导读:本文包含了酶法拆分论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:扁桃,动力学,脂肪,丙氨酸,氨肽酶,动态,巴林。
酶法拆分论文文献综述
李振城[1](2018)在《多液相体系酶法拆分萘普生的研究》一文中研究指出萘普生是一种具有消炎镇痛作用的非甾体类抗炎药,具有R、S两个对映异构体,其S构型的对映体比R构型的药效高28倍,而且R构型对映体有副作用。因此,临床上需要应用光学纯的S-萘普生。叁液相体系是一种最为简单的多液相体系,作为一种新型的反应体系,具有很多优点,其中相还可以作为“液态固定化酶”重复使用。把叁液相体系应用于萘普生的酶法拆分的研究尚未见报道。本文构建了叁液相体系,发现了一种海洋链霉菌来源的脂肪酶MAS1对萘普生具有较好的R构型选择性,并对两种具有不同构型偏好的脂肪酶在叁液相体系中催化拆分萘普生进行了研究,主要研究成果如下:对消旋的萘普生进行化学法甲酯化得到萘普生甲酯,并建立合适的分析方法。通过对几种脂肪酶进行初步筛选,发现了具有较好S构型选择偏好的脂肪酶AY30。研究了脂肪酶AY30在不同的叁液相体系中的催化效果,发现了对AY30的立体选择性有提升效果的异辛烷/PEG400/硫酸钠体系。研究了脂肪酶AY30-叁液相体系的成相物质浓度和一些反应条件对反应的影响,并研究了反应随着时间的变化规律。在优化后的反应体系和反应条件下,反应转化率为50%时,得到的产物萘普生的ee值达98.3%,明显优于水-异辛烷体系。反应剩余的R构型过量底物经过4批次的消旋回用,获得了大于90%的产率。富酶中相经过8批次的重复利用仍能达到初始80%的转化率。研究了叁液相体系的微观结构,发现了叁液相体系具有独特的中相包上相结构。发现了海洋链霉菌来源的脂肪酶MAS1具有较好的R构型偏好,并研究了一些反应条件对反应的影响,并与同样具有R构型偏好的商品化脂肪酶CALB在相同条件条件下的催化反应进行了对比。经过反应条件的优化,反应时间36h后,剩余底物S-萘普生甲酯的ee值大于99%,回收率约85%。相同条件下,脂肪酶MAS1的立体选择性明显高于CALB。筛选得到对MAS1的立体选择性有提升作用的叁液相体系,并研究了脂肪酶MAS1-叁液相体系的成相物质浓度和一些反应条件对反应的影响,并研究了反应随着时间的变化规律。在优化后的反应体系和反应条件下,反应转化率为50%时,得到的产物萘普生的ee值约80.4%,同样明显高于水-异辛烷体系。富酶中相经过8批次的重复利用仍获得77.6%的相对转化率。对萘普生甲酯进行了双酶二次拆分,获得了ee值大于99%的S-萘普生,效果比直接用AY30拆分更优。(本文来源于《华南理工大学》期刊2018-12-19)
刘峥,陈华勇,王永华,杨博[2](2018)在《酶法拆分制备共轭亚油酸功能单体》一文中研究指出研究利用Lipase AYS催化甲醇和共轭亚油酸(CLA)进行酯化反应,以期对共轭亚油酸异构体进行拆分制备共轭亚油酸功能单体。通过考察酯化反应的影响因素,确定了最优反应条件为:Lipase AYS加酶量180 U/g,反应温度40℃,CLA与甲醇摩尔比1∶1,缓冲液p H 6.5。在最优条件下反应8 h,总酯化率为49.5%,分离产物可以得到甲酯相与脂肪酸相,甲酯相中c9,t11-CLA甲酯的拆分效率达到86.2%,脂肪酸相中t10,c12-CLA的拆分效率达到80.0%,两者回收率分别为72.4%和54.2%。(本文来源于《中国油脂》期刊2018年05期)
石莹[3](2016)在《微生物酶法拆分丙型肝炎NS3酶抑制剂类药物中间体》一文中研究指出乙烯基取代环丙烷氨基酸衍生物被广泛应用于药物的合成领域。其中(1R,2S)-1-氨基-2-乙烯基环丙烷甲酸酯类衍生物是用于合成丙型肝炎NS3酶抑制剂类药物的重要手性中间体,目前对其的手性合成主要还是利用化学方法,微生物酶的高效拆分方法的研究还较为匮乏。本课题中,我们以1-氨基-2-乙烯基环丙烷甲酸乙酯盐酸盐为唯一碳源,首次从不同来源的100份土样中,筛选获得能够利用该底物的菌株378株,其中能够选择性水解(1S,2R)-N-Boc-1-氨基-2-乙烯基环丙烷甲酸乙酯类衍生物的共有54株,选择性水解(1R,2S)-1-氨基-2-乙烯基环丙烷甲酸乙酯类衍生物的共有15株。