导读:本文包含了腺相关病毒载体论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:病毒,载体,基因治疗,膜片,受体,疫苗,免疫。
腺相关病毒载体论文文献综述
郭莉霞,殷钟意,郑旭煦[1]（2019）在《携带NMU2R shRNA重组腺相关病毒载体的构建及其评价》一文中研究指出构建稳定表达NMU2R shRNA的重组腺相关病毒载体,制备并纯化靶向性沉默NMU2R表达的高滴度重组腺相关病毒。首先设计合成NMU2R shRNA,退火形成双链与p AAV-ZsGreen-shRNA质粒Bam H I和Hind III双酶切产物相连接构建形成质粒p AAV-ZsGreen-r NMU2R shRNA,经双酶切和测序鉴定证实,重组质粒克隆正确,将重组质粒转染到AAV-293包装细胞中包装成腺相关病毒载体,成功制备重组腺相关病毒r AAV5-Zs Green-r NMU2R shRNA,经测定纯化所得r AAV5病毒滴度为1×10~(12)vg/m L。最后将r AAV5-Zs Green-r NMU2R shRNA感染大鼠嗜铬细胞瘤细胞PC12,检测NMU2R shRNA基因沉默效果,利用空病毒载体p AAV-ZsGreen-shRNA作对照,Real-time PCR及Western Blot方法测得NMU2R mRNA及蛋白表达水平与对照组相比显着下降。综上,成功构建了高滴度携带NMU2R shRNA重组腺相关病毒载体r AAV5-Zs Green-r NMU2R shRNA。(本文来源于《生物学杂志》期刊2019年03期）
田丽春,朱情情,刘艾洁,王青青,黄光瑞[2]（2019）在《携带小鼠白介素-4截短型突变体基因的5型腺相关病毒载体的构建及外源蛋白的体外表达》一文中研究指出目的:制备携带碳端结构域缺失的小鼠白介素-4(Interleukin-4,IL-4)基因突变体的5型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus, r AAV)并在细胞水平检测其介导的外源蛋白表达情况。方法:通过分子克隆技术构建携带小鼠IL-4碳端22个氨基酸缺失的突变体的表达质粒pSNAV-mIL-4ΔC22,叁质粒共转染法制备重组的5型AAV病毒,体外感染人支气管上皮样细胞系16HBE和BEAS-2B,并通过Western blot和ELISA检测外源蛋白表达。结果:DNA测序表明构建的小鼠IL-4碳端第118位氨基酸位点处截短的突变体基因表达序列正确无误,制备的重组病毒载体r AAV5-mIL-4ΔC22滴度约为3×10~(11)vg/m L。r AAV5-GFP感染16HBE和BEAS-2B细胞后36小时开始可见持续稳定的荧光蛋白表达,重组病毒r AAV5-mIL-4ΔC22感染16HBE和BEAS-2B细胞后外源蛋白在培养上清中呈分泌型表达。结论:本研究成功构建了携带小鼠IL-4碳端结构域缺失型突变体的AAV表达质粒并制备了重组病毒r AAV5-mIL-4ΔC22,该病毒可有效转染16HBE和BEAS-2B细胞并介导外源基因分泌表达截短型小鼠IL-4突变体蛋白。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2019年02期）
王璐[3]（2018）在《携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原的腺相关病毒载体疫苗的构建》一文中研究指出犬瘟热病毒与犬细小病毒可以引起犬科、鼬科、大熊猫科等动物的烈性传染疾病,引起动物的死亡率可高达80%,给我国宠物饲养业、皮毛动物饲养业、野生动物保护领域均带来了严重的经济损失。目前国内外主要使用犬瘟热与犬细小病毒的弱毒疫苗对疾病进行防控,但该种类疫苗存在一些不足之处,例如生产成本比较高,弱毒疫苗具有毒力返强的隐患,面对不同的病毒变异株有其局限性等。本研究旨在构建一款高效安全低成本的新型疫苗。我们通过将犬瘟热与犬细小病毒的抗原基因插入到腺相关病毒(Adeno associated virus,AAV)基因组中,制备成可预防犬瘟热与犬细小疾病的腺相关病毒重组疫苗。