特异腐质霉来源漆酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

论文摘要

漆酶是一种含铜的多酚氧化酶,在有机农药残留和木质素的降解方面具有潜在的工业价值。从特异腐质霉Y1（Humicola insolens Y1）中分离到了漆酶基因Lac1,其全长1 803 bp,编码600个氨基酸,与NCBI蛋白数据库比对结果表明,与来源于Chaetomium globosum CBS 148.51（XP001228806）的多酚氧化酶序列相似性最高为71%,表明是一个新的漆酶基因。将其克隆入毕赤酵母表达载体pPIC9r中,通过PCR和SDS-PAGE检测证实基因已经整合入酵母基因组中且能分泌表达。在3 L发酵罐中,重组Lac1蛋白表达量达到3.79mg/mL发酵液,酶活性达到1.3 U/mL发酵液。酶学性质分析结果显示,漆酶的最适作用温度为65℃,最适反应pH为4.5,且在pH 6～11的范围内酶的相对活力均在70%以上。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张丽洁,徐欣欣,田健,初晓宇,朱宝成,伍宁丰

关键词: 漆酶,基因克隆,异源表达,毕赤酵母

来源: 中国农业科技导报 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 河北农业大学生命科学学院,中国农业科学院生物技术研究所

基金: 国家863计划项目(2013AA102804)资助

分类号: Q78

DOI: 10.13304/j.nykjdb.2018.0196

页码: 46-53

总页数: 8

文件大小: 4360K

下载量: 252

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标签：漆酶论文;  基因克隆论文;  异源表达论文;  毕赤酵母论文;