的不同设计技巧和策略。笔者通过设计实例,向读者介绍了不同的设计技巧和策略。现今SGD-PGD的最基本实验室操作还是用聚合酶链反应(PCR)把单细胞(卵裂细胞)靶DNA片段扩增,然后诊断扩增后所得片段。设计最重要的一步就是对PCR所用引物的设计。设计还应包括单细胞PCR的特殊操作规定,DNA限制性内切酶酶切点设计(因在点突变时,常需用限制性酶内切后片段长度多态性分析方法作诊断)做诊断结果分析预估,确定最后一轮PCR的两个引物之一为荧光标记引物。成功的SGD-PGD工作需要有权威性的领导核心组织,协调,对团队的统管和支持,这也是成批地开展SGD-PGD的先决条件。而且,只有在遗传流行病学工作者、各医院儿科、各专门疾病研究所和分子生物学基因诊断科室的密切配合下,才能对多种SGD全面开展SGD-PGD。(本文来源于《国际生殖健康/计划生育杂志》期刊2011年04期）
崔骥[6]（2011）在《小鼠种植前2细胞和4细胞胚胎的MicroRNA芯片分析》一文中研究指出哺乳动物早期胚胎的发育和分化是一个复杂的过程,其调控机制是近年来研究的难点和热点问题之一。哺乳动物种植前胚胎在体外发育时往往会出现发育阻滞现象,发生的时期不尽相同。小鼠胚胎的体外阻滞发生在2细胞时期,即在离体培养条件下,小鼠受精卵经一次分裂后就停顿在2细胞期,不能继续分裂。尽管人们为寻找引起2细胞阻滞的原因做了多方面研究,但阻滞现象的分子机制至今依然知之甚少。微小RNA(MicroRNA,miRNA)是近年来发现的一类长约19-25个核苷酸的单链非编码RNA分子,在从线虫到人类的真核生物中广泛存在。miRNA已被证实在发育早期通过下调mRNA的转录控制基因表达。大量研究表明,miRNA在小鼠种植前胚胎中有表达,并且在小鼠2细胞期时明显表达下降,提示在胚胎基因组激活的过程中发挥着重要的功能。但是,到4细胞期时miRNA的表达量又有所上升,这种在胚胎2细胞期后miRNA表达量的再次改变造成的后果尚不清楚,对胚胎发育的影响也尚不明确。而小鼠胚胎发育阻滞正发生在2细胞期,我们推测miRNA在这一时期的表达变化可能与胚胎发育阻滞密切相关。因此,本课题拟开展miRNA在小鼠2细胞和4细胞胚胎中表达的研究,以期找到miRNA对种植前胚胎生长发育等方面可能起作用的依据。目的:建立小鼠的超排、交配和胚胎收集系统,研究miRNA在小鼠2细胞和4细胞胚胎中的表达情况,探讨miRNA在种植前胚胎发育中的作用和意义。方法和结果:1、应用miRNA扩增结合miRNA芯片技术,筛选在小鼠受精后1.5天(2细胞)和2.5天(4细胞)胚胎中差异表达的microRNA。通过MicroRNA芯片数据的分析,筛选发现共有192个(>2倍)表达有显着差异的miRNA。其中,122个miRNA在4细胞时表达比2细胞明显上调,70个miRNA在4细胞时表达比2细胞明显下调。2.采用荧光定量RT-PCR方法验证mmu-miR-467h、mmu-miR-466d-3p、mmu-miR-292-5p、mmu-miR-154、mmu-miR-2145和mmu-miR-706在小鼠2细胞和4细胞胚胎中的表达水平,结果发现这6个miRNA的表达水平与芯片结果相符,提示与小鼠早期胚胎的生长发育可能相关。结论:通过成功建立小鼠的超排、交配和胚胎收集系统,应用miRNA芯片技术,筛选发现了在小鼠种植前2细胞和4细胞胚胎中差异表达的microRNA。这是在小鼠胚胎基因组激活之后,miRNA的表达发生的又一次变化,通过对这些差异表达的miRNA的表达水平及功能进行分析,提示miRNA可能通过调控在胚胎发育中的某些重要的与发育有关的基因的表达,对胚胎发育起重要作用,对深入了解胚胎发育阻滞的分子机制具有重要意义。(本文来源于《南京医科大学》期刊2011-05-01）
孔德汶[7]（2011）在《单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断——单倍体定型连锁分析的运用》一文中研究指出单基因疾病的胚胎种植前遗传学诊断(SGD-PGD)是一种已在很多欧洲和北美洲国家建立并能提供临床服务的胚胎遗传学分析诊断程序,能为那些家庭中带有某种遗传性疾病致病基因的夫妇提供临床服务,使这些夫妇可生养出正常或隐性致病基因携带者的子代。从SGD-PGD获得的正常婴儿很有可能使该致病基因就此在这些家庭中不再下传,因此也有人认为此临床服务是遗传性疾病在基因水平上的一级预防,大有前途。在中国,人口基数巨大,遗传性疾病的发病绝对人数很高,故在中国开展SGD-PGD对提高人口素质和国计民生有重大意义。从1998年以来,笔者对35种单基因遗传性疾病作过SGD-PGD可行性评估、设计和实施。简要述评单倍体定型连锁分析在SGD-PGD中的应用。(本文来源于《国际生殖健康/计划生育杂志》期刊2011年02期）
郝燕,周平[8]（2011）在《种植前遗传学筛查与人类早期胚胎诊断》一文中研究指出种植前遗传学筛查(PGS)是近十几年出现的以提高妊娠率、活产率为目的的早期产前诊断方法。其通过对染色体数目异常的筛选,选择染色体核型正常的胚胎进行移植。PGS是一种低危险度的种植前遗传学诊断(PGD),欧洲人类生殖和胚胎学协会(ESHRE)PGD协作组报告的PGS周期数占PGD一半以上,并逐年增加。PGS适用于高龄妇女、反复种植失败、非染色体结构异常的重复性流产等不孕不育夫妇,获得可接受的妊娠率。但对其有效性还有很大争议。综述PGS在人类早期胚胎诊断中的应用和存在的问题。(本文来源于《国际生殖健康/计划生育杂志》期刊2011年02期）
