刘峥嵘[1]2004年在《SDF-1α及其受体CXCR4 在急性白血病的表达及与髓外浸润的关系》文中进行了进一步梳理目的：基质细胞衍生因子-1α(stromal cell derived factor-1α，SDF-1α)是主要由骨髓基质细胞产生的结构高度同源的小分子趋化蛋白，属于趋化因子亚家族CXC成员之一，其受体CXCR4(Fusion，LESTR)，为G蛋白偶联受体，广泛表达在多种免疫细胞上，是炎症时介导炎症细胞迁移的趋化因子之一，在多种造血细胞和非造血细胞的表达，参与了血细胞生成、胚胎造血干细胞迁移、胚胎发育、组织再生塑造、伤口愈合等一系列生理过程的调节。近年研究表明：CXCR4也表达在多种肿瘤细胞上，SDF-1α与其受体CXCR4特异的结合，通过激活G蛋白偶联受体多种信号途径，选择趋化不同的细胞群，参与了肿瘤细胞的增殖、血管生成、体内扩散等病理过程，促进了肿瘤细胞的发生、发展和恶化。SDF-1α／CXCR4在肾癌、小细胞肺癌、前列腺癌、胰腺癌、恶性脑胶质瘤等的表达与预后的关系已得到了证实。而有关趋化因子及其受体在白血病方面的研究相对少见。在血细胞的生成及造血干细胞归巢的研究中发现：CD34+白血病细胞同CD34+造血干细胞一样表达CXCR4受体，且功能活跃，即在SDF-1α的诱导下向高浓度的SDF-1方向迁移，因此认为SDF-1α／CXCR4可能是影响白血病细胞向血管外迁移的重要因素。骨髓基质细胞分泌的SDF-1α可能通过旁分泌作用参与白血病细胞的生存、增殖等过程的调节。SDF-1α／CXCR4不仅是影响白血病细胞从骨髓迁移至外周血的过程可能也是维持其在髓外浸润部位生长的重要因郑州大学2004年硕士论文SDF一1。及其受体CXCR4在急性白血病中的表达及与髓外浸润的关系子。本研究应用酶联免疫吸附实验(EUSA)及流式细胞仪分别检测白血病患者SDF一1的血浆中水平及白血病细胞上CXCR4的表达特点，并结合临床指标探讨趋化因子SDF一IQ及其受体CXCR4与白血病髓外浸润的关系。 材料与方法:1.所有对象均取自2003年3月至2003年12月间郑州大学医学院第一附属医院血液科门诊及住院患者，儿科及叁附院儿科住院患者66例初治急性白血病(AL)。分组如下:(l)依据1986年EAB制定的MIC分型标准分为:①急性淋巴细胞白血病(A工L)31例，其中男20例，女n例;平均年龄23.71 士19.28岁;L13例，LZ 29例，L33例。②ANLL(非M4+MS)组20WIJ，男12例，女8例;平均年龄33.86士13.85岁;Mi3例，MZ 13例，M33例，M61例。③ANLL(M4+MS)组15例，男9例，女6例;平均年龄39.67士17.52;M44例，Msn例。(2)依据白血病患者外周血白细胞(PB)数的多少分为PB增高组(PB>20 x 109压，以各组PB均数为参考)和阳非增高组(PB毛20 X 109/L)。 PB增高组31例，男17例，女14例，平均年龄31.64士21.8岁，其中A工L14例，ANLL(非M4+MS)10例，ANLL(M4+MS)组7例。PB非增高组35例，男 17例，女18例，平均年龄32.86士19.28岁，其中Al‘L 17例，ANLL(非M4+MS) 10例，AN毛L(M4十M5)8例。(3)依据髓外浸润的症状分为髓外浸润组和非髓外 浸润组:髓外浸润的判断:出现下列体症之一即为髓外浸润组，皮肤结节(病理 证实为白血病细胞浸润)，牙跟增生，肝、脾、淋巴结肿大、中枢神经系统浸润。 本组66例患者中髓外浸润组41例，男18例，女23例:平均年龄28.74士19.16; 其中AIJJ23例，AN工L(M4+MS)组11例，ANLL(非M4+MS)7例，非髓外 浸润组25例，男14例，女n例;平均年龄32.13士17.35;其中A工LS例，ANLL (M4+MS)4例，ANLL(非M4+MS)13例。