经过传代和鉴定,最终获得拆分效果最优的菌株CY-2,鉴定为Sphingomonas aquatilis JSS7。对CY-2的底物拆分条件进行了优化,底物浓度1 g.L-,37℃,反应72 h,pH 9缓冲液体系,湿菌体量为350 mg。最优条件下,菌株对(1S2R)构型选择性水解e.e值为88.23%,转化率为62.44%。对CY-2进行了拆分底物谱的研究,制备了乙烯基环丙烷甲酸酯类衍生物以及不同的含酯键和氨基的化合物。在所选不同的11种化合物中,CY-2能够选择性水解其中的7种,其中制备获得(1S,2R)-1-氨基-2-乙烯基环丙烷甲酸乙酯的e.e值达到99.60%。对另一对底物具有拆分活性的菌株SQR-21进行了基因的挖掘,通过与活性酶Alcalase 2.4L比对,利用大肠杆菌重组菌,克隆表达了其中的4段水解酶蛋白进行底物活性拆分实验。结果虽未达到理想值,但仍提供了新的方向。(本文来源于《北京化工大学》期刊2016-05-22)
李海艳,辛嘉英,王艳,王喜军,马杰[4](2015)在《萘普生酶法拆分的研究进展》一文中研究指出萘普生酶法拆分具有反应速度快、专一性强、反应条件温和、无污染等优点。我们从酶的选择、酶的固定化及反应体系的构建方面对近期进展进行概述。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2015年06期)
王玉强[5](2014)在《微生物酶法拆分N-BOC-DL-丙氨酸甲酯的研究》一文中研究指出D-丙氨酸是一种重要的非天然手性α-氨基酸,它是一种重要的化工原料和医药中间体,广泛应用于手性药物、手性添加剂、手性助剂等领域。本课题旨在研究利用微生物酯酶拆分N-叔丁基氧羰基(BOC)-DL-丙氨酸甲酯以制备N-BOC-D-丙氨酸甲酯。采用N-BOC-DL-丙氨酸甲酯为唯一碳源的富集培养法,从土壤中筛选到一株立体选择性较高的L-构型水解酶产生菌,通过形态学观察和16SrDNA序列分析,确定为解淀粉芽孢杆菌,并命名为Bacillus amyloliquefaciens WZZ002(CCTCC M 2013366)。通过单因素实验对B.amyloliquefaciens WZZ002的发酵产酶条件进行研究,确定其最优发酵培养基配方为:可溶性淀粉0.6%,蛋白胨1.6%,酵母膏0.1%,MgSO4 1 mmol/L;最佳培养条件为:初始pH 7.0,温度30℃,发酵培养24 h。在此条件下发酵培养所得菌体催化底物N-BOC-DL-丙氨酸甲酯水解的e.e.s值从23.8%提高到49.2%,转化率从19.4%提高到33.1%,生物量从0.86 g/L提高到2.21 g/L,对映体选择率E大于300。实验对B.amyloliquefaciens WZZ002全细胞水解拆分N-BOC-DL-丙氨酸甲酯的反应条件进行研究,确定最优反应条件为:全细胞催化剂添加量50g/L,底物浓度2M,反应温度35℃,NH3·H2O为中和剂,反应过程中pH维持为8.0。在最优反应条件下反应10 h,e.e.s值达到99.9%以上,e.e.p值大于98%,转化率为50.1%。实验研究了以海藻酸钠包埋法对B.amyloliquefaciensWZZ002进行细胞固定化,并考察其固定化条件,得到最优的细胞固定化条件为:海藻酸钠浓度为2%,CaCl2浓度为4%,4℃下钙化4h。以固定化细胞为催化剂,重复水解反应10批次,酶活力仍能保留85%以上,证明了该固定化细胞具有良好的可重复利用性和稳定性。为了获得B.amyloliquefaciens WZZ002所产能立体选择性水解N-BOC-DZ-丙氨酸甲酯的目的酯酶,通过发酵液的硫酸铵分级沉淀、DEAE离子交换层析和苯基疏水性层析,得到了电泳纯的目的酯酶,其蛋白分子量约为50 kDa。通过酶的分离纯化,比酶活力由9.27 U/mg提高到142.92 U/mg,回收率9.57%,纯化倍数15.42。并对该酯酶的酶学性质进行了研究,结果显示其最适pH为8.0,最适温度55 ℃,Fe2+、K+对该酶有促进作用,A13+、EDTA对该酶有抑制作用,吐温20和吐温80对该酶有促进作用。此外还研究了B.amyloliquefaciens WZZ002酯酶的底物特异性,发现该酯酶倾向于水解短链长的叁酰甘油酯,因此可以预测B.amyloliquefaciens WZZ002所产对N-BOC-DL-丙氨酸甲酯有立体选择性水解作用的酶为酯酶。(本文来源于《浙江工业大学》期刊2014-11-01)