本课题首先选择犬瘟热病毒的血凝蛋白基因、融合蛋白基因和犬细小病毒的衣壳蛋白基因作为抗原基因,并分别插入到腺相关病毒基因组中。再通过腺相关病毒叁质粒包装系统获得携带各抗原基因的重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV)。经病毒滴度检测与外源蛋白表达检测后,将携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原基因的rAAV混合,通过肌肉注射免疫6周龄的Balb/c小鼠,同时以英特威犬二联疫苗作为阳性对照,以rAAV-GFP病毒作为阴性对照。在首次免疫实验中,按照英特威犬二联疫苗的免疫程序免疫,即对小鼠进行叁次免疫,每次免疫间隔14 d。免疫程序结束后每隔14 d对小鼠进行采血与中和抗体的检测。我们得到了良好的实验结果,之后为了进一步验证rAAV疫苗的高效性,按照与叁次免疫实验相同的免疫途径与免疫剂量对实验小鼠进行一次免疫实验,免疫后继续监测中和抗体水平。叁次免疫结果显示rAAV疫苗可以使小鼠产生高水平的中和抗体。在免疫后所有时间点中rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价均高于阳性对照,最高时中和抗体效价大于1:500,是阳性对照的4倍。但在免疫后的所有时间点中,rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬细小病毒中和抗体效价均与阳性对照接近,中和抗体效价均在1:100到1:200之间,一般认为当中和抗体效价大于1:100时机体便可以免受强毒的攻击。一次免疫结果显示rAAV疫苗依然可以使小鼠产生高水平的中和抗体。在免疫后第6周rAAV疫苗使小鼠产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价超过1:100,然而阳性对照产生的抗犬瘟热病毒中和抗体效价始终小于1:100,理论上我们认为阳性对照免疫失败,在免疫后第8周rAAV疫苗与阳性对照使小鼠产生的抗犬细小病毒中和抗体效价均超过1:100。在此次免疫实验中显示,rAAV疫苗仅需要对动物进行一次免疫,理论上就可以达到对动物的有效免疫。本研究的结果表明:rAAV疫苗可以激发小鼠的免疫系统并产生高水平的中和抗体;rAAV疫苗仅需对动物进行一次免疫在理论上就可以达到对动物的有效免疫;rAAV疫苗针对于犬瘟热病毒和犬细小病毒产生的免疫效果不平衡,针对于犬瘟热病毒的免疫效果强于针对犬细小病毒的免疫效果,这种现象可能是由抗原的选择、rAAV病毒混合的比例与滴度等原因造成的,可在后续工作中继续摸索病毒配比条件以更好的平衡针对两种病毒的免疫效果。综上所述携带有犬瘟热与犬细小病毒抗原基因的腺相关病毒重组疫苗具有安全高效、缩短免疫周期、成本低廉等优势,有望成为有效防控犬瘟热与犬细小疾病的新型疫苗。(本文来源于《华中农业大学》期刊2018-06-01）
赵玲玲,陆渊,Arun,Srivastava,凌晨[4]（2017）在《糖皮质激素受体在重组型腺相关病毒载体转导中的作用》一文中研究指出2型重组型腺相关病毒(rAAV2)载体能够通过激活NF-κB信号通路调控细胞免疫。由于糖皮质激素受体(GR)与NF-κB同为细胞免疫的重要组成部分,我们系统地研究了GR信号通路在rAAV2载体转基因表达过程中的作用。首先,体内外实验结果均表明,野生型AAV2和重组型rAAV2载体都能够激活细胞GR信号转导通路。激活效应呈载体剂量依赖性加强。同时,GR在细胞核内的转运也相应增加。其次,我们发现在各种GR阳性细胞株中,GR特异性激活剂地塞米松能够显着提高rAAV2载体介导的转基因表达。然而,在GR缺陷型人骨肉瘤细胞系U2OS细胞中,地塞米松没有作用。另一方面,在U2OS细胞中稳定转染GR表达质粒不仅显着增加了rAAV2载体的转基因表达效率,而且也恢复了地塞米松进一步提高转基因表达的能力。最终,我们实验证明激活的GR能绑定于rAAV2载体基因组,从而提高转基因表达。综上所述,我们总结了一个新的模型用以阐明GR在rAAV2载体转导过程中的作用。(本文来源于《2017中国长叁角遗传学大会会议手册》期刊2017-10-27）