(4)正常对照组10例，男5例， 女5例，平均年龄35.0士12.0岁。2.同时采集骨髓及外周血，淋巴细胞分离液分 离单个核细胞(mononuclear cen，MNC)，以流式细胞仪标记白血病细胞表面 ex以4的平均荧光强度(mean fluenrenee intensity MFI);应用酶联免疫吸附实验 (EUSA)检测白血病患者的SDF一la血浆水平。3.所得数据运用SPSS10.0统计 软件包处理，采用t检验、方差分析检验、最小显着差及相关性分析检验。 结果:(1) SDF一la在叁组白血病及正常对照组血浆的表达水平:ALL组、 ANLL(M4+MS)组、ANLL(非M4+MS)组及正常对照组的SDF一la血浆表达郑州大学2004年硕一七论文SDF一IQ及其受体CXCR4在急性白血病中的表达及与髓外浸润的关系水平(P岁ml)依次为1317.87士220.76、1339.79士187.06、1063.70士290.74、1908.34士135.55，叁组白血病的血浆水平均低于正常对照组(P<0.01)，其中ALL、ANLL(M4+MS)组均高于ANLL(非M4+MS)组(P<0.01)，而ALL、ANLL(M4+MS)组间无显着性差别(P>.05)。(2) CXCR4在叁组白血病细胞上的表达:cxcR4在 ALL、ANLL(M4+MS)组、ANLL(非M4+MS)组白血病细胞上的表达的平均荧光强度(MFI)分别为78.47士33.96、67.21士24.29、41.66士17.18，其中ALL组、ANLL(M4+MS)组高于ANLL(非M4+MS)组，ALL组、ANLL(M4+MS)组比较无显着性差异(P>0.05)。在31例ALL中，8例(25.4%)伴髓系抗原表达，伴髓系抗原表达组CXCR4的表达明显高于不伴髓系抗原表达组(P<0.01)。(3)SDF一la/CXCR4在PB增高组、PB非增高组的表达:SDF一la在PB增高组、PB非增高组白血病患者血浆中的表达水平(p创ml)分别为1210.85士268.04、1276.81土200.95，组间比较无显着性差别(P>0.05)。CXCR4在PB增高组、PB非增高组表达?
孙慧, 刘峥嵘[2]2004年在《SDF-1α及其受体CXCR4在急性白血病的表达及与髓外浸润的关系》文中指出目的:探讨基质细胞衍生因子-1(stromal cell derived factor-1α,SDF-1α)受体及其CXCR4与髓外浸润的关系。方法:66例初治急性白血病(AL)取自2003年3月至2003年12月间郑州大学医学院第一附属医院血液科门诊及住院患者,分组如下:(1)依据1986年FAB制定的MIC分型标准分为:①ALL 31例;②ANLL(M4+M5)组15例;③ANLL(非M4+M5)组20例;(2)依据白血病患者外周血
刘峥嵘, 孙慧, 邹萍华[3]2006年在《基质细胞衍生因子-1α及其受体CXCR4在急性白血病的表达及与髓外浸润的关系》文中提出为了探讨基质细胞衍生因子-1α(stromal cell derived factor-1α,SDF-1α)及其受体CXCR4在急性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞叁系白血病的表达及与髓外浸润的关系,对66例急性白血病中的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者组(31例)、急性粒细胞白血病(M2)患者组(20例)、急性单核系细胞白血病(M4+M5)患者组(15例)、髓外浸润患者组(41例)、非髓外浸润患者组(25例),应用酶联免疫吸附实验(ELISA)及流式细胞术分别检测SDF-1α及其受体CXCR4在叁组白血病外周血及骨髓白血病细胞上的表达。