沈萨萨,姜灵,陆杰,于洪巍[6](2014)在《酶法动态动力学拆分制备R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸》一文中研究指出采用假单胞菌脂肪酶Pseudomonas sp.ECU1011催化乙酰基邻氯扁桃酸进行不对称水解,利用突变后的扁桃酸消旋酶(V29I)对拆分后的产物S-(-)-邻氯扁桃酸进行消旋,消旋后的邻氯扁桃酸经过酰化重新被利用到水解反应中,实现了酶法动态动力学拆分制备R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸。通过对拆分反应、拆分混合物的分离回收以及消旋反应的工艺优化,最终获得光学纯度ee>99.9%的R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸,其收率达80%。本研究建立的R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸的动态动力学拆分工艺,对其工业化应用具有重要的指导意义。(本文来源于《化工进展》期刊2014年09期)
沈萨萨[7](2014)在《酶法动态动力学拆分制备R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸》一文中研究指出目前世界上使用的一千多种药物中,天然及半合成的药物就有五百多种,大部分是以消旋体形式存在的手性药物分子。由于手性药物两个对映体之间存在药理性质的差异,使得单一对映体的手性药物的制备成为人们研究的热点。本实验制备得到的R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸就是一种重要的药物中间体。R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸水解后可以得到R-(-)-邻氯扁桃酸,而R-(-)-邻氯扁桃酸又可以合成新型血小板聚集抑制剂氯吡格雷。随着氯吡格雷、邻氯扁桃酸及其衍生物用途的进一步开发,R-(-)-邻氯扁桃酸的市场需求量日益增加,但由于其制备工艺的限制,市场需求难以得到满足。因此寻找新的制备方法就显得尤为的重要。目前利用动力学拆分消旋体反应是制备单一对映体的主要方法之一。然而动力学拆分的最大理论产率值只有50%。但是动态动力学拆分反应方法的出现解决了这个问题,动态动力学拆分主要是在动力学拆分的过程中加入消旋化反应,使反应中未得到利用的单一异构体经过消旋反应后重新被利用。因此实验利用动态动力学拆分的方法制备R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸。首先实验设计了整个制备过程,通过实验分别对每一步的反应进行了研究。实验采用乙酰基邻氯扁桃酸消旋体为原料进行拆分反应,利用扁桃酸消旋酶对拆分后的产物S-(+)-邻氯扁桃酸进行消旋。不仅对产物的对映体过量值和产率进行了测定,也对拆分反应和消旋反应的条件进行了优化。拆分反应最优拆分条件为:底物浓度20mM,pH=6.2(磷酸缓冲液),40oC,200r/min,反应时间4.25h。消旋反应的最适条件为:10mM的邻氯扁桃酸拆分产物,pH=7.5(磷酸缓冲液),25oC~30oC,200r/min,反应时间3h。为了实现邻氯扁桃酸的循环利用,还需要对乙酰基邻氯扁桃酸不对称水解得到的R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸和邻氯扁桃酸混合物进行有效的分离,因此又进行了R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸和邻氯扁桃酸的分离实验,并对萃取分离条件进行了优化。