猪丁型冠状病毒诱导的细胞线粒体凋亡

猪丁型冠状病毒诱导的细胞线粒体凋亡

论文摘要

猪丁型冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)是一种新型的猪肠道致病性冠状病毒,可引起猪群剧烈腹泻及呕吐,但致病机制尚不清楚。本研究检测了PDCoV感染诱导的细胞凋亡。Caspase酶活性检测显示,在PDCoV感染的细胞中,caspase 3、caspase 8和caspase 9的活性随病毒感染量的增多而显著提高,类似的现象未能在紫外灭活病毒感染的细胞中观察到,表明PDCoV感染可同时激活内源性与外源性细胞凋亡通路,并暗示细胞凋亡的诱导依赖于病毒复制。为深入探究PDCoV诱导的内源性细胞凋亡,分别检测胞浆和线粒体中细胞色素C与凋亡诱导因子。结果显示,与正常细胞相比,PDCoV感染细胞从线粒体释放到胞浆的细胞色素C显著增多,且其释放量随着感染时间的延长而增多,而凋亡诱导因子始终定位于线粒体,提示PDCoV感染通过促使线粒体膜间隙的细胞色素C进入胞浆而启动caspase依赖的线粒体凋亡通路。本研究初步揭示了PDCoV诱导细胞凋亡的机制。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞和病毒
  •   1.2 生物材料和主要试剂
  •   1.3 病毒蛋白多抗的制备
  •   1.4 Optiprep不连续密度梯度离心纯化病毒
  •   1.5 蛋白样品制备及免疫印迹
  •   1.6 Caspase 8活性检测
  •   1.7 胞浆和线粒体组分分离
  •   1.8 线粒体膜电位检测
  • 2 结果与分析
  •   2.1 PDCoV激活凋亡依赖于病毒复制
  •   2.2 PDCoV感染激活细胞内源性与外源性凋亡通路
  •   2.3 PDCoV感染诱导细胞色素C释放胞浆
  •   2.4 PDCoV感染不改变线粒体膜电位
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 焦少勇,林翠,杜柳阳,刘俊丽,顾金燕,周继勇

    关键词: 猪丁型冠状病毒,线粒体凋亡,细胞色素

    来源: 生物工程学报 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 南京农业大学免疫研究所,浙江大学农业农村部动物病毒学重点实验室

    基金: 国家重点研发计划(No.2016YFD0500102),江苏高校优势学科建设项目资助~~

    分类号: S852.651

    DOI: 10.13345/j.cjb.180512

    页码: 1050-1058

    总页数: 9

    文件大小: 2206K

    下载量: 304

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