结果表明:ALL患者组、M4+M5患者组、M2患者组及正常对照组血浆的SDF-1α水平分别为1317.87±220.76,1339.79±187.06,1063.70±190.74,1908.34±135.55(pg/ml),其中ALL患者和M4+M5患者组高于M2患者组,但均明显低于正常对照组(P<0.01)。髓外浸润患者组及非髓外浸润患者组SDF-1α血浆水平分别为1252.49±263.12、1234.91±185.50,(pg/ml),组间无显着差别。CXCR4在ALL患者组、M4+M5患者组、M2患者组白血病细胞上表达的平均荧光强度(MFI)为78.47±33.96、67.21±24.29、41.66±17.18,ALL患者组及M4+M5患者组明显高于M2患者组(P<0.05)。ALL患者组、M4+M5患者组间无显着性差别。髓外浸润患者组CXCR4表达的MFI(81.72±27.63)明显高于非髓外浸润患者组(36.94±11.86)(P<0.05)。结论:急性淋巴细胞、单核细胞系白血病细胞趋化因子受体CXCR4高表达可能是其易发生髓外浸润的分子机制,3组白血病患者外周血SDF-1α表达水平均降低且与髓外浸润无明显相关,髓外浸润可能更取决于受浸润脏器局部SDF-1α表达水平。
吕运成, 王佐[4]2005年在《基质细胞衍生因子1α与动脉粥样硬化》文中研究说明基质细胞衍生因子1α及其特异受体CXCR4在胚胎发育、肿瘤细胞迁移及介导人类免疫缺陷病毒感染中发挥重要作用,最近发现在动脉粥样硬化斑块中基质细胞衍生因子1α高表达,基质细胞衍生因子1αCXCR4与动脉粥样硬化的关系已经引起重视,现分别从炎症、血管新生、内膜增生等几个方面加以综述。
潘玉夏, 董作仁, 杨琳, 温树鹏[5]2004年在《急性髓系白血病患者MMP-2和MMP-9的表达及与髓外浸润的关系》文中认为目的 :探讨急性髓系白血病 (AML)患者基质金属蛋白酶 2 , 9(MMP 2 ,MMP 9)的表达及与髓外浸润的关系。方法 :采用半定量RT PCR方法检测了 6 5例AML患者骨髓MMP 2、MMP 9mRNA的表达。采用明胶酶谱检测了 18例AML患者MMP 2、MMP 9的酶活性。结果 :①MMP 2在AML患者中表达率、表达水平均明显高于正常对照组 (P <0 .0 5 ) ;MMP 9表达在各组间差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。②髓外浸润组患者MMP 2和MMP 9表达率、表达水平均明显高于无髓外浸润组 (P <0 .0 5 )。③MMP 2 (+)、MMP 9(+)组髓外浸润发生率明显高于MMP 2 (- )、MMP 9(- )组 (P <0 .0 5 )。结论 :AML患者白血病细胞可以产生MMP 2和MMP 9,是参与AML髓外浸润的重要因素。
蔡锋[6]2013年在《TGFβ1/Smad-SDF-1α/CXCR4在成纤维细胞—垂体腺瘤细胞相互作用中的机制研究》文中提出尽管大部分垂体腺瘤患者经手术、药物、放射治疗或者综合治疗后,肿瘤占位效应和(或)内分泌症状可得到控制或者完全治愈,但是仍有部分患者经上述治疗后无效,一些肿瘤甚至在手术或丫刀治疗后出现瘤体侵袭样快速增长、肿瘤细胞Ki67大于3%、p53呈强阳性等恶性倾向,并伴随肿瘤病灶中成纤维细胞及瘢痕组织的增多。这其中以无功能垂体腺瘤(nonfunctional pituitary adenoma, NFPA)最为常见,荟萃分析显示,12%-58%的NFPA患者存在复发现象,其次是GH腺瘤,约有2%-3%。