单增李斯特菌lmo2192基因克隆与表达

单增李斯特菌lmo2192基因克隆与表达

论文摘要

[目的]对单增李斯特菌新疆绵羊脑炎临床分离株LM90SB2的lmo2192基因进行克隆及原核表达。[方法]利用PCR方法扩增lmo2192基因,连接p MD19-T载体进行克隆,筛选阳性菌进行测序比对。构建重组表达质粒p ET32a-2192,将其转入大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达,利用SDS-PAGE与Western Blotting鉴定重组蛋白。[结果]扩增lmo2192基因序列长度为969 bp,与预期一致。该基因在大肠杆菌中大量表达,经SDS-PAGE和Western Blotting鉴定分析该产物为56 k Da左右的融合重组蛋白,与预期大小一致。[结论]成功克隆lmo2192基因,并获得大量表达,为进一步研究该基因功能奠定理论基础。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌株与质粒
  •     1.1.2 主要试剂
  •     1.1.3 仪器
  •     1.1.4 培养基
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 引物设计与合成
  •     1.2.2 PCR扩增目的基因
  •     1.2.3 重组表达质粒的构建
  •     1.2.4 目的基因的诱导表达
  •     1.2.5 重组蛋白的Western Blotting鉴定
  • 2 结果与分析
  •   2.1 PCR扩增结果
  •   2.2 重组表达质粒pET32a-2192的鉴定
  •   2.3 重组质粒pET32a-2192的诱导表达
  •   2.4 重组表达蛋白Western Blotting鉴定
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李红欢,马勋,钱凌霄,李庆辉,刘扬扬

    关键词: 单增李斯特菌,基因,克隆,原核表达

    来源: 生物技术 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 石河子大学动物科技学院

    基金: 国家自然科学基金项目(31360614,31860712)

    分类号: Q78;S852.61

    DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.01.0002

    页码: 7-10+28

    总页数: 5

    文件大小: 1461K

    下载量: 132

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