研究结果表明,在40oC,200r/min下,用等体积的氯仿对酶法制备液进行2次萃取,每次萃取时间均为40min,未反应底物R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸的萃取收率可达96%;然后用等体积的乙酸乙酯对萃取余液进行2次萃取,可获得产物邻氯扁桃酸的萃取收率为98%。利用优化的条件进行R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸的制备过程,经过四次循环过程后,最终获得光学纯R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸的收率为80%。本研究通过对拆分反应、邻氯扁桃酸萃取回收和消旋反应进行了条件优化,初步建立了R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸的动态动力学拆分工艺,对以后的工业化应用具有重要的指导意义。(本文来源于《江南大学》期刊2014-06-01)
吴小梅[8](2013)在《化学-酶法动态动力学拆分外消旋仲醇研究进展》一文中研究指出介绍了外消旋仲醇动态动力学拆分的反应原理及金属配合物、酸性沸石催化仲醇消旋化反应的机理,论述了近年来过渡金属配合物催化剂、酸性催化剂与固定化脂肪酶结合,进行仲醇动态动力学拆分反应的研究进展。(本文来源于《上海应用技术学院学报(自然科学版)》期刊2013年03期)
高吉[9](2013)在《氨肽酶B酶法拆分DL-氨基酸研究》一文中研究指出手性是自然界的基本属性之一,构成生命有机体的分子绝大多数都是不对称的手性分子,这些大分子在生命体内具有重要的生理功能。氨基酸作为一种常见的手性化合物,广泛应用于医疗、食品、保健品及饲料等与人类生活和健康密切相关的几大行业。氨基酸的生产方法主要有发酵法、化学合成法和生物酶法等。酶法与化学合成法相比,具有高效、环保、安全和适合手性氨基酸大规模生产等优点。随着人们环境意识的增强,资源综合利用、清洁生产、低碳节能已成为全球发展的大趋势。本文进行了氨肽酶B对不同D,L-氨基酸拆分研究,并对转化条件进行了优化,具体工作如下:以D,L-苯丙氨酸为原料化学合成了D,L-苯丙酰胺,利用氨肽酶B酶法拆分D,L-苯丙酰胺分别得到L-苯丙氨酸和D-苯丙氨酸。考察了温度、pH、表面活性剂、金属离子、底物浓度对酶促拆分反应的影响。确定了氨肽酶B酶法拆分D,L-苯丙酰胺的最适反应条件为:反应温度37℃、pH9.0及底物浓度0.06mol/l。浓度为1×10-3mol/1的Mg2+对氨肽酶B有显着激活作用,而Zn2+和Cu2+对酶促反应有明显抑制作用。本文还进行了氨肽酶B酶法拆分天冬酰胺、谷氨酰胺、异亮酰胺、缬氨酰胺、亮氨酰胺、蛋氨酰胺和色氨酰胺的研究。考察了温度、表面活性剂、底物浓度等对酶促拆分反应的影响。从实验结果来看,脂肪族酰胺与氨肽酶B的结合能力大于芳香族酰胺与氨肽酶B的结合能力,而芳香族酰胺与氨肽酶B的结合能力又大于杂环酰胺与氨肽酶B的结合能力。利用分子对接软件,从分子层面研究了氨肽酶B与不同酰胺配体的结合模型,脂肪族酰胺空间结构较小较易与酶结合,含苯环的酰胺与酶结合能力较脂肪族酰胺差,而杂环酰胺因空间体积过大,与酶结合难,不能产生分子对接结果,分子对接的结果与实验结果相符,在理论上对前文实验结果进行了验证。(本文来源于《南京大学》期刊2013-05-01)
李爱朋[10](2013)在《酶法拆分3-氰基-5-甲基己酸乙酯合成普瑞巴林中间体的研究》一文中研究指出普瑞巴林(Pregabalin)是γ-氨基丁酸的3位异丁基取代物。由于其良好的神经病理性疼痛和癫痫治疗效果,被IASP、EFNS和NICE等多个国际指南推荐为一线治疗药物。自上市以来,其销售额不断攀升,己成为全球畅销药市场的“重磅炸弹”,2012年销售额达41.58亿美元。工业化的第二代普瑞巴林合成工艺引入商品化脂肪酶Lipolase,选择性拆分外消旋2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸乙酯制备普瑞巴林关键手性中间体(S)-2-羧乙基-3-氰基-5-甲基己酸,但其原子经济性较低。因此,本文以外消旋3-氰基-5-甲基己酸乙酯为底物,通过酶法对其进行选择性水解合成普瑞巴林关键手性中间体,从而重构普瑞巴林关键手性中间体酶法合成工艺,建立更为绿色、高效的普瑞巴林合成新工艺。