由于复发的垂体腺瘤组织质地偏坚韧,并向鞍上、两侧海绵窦或鞍底侵润性生长,粘连周围重要血管、神经等组织严重,无论是经鼻-蝶窦入路还是常规开颅手术,肿瘤切除均较初发时更为困难；同时,临床上缺乏相应的药物。因此,此类复发纤维化垂体腺瘤(recurrent fibrous pituitary adenoma, RFPA)严重影响着患者的生活质量甚至寿命,研究RFPA肿瘤发生发展机制并探索相关治疗方法显得尤为重要和迫切。新近研究结果显示,除了肿瘤细胞基因组改变,肿瘤间质——即肿瘤细胞所处微环境的变化,对肿瘤的发生发展有着重要影响。肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAFs)是肿瘤微环境中的主要间质细胞,其表型与愈合伤口或慢性纤维化组织中的肌成纤维母细胞(myofibroblasts)相近相似；一些参与炎症的细胞因子,如TGFβ1,可趋化成纤维细胞向肿瘤病灶迁移并使其转化为激活态CAFs。而激活转化的CAFs其细胞因子表达谱会发生改变,一方面可重塑肿瘤微环境组织结构(如,FAP,MMP9等),另一方面,作用于邻近的肿瘤细胞(如,IL6,SDF-la等),使其增殖、侵袭／迁移等能力进一步增强,并刺激肿瘤血管网的构建或介导肿瘤化疗耐药。因此,对RFPA微环境中成纤维细胞进行研究必将有助于我们对RFPA肿瘤发生发展机制的认识,并为下一步探索相关治疗靶点奠定理论基础。综上所述,本研究以5对来自于同一病患的前后两次肿瘤石蜡组织标本和22例初发垂体腺瘤(PPA)及12例复发纤维化垂体腺瘤(RFPA)新鲜标本为组织平台,以原代人垂体腺瘤(PACs)和垂体腺瘤相关成纤维细胞(pituitary adenoma-associated fibroblasts, PAFs)及鼠源垂体腺瘤和成纤维细胞细胞系为细胞平台,以荷瘤裸鼠为动物平台,在激光显微切割等实验技术辅助下,首先观察发现在RFPA组织中,垂体腺瘤细胞分泌TGFβ1增加,通过TGFβ1/Smad信号通路激活PAFs并使其分泌大量的collagen Ⅰ和Ⅲ,激活的PAFs通过TGFβ1/SDF-1α反应袢维持其肌成纤维母细胞样激活状态和促纤维化作用；另一方面,体外细胞和体内荷瘤裸鼠模型证实,激活的PAFs分泌SDF-1α增加,使PACs表面CXCR4受体表达增加并促进PACs的增殖、侵袭／迁移、激素分泌和体内成瘤能力,同时增加肿瘤干细胞比例；最后,通过体外14例人原代NFPA细胞SDF-1α刺激实验,发现SDF-1α作用后,NFPA细胞中miR-134和miR-370的表达水平显着下调,下游靶基因编码蛋白VFGFA和HMGA2的表达水平明显上升,推测SDF-1α可能通过影响肿瘤细胞1miRNAs转录,间接调控肿瘤相关蛋白表达,进而促进NFPA细胞增殖、侵袭等能力。本研究结果提示成纤维细胞与垂体腺瘤细胞可通过TGFβ1/Smad-SDF-1α/CXCR4信号通路相互作用,调控下游相关分子表达,增强并维持各自细胞活性和功能。这一作用机制可能在RFPA发生发展中起重要作用,阻断这一正反馈作用链可望成为治疗RFPA的新方法。第一部分PPA与RFPA中PAFs细胞表型及TGFβ1/Smad信号通路表达差异比较目的：明确在复发纤维化垂体腺瘤(RFPA)组织中激活态垂体腺瘤相关成纤维细胞(PAFs)的存在及其促纤维化能力；分析初发垂体腺瘤(PPA)和RFPA中垂体腺瘤细胞TGFβ1表达水平和成纤维细胞中TGFβ1/Smad信号通路相关蛋白表达水平之间是否存在差异。