邓梁钧,邱飞[5]（2018）在《降低重组腺相关病毒载体免疫反应的策略》一文中研究指出重组腺相关病毒(Recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体在基因治疗研究中应用广泛,但可能引发机体产生免疫反应,限制了其在基因治疗领域的临床应用,如何降低rAAV载体的免疫反应已经成为基因治疗领域的研究重点之一。本文从对rAAV载体的选择和对患者免疫抑制调控两个方面介绍降低rAAV载体免疫反应的策略。(本文来源于《病毒学报》期刊2018年01期）
陆元喜[6]（2017）在《重组9型腺相关病毒载体通过不同方法转染SD大鼠心肌转染效率及安全性研究》一文中研究指出目的:重组9型腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus serotype 9,rAAV9)是一种可持续高水平表达目的基因的新型病毒性载体,对心肌转染效率高于其他血清型AAV。rAAV9有多种方法转染心肌组织,本实验旨在探讨尾静脉注射法(Tail vein injection,TVI)、尾静脉泵入法(Tail vein pumping,TVP)、心肌多点注射法(multi-point intramyocardium injection,IMI)、冠脉注射法(intracoronary injection,ICI)四种不同转染方法在SD大鼠心肌的转染效率及其安全性。方法:将100只SD雄性大鼠随机分为TVI组、TVP组、IMI组、ICI组,每组25只,转染携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein,eGFP)报告基因的rAAV9,按转染时间分为7d、14d、21d、28d四个亚组,每组5只。TVI组、TVP组、IMI组、ICI组各设阴性对照亚组(NC组)5只。转染rAAV9-eGFP各亚组每只SD大鼠注射病毒量为1×10~(11)vg,NC组为经相应途径注入等量生理盐水(normal saline,NS)。通过荧光显微镜观察各组心肌组织的绿色荧光及Western blotting检测心肌组织eGFP表达确定各组转染最佳时间并比较各组转染效率。转染操作时记录心电图,转染后12小时检测大鼠血清CK-MB、cTnT表达及心功能变化,采集心脏标本时肉眼观察大鼠心脏大体解剖病变,评价四种转染方法的安全性。结果:重组9型腺相关病毒可通过尾静脉注射、尾静脉泵入、心肌多点注射、冠脉注射四种方法有效转染到心肌组织,各组转染高峰均见于转染14d时。转染效率从高到低依次为ICI组,TVP组,IMI组及TVI组(各组间比较,均P<0.05)。同一转染方法,转染rAAV9-eGFP亚组与NC亚组比较,大鼠CK-MB、cTnT表达及心功能无明显变化,差异无统计学意义(均P>0.05)。不同方法转染rAAV9-eGFP或NS:与TVI组比较,TVP组CK-MB、cTnT表达及心功能无明显变化,差异无统计学意义(均P>0.05);IMI组及ICI组CK-MB、cTnT表达水平升高,心功能显着降低,差异有统计学意义(均P<0.05)。实施转染操作时,TVI组及TVP组大鼠未发生心律失常,而IMI组及ICI组大鼠可见严重心律失常(包括室性心动过速、心室颤动、心脏停搏)。采集心脏标本时TVI组及TVP组大鼠心脏大体解剖未见异常,而IMI组及ICI组大鼠心脏可见瘢痕形成或心肺/胸壁粘连。结论:重组9型腺相关病毒(rAAV9)可安全、高效转染至心肌组织,转染高峰期出现于转染14d时,冠脉注射法可实现较高的转染效率,但安全性较低,尾静脉泵入法兼具较高的转染效率和较高的安全性或可作为一种更好的转染方法。(本文来源于《广西医科大学》期刊2017-05-01）