通过筛选商品化脂肪酶,发现Lipase PS IM(Pseudomonas cepacia)能够高选择性水解3-氰基-5-甲基己酸乙酯制备(S)3-氰基-5-甲基己酸乙酯。该水解反应最适温度为35℃,pH为6.0;在0.01-0.5 M底物浓度范围内,无底物抑制现象;底物浓度达到2.0 M时,催化反应仍能有效进行,(S)3-氰基-5-甲基己酸乙酯的ee值达到99.2%,浓度为0.89 M(162.9 g/L),产率 44.5%。从土壤中筛选获得能够高选择性水解3-氰基-5-甲基己酸乙酯生成(S)3-氰基-5-甲基己酸的菌株ZJB-09277;经形态学观察、Biolog系统鉴定、16SrDNA序列分析和系统发育树分析,该菌株鉴定为节杆菌(Arthrobacter sp.)。Arthrobacter sp.ZJB-09277水解不同链长对硝基苯酚酯的研究表明,其产酶为酯酶。通过培养基单因素优化确定了Arthrobacter sp.ZJB-09277产酯酶的最优培养基(g/L):柠檬酸钠15,酵母提取粉30,Na2HPO4 1.0,KH2PO41.0,MgSO4·7H2O 0.5,CuCl2 0.02,FeS04·7H20 0.01,NaCl 1.0;培养条件:装液量20%,接种量2.0%,初始pH 7.0,30℃,150 rpm;优化后菌体干重达9.1 g/L,酶活达8.7 U/L。合成系列外消旋3-氰基-5-甲基己酸酯,并考察Arthrobactersp.ZJB-09277选择性水解性能,发现该酯酶水解外消旋3-氰基-5-甲基己酸酯的空间位阻效应明显;在35℃,pH 8.0,含50%二甲基亚砜的反应体系中,Arthrobacter sp.ZJB-09277能够高选择性的拆分3-氰基-5-甲基己酸乙酯(100 mM),反应18 h,转化率达44.6%,eep达到95.1%,E达80;在50%的二甲基亚砜中贮存120 h仍未见该菌株酶活有明显下降,具有良好的二甲基亚砜耐受能力。(本文来源于《浙江工业大学》期刊2013-04-01)
酶法拆分论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
研究利用Lipase AYS催化甲醇和共轭亚油酸(CLA)进行酯化反应,以期对共轭亚油酸异构体进行拆分制备共轭亚油酸功能单体。通过考察酯化反应的影响因素,确定了最优反应条件为:Lipase AYS加酶量180 U/g,反应温度40℃,CLA与甲醇摩尔比1∶1,缓冲液p H 6.5。在最优条件下反应8 h,总酯化率为49.5%,分离产物可以得到甲酯相与脂肪酸相,甲酯相中c9,t11-CLA甲酯的拆分效率达到86.2%,脂肪酸相中t10,c12-CLA的拆分效率达到80.0%,两者回收率分别为72.4%和54.2%。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶法拆分论文参考文献
[1].李振城.多液相体系酶法拆分萘普生的研究[D].华南理工大学.2018
[2].刘峥,陈华勇,王永华,杨博.酶法拆分制备共轭亚油酸功能单体[J].中国油脂.2018
[3].石莹.微生物酶法拆分丙型肝炎NS3酶抑制剂类药物中间体[D].北京化工大学.2016
[4].李海艳,辛嘉英,王艳,王喜军,马杰.萘普生酶法拆分的研究进展[J].生物技术通讯.2015
[5].王玉强.微生物酶法拆分N-BOC-DL-丙氨酸甲酯的研究[D].浙江工业大学.2014
[6].沈萨萨,姜灵,陆杰,于洪巍.酶法动态动力学拆分制备R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸[J].化工进展.2014
[7].沈萨萨.酶法动态动力学拆分制备R-(-)-乙酰基邻氯扁桃酸[D].江南大学.2014
[8].吴小梅.化学-酶法动态动力学拆分外消旋仲醇研究进展[J].上海应用技术学院学报(自然科学版).2013
[9].高吉.氨肽酶B酶法拆分DL-氨基酸研究[D].南京大学.2013
[10].李爱朋.酶法拆分3-氰基-5-甲基己酸乙酯合成普瑞巴林中间体的研究[D].浙江工业大学.2013