方法：收集来自于同一病人的首次PA及第二次RFPA石蜡标本5例(4例NFPA,1例GH)利用免疫组织化学方法配对分析两次手术病理标本中collagen Ⅰ、Ⅲ、 a-SMA和FAP差异表达情况,观察RFPA中TGFβ1/Smad相关蛋白在成纤维细胞中的表达情况；检测PPA和RFPA的肿瘤间质中TGFβ1的表达情况；另外收集22例PPA及12例RFPA新鲜标本,显微切割技术辅助下利用qRT-PCR、免疫组织化学等实验方法分别检测分析两类肿瘤细胞中TGFβ1以及相应PAFs中a-SMA、FAP、 COL1A1、COL1A2和COL3A1mRNA转录水平。结果：RFPA组织中存在大量a-SMA和FAP表达阳性的激活态成纤维细胞,此类成纤维细胞表达分泌的collagen I和Ⅲ明显高于其相应PPA组织中的collagenⅠ和Ⅲ,具有显着性差异(p<0.001)；且在RFPA中成纤维细胞TGFβRⅠ、TGFβRⅡ pSmad2和pSmad3均呈现强阳性表达；qRT-PCR结果显示,在RFPA组织中,成纤维细胞的a-SMA、FAP、COL1A1、 COL1A2和COL3A1mRNA表达水平和肿瘤细胞中TGFβ1的转录水平高于PPA组织垂体腺瘤细胞的表达水平(p<0.05)。结论：具有胶原分泌功能的激活态成纤维细胞在RFPA中大量存在；RFPAs组织中肿瘤细胞表达分泌TGFβ1增多,可能是邻近激活态成纤维细胞数量增多和活性增强的原因之一。第二部分TGFβ1/SDF-1α信号通路反应袢维持RPAFs肌成纤维母细胞样激活状态和促纤维化作用目的：探索RFPA组织中受TGFβ1/Smad信号通路激活的复发垂体腺瘤相关成纤维细胞(RPAFs)自分泌TGFβ1现象；分析TGFβ1/Smad信号通路对RPAFs细胞因子SDF-1α及其受体CXCR4表达影响；探索SDF-1α/CXCR4信号通路对RPAFs自分泌SDF-1α及TGFβ1的作用。方法：收集22例PPA及12例RFPA新鲜标本,部分进行体外原代细胞培养,获取相应PAFs (PPAFs和RPAFs),并分成相应实验和对照组,利用qRT-PCR、 ELISA等实验方法分析TGFβ1对肿瘤相关成纤维细胞TGFβ1/Smad信号通路激活和胶原分泌影响,同时分析TGFβ1对激活态RPAFs自身表达分泌TGFβ1和另一类细胞因子SDF-1α及其受体CXCR4的影响；部分标本进行显微切割获取各自组织中的成纤维细胞,利用qRT-PCR分析两组成纤维细胞中SDF-1α及其受体CXCR4表达差异；另将细胞培养所得成纤维细胞分成相应实验组对照组,利用qRT-PCR. ELISA等实验方法分析SDF-1α对激活态RPAFs自身表达分泌SDF-la和TGFβ1的影响；同时在鼠源垂体腺瘤细胞和成纤维细胞系水平,利用qRT-PCR. ELISA和western blot等方法对上述实验结果进行验证。结果：外源TGFβ1因子和肿瘤细胞CM可使成纤维细胞中CAF相关标志物和胶原的表达量明显升高(p<0.05)。qRT-PCR结果显示,RFPA组织中的成纤维细胞SDF-1α及其受体CXCR4的表达量明显高于PPA组织中成纤维细胞中两者的表达量(p<0.05)。体外人原代细胞及鼠源细胞系实验结果证实,外源性TGFβ1因子和SDF-1α因子均可使垂体腺瘤相关成纤维细胞自身的TGFβ1、 SDF-1α和CXCR4表达增强,且受相应受体抑制剂的抑制(p<0.05)。结论：RFPA组织中肿瘤细胞分泌的TGFβ1可激活成纤维细胞,并使其形成TGFβ1/SDF-1α反应袢。这一正反馈作用链是激活态成纤维细胞在RFPA组织中维持其生物学活性和人原代垂体腺瘤细胞培养后期培养基中成纤维细胞大量扩增及复发纤维化垂体腺瘤快速增长的可能原因之一。