张梅,于英君[7]（2017）在《基因治疗中重组腺相关病毒载体的安全性》一文中研究指出基因治疗对常用治疗方法难以解决的单基因疾病、癌症、心血管疾病等往往具有良好的疗效。迄今为止,已有超过2000例的基因治疗应用于临床试验~([1]),在基因治疗临床试验中超过68%是应用病毒载体。腺相关病毒(AAV)载体由于其基因传递效率高,缺乏致病性和具有良好的安全性而备受青睐~([2])。叁十多年来,许多应用AAV的基因治疗临床试验取得了成功,rAAV成为人类临床试验的最佳载体之一~([3,4,5]),但是我们仍然不能忽视基因治疗(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2017年04期）
史明超[8]（2017）在《过表达SOD1 G41S和G41D的重组腺相关病毒载体构建及其在肌萎缩侧索硬化N2a细胞模型中的作用探究》一文中研究指出肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种快速进展、可累及上、下运动神经元的严重致死性神经系统变性病。研究发现,10%ALS为家族性的ALS(familial ALS,fALS),其中约20%fALS发病与超氧化物歧化酶1(superoxide dismutase1,SOD1)基因突变有关。在SOD1基因上存在两种同一氨基酸位点上的不同突变SOD1 G41S和G41D,而携带这两种突变的患者临床表现明显不同,SOD1G41S突变型fALS患者病程进展迅速,平均生存期约为11.6个月;而SOD1 G41D突变型患者病程进展较为缓慢,平均生存期约为17年。自1993年Rosen等人发现SOD1基因突变和ALS发病有关后,研究者对此种ALS致病机制进行了一系列研究,但至今尚不清楚。目前认为,氧化应激、错误折迭蛋白聚集、线粒体功能障碍、谷氨酸盐兴奋毒性、轴索运输损害、非神经元细胞作用等都参与ALS的致病过程。另外,临床研究发现,ALS患者可出现轴突的高兴奋性,表现为持续性的钠电流增加,患者呈现出肌痉挛和肌束震颤;而先前也有研究发现在ALSG93A模型鼠原代脊髓运动神经元、ALS患者诱导多能干细胞来源的运动神经元及G93A模型鼠离体脑片中的运动神经元都出现过度兴奋的现象。电压门控性钠通道(voltage-gatedsodium channel,VGSC)是神经元的兴奋和动作电位产生、传导的重要元件,因此该通道电生理特性如果改变也将会影响神经元的兴奋性,从而导致疾病的发生。先前研究报道ALS SOD1 G93A模型鼠在疾病早期神经元VGSC电流出现异常。但是目前未有研究对SOD1 G41S和G41D突变的VGSC电生理特性进行探究。因此,为进一步探究SOD1 G41S和G41D突变在ALS中的致病机制,将本研究分为两个部分,首先构建过表达野生型(widetype,WT)SOD1、SOD1 G41S及 G41D 重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus,rAAV)载体;用上述rAAV感染小鼠神经瘤母细胞(N2a)以构建ALS细胞模型,并观察N2a细胞过量表达此两种突变蛋白后,对神经元VGSC电生理特性和凋亡分子表达的影响。第一部分SOD1WT、SOD1 G41S和SOD1 G41D rAAV载体的构建及鉴定目的构建过表达SOD1 WT、SOD1 G41S及SOD1 G41D重组腺相关病毒载体。方法首先,利用PCR扩增各目的基因片段,应用EcoRI和HindⅢ内切酶对pMT121(pAAV-hSyn-bGlobinintron-EGFP-pA)表达载体进行酶切后,回收纯化线性化表达载体。进而在无缝反应液作用下,将各目的片段与回收后的线性化表达载体进行同源重组后转化DH5α感受态细胞。利用菌落PCR鉴定转化子,阳性克隆送测序,测序无误后进行质粒提抽。最后目的质粒与辅助质粒共转染HEK293细胞进行病毒包装,经纯化、浓缩、RT-PCR滴度测定后保存备用。结果PCR结果显示,在约765 bp、792 bp、521 bp、175 bp、367 bp可见特异性 RFP、GFP、SOD1WT、5'SOD1G41S/G41D、3'SOD1G41S/G41D 条带;应用EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ内切酶对表达载体pMT121进行双酶切,回收4470 bp的线性化载体片段;菌落PCR转化子鉴定结果显示,SOD1WT重组质粒阳性克隆得到711bp片段、SOD1G415和SOD1G41D阳性克隆得到721bp片段;测序结果正确;72 h后获得3种SOD1 WT、SOD1 G41S和G41D rAAV颗粒,经浓缩、纯化、测定滴度分别为 2.43×1012 v.g./mL、2.28×1012 v.g./mL、2.52×1012 v.g./mL后,分装保存于-80℃备用。