关中奶山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及毒力基因和耐药性检测

论文摘要

羊伪结核病由伪结核棒状杆菌引起,该病几乎存在于世界上所有的绵羊和山羊生产养殖区域,我国内蒙古、陕西、甘肃、新疆、云南、上海、浙江、广西和广东等地均有报道。由于其具有慢性和亚临床感染特征,为养羊业带来了重大的经济损失。富平是中国重要的奶山羊养殖基地,关中奶山羊养殖已成为富平农村地区的经济支柱产业。近年,富平奶山羊羊群中伪结核病广为流行,严重影响了羊养殖产业的健康生产。本研究在陕西富平不同地区的养殖场,调查伪结核病疫情并采集了疑似伪结核病患羊的脓汁样品,通过分离纯化、革兰染色镜检、生化试验、PCR检测等方法对分离菌株进行鉴定;通过PCR方法检测毒力基因;通过K-B纸片法对病原菌进行药物敏感性试验,进一步检测其耐药基因。获得的研究结果如下:1.从陕西富平地区采集的23份患病奶山羊脓汁样品中分离出了14株疑似伪结核棒状杆菌菌株。分离菌株在含5%绵羊鲜血的琼脂培养基上呈白色,菌落边缘整齐,易被推动,干燥且易碎;革兰染色阳性,菌体多为球杆状或棒状,无芽孢、无荚膜、不能运动,多呈单个散在分布或呈栅栏状、“V”型排列。分离菌株的菌落特征和染色镜检结果与伪结核棒状杆菌相符;分子生物学检测结果表明,14株分离菌与GenBank中C.p参考株16S rRNA核苷酸同源性达99%以上。2.对伪结核棒状杆菌的毒力基因检测表明,14株菌株均扩增出了伪结核棒状杆菌的5种主要毒力基因,包括PLD,Fag A,Fag B,Fag C,Fag D。3.药物敏感性试验结果显示,本次分离菌株对四环素、青霉素、克拉霉素、利福平、头孢唑啉等多种抗生素敏感,对阿米卡星、链霉素等抗生素表现耐药;耐药基因检测发现86%（12/14）的分离菌株携带有介导氨基糖苷类药物的耐药基因,100%（14/14）的分离菌株携带介导β-内酰胺类药物的耐药基因,未检测到介导利福平的耐药基因。

论文目录

摘要

ABSTRACT

文献综述

第一章羊伪结核棒状杆菌研究进展

1.1 病原学

1.1.1 培养形态

1.1.2 培养条件和生化特性

1.2 流行病学

1.2.1 流行概况

1.2.2 传播途径

1.3 发病机理

1.4 毒力基因

1.5 临床症状

1.5.1 体表型

1.5.2 内脏型

1.5.3 混合型

1.6 病理学变化

1.7 诊断方法

1.7.1 微生物学诊断

1.7.2 血清学鉴定

1.7.3 分子生物学诊断

1.8 防治

1.8.1 免疫预防

1.8.2 治疗

1.8.3 综合防治

试验研究

第二章关中奶山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及毒力基因检测

2.1 材料

2.1.1 主要试剂

2.1.2 主要仪器

2.2 方法

2.2.1 病料采集

2.2.2 病原菌分离培养

2.2.3 革兰染色镜检

2.2.4 生化特性

2.2.5 分子生物学鉴定

2.2.6 毒力基因检测

2.3 结果

2.3.1 菌落分离培养

2.3.2 生化特性

2.3.3 分子生物学鉴定

2.3.4 毒力基因检测结果

2.4 讨论

小结

第三章关中奶山羊伪结核棒状杆菌的耐药性检测

3.1 材料

3.1.1 样品

3.1.2 主要试剂

3.1.3 主要仪器

3.2 方法

3.2.1 药敏试验

3.2.2 耐药基因检测

3.3 结果

3.3.1 药敏试验

3.3.2 菌株耐药基因的携带情况

3.4 讨论

小结

结论

参考文献

附录

致谢

个人简历

文章来源

类型: 硕士论文

作者: 王峰

导师: 齐雪峰

关键词: 奶山羊,伪结核棒状杆菌,毒力基因

来源: 西北农林科技大学

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 西北农林科技大学

基金: 陕西省重点研发项目(一般项目)(S2018-ZDYF-YBXM-NY-0003)

分类号: S852.61

总页数: 47

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关中奶山羊伪结核棒状杆菌的分离鉴定及毒力基因和耐药性检测

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