第叁部分激活态成纤维细胞分泌SDF-1α对垂体腺瘤细胞增殖、侵袭／迁移、激素分泌、肿瘤干细胞比例及体内成瘤等能力的影响目的：分析PPA和RFPA组织中肿瘤细胞增殖、侵袭/迁移等相关蛋白标志物表达情况；探索由激活态成纤维细胞分泌的SDF-1α对鼠源垂体腺瘤细胞系增殖、侵袭/迁移、分泌激素、去分化形成肿瘤干细胞及体内成瘤细胞行为的影响,寻找RFPA肿瘤细胞恶性生物学倾向的可能分子机制和药物治疗靶点。方法：利用免疫组织化学、显微切割技术和qRT-PCR技术分析PPA和RFPA两类垂体腺瘤细胞中与增殖、侵袭/迁移、肿瘤干细胞表型相关蛋白标志物,以及SDF-1α/CXCR4表达差异情况。制备成纤维细胞条件培养基,通过aT3-1和GH3鼠源垂体腺瘤细胞系,利用CCK8细胞增殖活力检测法、FSH、LH和GH相应激素ELISA法、Transwell共培养小室侵袭实验、Live Cell Imaging System活细胞工作站及配套图像分析软件Improvision(?) Volocity、流式细胞术等技术以及构建裸鼠荷瘤模型,分析验证CAFs分泌的SDF-1α对肿瘤增殖、侵袭/迁移、激素分泌、去分化形成肿瘤干细胞等体外细胞学行为和相关蛋白表达的影响。结果：免疫组化结果显示,RFPA间质中SDF-la表达分泌水平及肿瘤细胞中与增殖、侵袭/迁移、肿瘤干细胞相关蛋白及CXCR4的表达水平明显高于PPA相应间质和肿瘤细胞中的表达量(p<0.05)；经重组SDF-1α细胞因子作用和激活态成纤维细胞条件培养基处理的肿瘤细胞其细胞增殖、侵袭/迁移、激素分泌、去分化形成肿瘤干细胞的能力明显强于其他实验组,相应的蛋白标志物表达增高(p<0.05)；同时,此两类处理组肿瘤细胞在裸鼠皮下形成的肿瘤体积明显大于其他各组(p<0.05),两组裸鼠外周血中的GH水平明显增高(p<0.05),免疫组织化学结果显示,相关的蛋白表达亦与其他各处理组间存在明显差异。结论：激活态成纤维细胞过度分泌的SDF-1α可使垂体腺瘤细胞的增殖、侵袭/迁移、激素分泌、去分化形成肿瘤干细胞和体内成瘤能力增强,其表达增强可能是临床RFPA发生发展的重要原因之一,阻断SDF-1α/CXCR4在垂体腺瘤细胞中的活性可能成为治疗RFPA的靶点之一。第四部分初探SDF-la对人原代NFPA细胞印迹基因簇DLK1-MEG3母源等位基因中相关microRNAs及其靶基因编码蛋白表达水平影响目的：分析SDF-1α对NFPA细胞中印迹基因簇DLK1-MEG3母源等位基因中与NFPA肿瘤发生可能相关1nicroRNAs (miRNAs)表达水平的影响,寻找SDF-la处理前后差异表达明显的1miRNAs,预测其下游靶基因和基因功能,为进一步探索发现SDF-la促进NFPA细胞增殖、侵袭／迁移等能力的分子机制提供理论基础。方法：临床选取14例初发非侵袭性NFPA标本进行原代细胞培养,纯化肿瘤细胞,将每一例肿瘤细胞分成对照组和SDF-1α作用组,利用qRT-PCR实验技术分析6类己报道和NFPA发生相关的DLKl-MEG3基因簇中的miRNAs (miR-134, miR-299-5p,miR-329,miR-370,miR-377-5p和miR-432)处理前后表达差异情况,统计学分析得出差异明显的miRNAs,利用miRBase寻找相应己被实验证实与肿瘤相关的下游靶基因,western blot验证靶基因编码蛋白表达差异是否具有统计学差异；将蛋白表达变化和相应miRNAs表达变化做相关性分析,最后通过石蜡组织标本做相应蛋白免疫组化染色。结果：14例NFPA肿瘤细胞经SDF-1α处理后,miR-134和miR-370表达量明显下调(p<0.01)；miRBase等搜索显示已经实验验证并与肿瘤相关的miR-134下游靶基因为：VEGFA和ABCC1;miR-370下游靶基因为：MAP3K8和HMGA2,其中VEGFA和HMGA2表达量明显上升(p<0.05),且VEGFA表达差异值与miR-134表达差异值存在负相关(R=-0.758,p<0.05)。