结论成功构建过表达SOD1 WT、SOD1 G41S及SOD1 G41D rAAV载体,病毒纯化、浓缩、滴度皆满足后续实验要求。第二部分SOD1WT、SOD1G41S和SOD1G41DrAAV载体在ALS细胞模型中的作用探究目的探究ALS SOD1上G41S和G41D两种突变型所致神经元VGSC电生理特性的差异及其可能的分子机制。方法构建过表达SOD1 WT、SOD1 G41S及G41D rAAV载体后,体外感染N2a细胞,将实验组分为3组:SOD1WT组、SOD1G41S和SOD1G41D组,并以无目的基因rAAV感染的N2a细胞为阴性对照(Control)组。利用全细胞膜片钳技术分别记录四组细胞VGSC电流,绘制通道快速激活和稳态失活曲线后分析相关参数。比较各组细胞凋亡分子Cleaved caspase-3在病毒感染后24、48和72 h不同时间点的表达情况。结果与Control组和SOD1 WT组比较,感染过表达SOD1 G41S、SOD1 G41D rAAV的细胞峰值电流显着增加(P<0.05),且SOD1G41S组显着高于SOD1 G41D组(P<0.01)。SOD1 G41S组和SOD1 G41D组细胞半数激活电压和半数失活电压显着高于Control组和SOD1 WT组(P<0.05);但SOD1 G41S组半数激活电压高于SOD1 G41D组(P<0.05);SOD1 G41S与SOD1 G41D组半数失活电压比较差异无显着性(P>0.05);各组激活、失活曲线斜率差异无显着性(P>0.05)。虽然 24 和 48h,SOD1WT、SOD1G41S、SOD1G41D 组 Cleaved caspase-3表达量差异无显着性,但转染72 h后,SOD1 G41S组和SOD1 G41D组 Cleaved caspase-3 表达量高于 SOD1 WT 组,且 SOD1 G41S 组高于 SOD1 G41D 组。结论SOD1 G41S和SOD1 G41D突变通过加快VGSC快速激活和抑制失活过程提高神经元活性,且SOD1 G41S突变VGSC活性显着高于SOD1 G41D;SOD1 G41S突变型ALS快速进展病程可能与该突变型促进凋亡有关。(本文来源于《南京医科大学》期刊2017-04-01）
赵琳珊,朱凤琴,曹红,钟权涛,李刚[9]（2017）在《表达HCV-E2抗原的新型腺相关病毒载体疫苗的构建》一文中研究指出目的构建以新型腺相关病毒(AAV)为载体,包含1b型丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2目的抗原的丙型肝炎基因疫苗,为进一步研究奠定基础。方法提取慢性丙型肝炎1b型患者血清RNA,用RT-PCR的方法扩增HCV E2片段,构建pAAV.CMV.HCV.E2重组质粒,转染HEK293细胞,筛选出高效表达的重组质粒进行AAV疫苗的包装和纯化。结果经酶切及测序证实,包含HCV目的抗原E2的AAV质粒pAAV.CMV.HCV.E2构建成功,并可高效转染HEK293细胞,表达目的抗原。丙型肝炎基因疫苗r AAV2/8.CMV.HCV.E2,r AAV2/rh32.33.CMV.HCV.E2包装成功,并可高效转染HepG2细胞,表达目的抗原。结论成功构建了以新型AAV为载体的HCV-E2疫苗。(本文来源于《热带医学杂志》期刊2017年03期）