陈林君,孙海翔,张宁媛,徐志鹏[9]（2010）在《用实时荧光定量RT-PCR检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达》一文中研究指出目的用单细胞实时荧光定量RT-PCR,检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达。方法采集小鼠卵母细胞和原核期胚胎,后者经体外培养至囊胚。采用实时荧光定量RT-PCR对多个及单个卵母细胞和2-细胞期胚胎中Tcl1基因的表达进行定量检测;用同样方法对小鼠种植前各发育阶段的胚胎进行Tcl1基因的表达检测。结果在多个及单个卵母细胞和2-细胞期胚胎中,均检测出Tcl1的表达;多个卵母细胞、2-细胞期胚胎中Tcl1的表达量显着高于单个卵母细胞、2-细胞期胚胎;此方法也适用于胚胎早期发育的各个时期,Tcl1在单个卵母细胞、原核期胚胎和2-细胞期胚胎中表达量最高,在4-细胞期胚胎、8-细胞期胚胎、桑葚胚和囊胚中表达量极低。结论应用单细胞实时荧光定量RT-PCR可对单个小鼠种植前胚胎中基因的表达进行定量检测。(本文来源于《安徽医药》期刊2010年11期）
刘琨,张学红,任育宏,赵丽辉,石馨[10]（2010）在《应用荧光原位杂交技术进行胚胎种植前遗传学诊断的临床分析》一文中研究指出目的:探讨应用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridisation,FISH)技术对染色体异常携带者进行种植前胚胎遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)的临床意义。方法:根据携带者染色体异常种类,分别选择相应的亚端粒探针和着丝粒探针或性染色体探针,进行1次或者2次杂交,对7例染色体异常携带者进行了胚胎种植前遗传学诊断。结果:7例染色体异常携带者进行了7个周期的PGD,获卵131枚,活检77枚胚胎,检出卵裂球87枚,移植20枚胚胎,4例临床妊娠,其中2例已分娩健康婴儿。结论:应用荧光原位杂交技术对染色体异常携带者的胚胎进行种植前遗传学诊断是一种有效方法。(本文来源于《癌变·畸变·突变》期刊2010年05期）
种植前胚胎论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的采用第叁代测序技术(NGS),对辅助生殖种植前的胚胎进行染色体非整倍性筛查,以提高移植胚胎的质量和试管婴儿的成功率。方法首先采用接受试管婴儿技术治疗不孕症的夫妇多余的正常囊胚进行方法学研究。采用多重置换扩增法扩增细胞基因组DNA。在此基础上对一对不孕症夫妇的囊胚进行检测,并指导囊胚选择。结果正常囊胚DNA抽提后,琼脂糖凝胶电泳显示扩增的DNA产物质量符合要求。文库构建后进行测序,数据结果显示为正常样本。在成功建立方法的基础上,选择的囊胚发育良好,成功孕育健康胎儿并导致健康婴儿出生。结论 NGS是一个可靠的胚胎染色体非整倍性筛查技术。该方法具有通量高、可自动化等优点,可以提高异常染色体的诊断水平。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
种植前胚胎论文参考文献
[1].黄玉玲.人配子、种植前胚胎及体外成熟卵来源桑椹胚全基因组CpG岛及启动子的甲基化模式[D].南方医科大学.2015
[2].程东凯,翁宁,许蓬,孙晓玲,杨凯.采用基因组测序技术进行胚胎种植前遗传学筛查的方法学研究及应用[J].中华细胞与干细胞杂志(电子版).2015
[3].袁媛,袁茜,徐艳文,周灿权.非强效卵巢刺激的地中海贫血患者胚胎种植前遗传学诊断助孕治疗结局[J].中山大学学报(医学科学版).2014
[4].加拿大,孔德汶.单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断(续)第3讲单细胞样本的收集,PCR的条件设置、调控和PGD前预初实验[J].国际生殖健康/计划生育杂志.2011
[5].孔德汶.单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断[J].国际生殖健康/计划生育杂志.2011
[6].崔骥.小鼠种植前2细胞和4细胞胚胎的MicroRNA芯片分析[D].南京医科大学.2011
[7].孔德汶.单基因遗传性疾病的胚胎种植前遗传学诊断——单倍体定型连锁分析的运用[J].国际生殖健康/计划生育杂志.2011
[8].郝燕,周平.种植前遗传学筛查与人类早期胚胎诊断[J].国际生殖健康/计划生育杂志.2011
[9].陈林君,孙海翔,张宁媛,徐志鹏.用实时荧光定量RT-PCR检测单个小鼠种植前胚胎中特异性基因表达[J].安徽医药.2010
[10].刘琨,张学红,任育宏,赵丽辉,石馨.应用荧光原位杂交技术进行胚胎种植前遗传学诊断的临床分析[J].癌变·畸变·突变.2010
论文知识图