史明超,赵慧慧,牛琦,金庆文[10]（2017）在《过表达SOD_1 G41S和G41D的重组腺相关病毒载体构建及其在体外N2a细胞中的作用研究》一文中研究指出目的研究家族性肌萎缩侧索硬化(fALS)超氧化物歧化酶1(SOD_1)上G41S和G41D两种突变型所致神经元电压门控性钠通道(Na_v)电生理特性的差异及其可能的分子机制。方法构建过表达SOD_1野生型(WT)、SOD_1G41S及SOD_1G41D重组腺相关病毒(rAAV)载体后,体外感染小鼠神经瘤母细胞(N2a),并分为3个实验组:SOD_1WT组、SOD_1G41S和SOD_1G41D组,并以无目的基因rAAV感染的N2a细胞为阴性对照组。利用全细胞膜片钳技术分别记录4组细胞Na_v电流,绘制通道快速激活和稳态失活曲线后分析相关参数。比较各组细胞凋亡分子cleaved caspase-3在感染后24、48和72 h不同时间点的表达情况。结果与对照组和SOD_1WT组比较,感染过表达SOD_1G41S组、SOD_1G41D组rAAV的细胞峰值电流显着增加(P<0.05),且SOD_1G41S组显着高于SOD_1G41D组(P<0.01)。SOD_1G41S组和SOD_1G41D组细胞半数激活电压和半数失活电压显着高于对照组和SOD_1WT组(P<0.05);但SOD_1G41S组半数激活电压高于SOD_1G41D组(P<0.05);SOD_1G41S与SOD_1G41D组半数失活电压比较差异无显着性(P>0.05);各组激活、失活曲线斜率差异无显着性(P>0.05)。虽然24和48h,SOD_1WT、SOD_1G41 S、SOD_1G41D组cleaved caspase-3表达量差异无显着性;但转染72 h后,SOD_1G41S组和SOD_1G41D组cleaved caspase-3表达量高于SOD1WT组,且SOD_1G41S组高于SOD_1G41D组。结论SOD_1G41S和SOD_1G41D突变通过加快Na_v快速激活和抑制失活过程提高神经元活性,SOD_1G41S突变Na_v活性显着高于SOD_1G41D。SOD_1G41S突变导致cleaved caspase-3表达水平高于SOD_1G41D突变。(本文来源于《中国临床神经科学》期刊2017年02期）
腺相关病毒载体论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:制备携带碳端结构域缺失的小鼠白介素-4(Interleukin-4,IL-4)基因突变体的5型重组腺相关病毒(recombinant adeno-associated virus, r AAV)并在细胞水平检测其介导的外源蛋白表达情况。方法:通过分子克隆技术构建携带小鼠IL-4碳端22个氨基酸缺失的突变体的表达质粒pSNAV-mIL-4ΔC22,叁质粒共转染法制备重组的5型AAV病毒,体外感染人支气管上皮样细胞系16HBE和BEAS-2B,并通过Western blot和ELISA检测外源蛋白表达。结果:DNA测序表明构建的小鼠IL-4碳端第118位氨基酸位点处截短的突变体基因表达序列正确无误,制备的重组病毒载体r AAV5-mIL-4ΔC22滴度约为3×10~(11)vg/m L。r AAV5-GFP感染16HBE和BEAS-2B细胞后36小时开始可见持续稳定的荧光蛋白表达,重组病毒r AAV5-mIL-4ΔC22感染16HBE和BEAS-2B细胞后外源蛋白在培养上清中呈分泌型表达。结论:本研究成功构建了携带小鼠IL-4碳端结构域缺失型突变体的AAV表达质粒并制备了重组病毒r AAV5-mIL-4ΔC22,该病毒可有效转染16HBE和BEAS-2B细胞并介导外源基因分泌表达截短型小鼠IL-4突变体蛋白。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
腺相关病毒载体论文参考文献
[1].郭莉霞,殷钟意,郑旭煦.携带NMU2RshRNA重组腺相关病毒载体的构建及其评价[J].生物学杂志.2019
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[10].史明超,赵慧慧,牛琦,金庆文.过表达SOD_1G41S和G41D的重组腺相关病毒载体构建及其在体外N2a细胞中的作用研究[J].中国临床神经科学.2017
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