免疫组织化学染色显示,复发垂体腺瘤组织中HMGA2和VEGFA表达明显增强。结论：SDF-la可能通过使NFPA细胞中miR-134和miR-370表达量下调,进而使下游HMGA2和VEGFA蛋白表达增强,促进肿瘤细胞增殖、侵袭和血管生成等能力。SDF-la-miR-134-VEGFA和SDF-1a-miR-370-HMGA2在垂体腺瘤细胞中的作用关系仍需要下一步在人及动物细胞系中的验证。未来,提高miR-134和miR-370在垂体腺瘤中的表达水平有可能成为治疗RFPAs的新方法。
李冠宇, 王松, 季晓辉, 金庆文[7]2011年在《AMD3100、CXCR7抗体对自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓和脾细胞SDF1α、CXCR4、CXCR7 mRNA表达的影响》文中指出目的研究AMD3100、CXCR7抗体对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune en-cephalomyelitis,EAE)大鼠脊髓和脾脏中趋化因子SDF1α及其受体CXCR4、CXCR7表达的影响。方法采用MBP68-86和完全福氏佐剂配置的完全抗原免疫Lewis大鼠制备EAE模型。将大鼠随机分为对照组、AMD3100组、CXCR7抗体组和EAE组,于免疫后第0、2、4、6天给予相应药物干预:AMD3100组按体质量2.5mg/kg腹腔注射AMD3100,CXCR7抗体组腹腔注射CXCR7抗体20μg/只,EAE组腹腔注射等量生理盐水。每天对大鼠进行神经功能评分,免疫后第15天行RT-PCR检测各组脊髓及脾脏中SDF1α、CXCR4、CXCR7mRNA表达,行HE染色观察大鼠脊髓组织病理变化。结果 (1)与对照组相比,EAE组大鼠脊髓血管周围有大量性炎细胞浸润,神经功能评分明显增加,AMD3100组、CXCR7抗体组和EAE组脊髓SDF1α、CXCR4、CXCR7 mRNA表达增加(P<0.01),脾细胞SDF1α、CXCR7 mRNA表达减少(P<0.01);(2)与EAE组相比,AMD3100组大鼠神经功能评分增加,脾细胞CXCR4、CXCR7 mRNA表达增加(P<0.01),脊髓SDF1α、CXCR4、CXCR7表达无统计学差异;(3)与EAE组相比,CXCR7抗体组大鼠神经功能评分增加,脾细胞SDF1α、CXCR4、CXCR7 mRNA表达增加(P<0.01),脊髓SDF1α、CXCR4、CXCR7 mRNA表达无统计学差异。结论 AMD3100和CXCR7抗体均能加重EAE病情,上调EAE脾细胞CXCR4和CXCR7 mRNA的表达。
刘芬芬, 吕学爱[8]2010年在《SDF-1α及其受体在糖尿病大鼠肾病中的作用》文中研究指明据世界流行病学报道,全球有1·8亿糖尿病患者,至2030年总数将翻倍。而糖尿病发生肾脏病变为30%~40%,我国大约有4千万糖尿病患者,1/3的人最终会发展为糖尿病肾病(DN)。糖尿病肾病是糖尿病患者最主要的微血管病变之一,成为导致终末期肾病的主要原因之
苏丽萍, 张进平, 徐焕宾, 郑秀娟, 储以薇[9]2004年在《趋化因子受体CXCR4在人肺癌高转移细胞株的表达和意义》文中研究表明目的 :以人肺癌高、低转移细胞株 95D、95C为研究对象 ,研究趋化因子受体CXCR4的表达及其在肿瘤细胞体外转移潜能中的作用和意义。方法 :采用RT PCR检测 95D、95C细胞CXCR4mRNA的表达情况 ;以PMA活化肿瘤细胞 ,研究CXCR4mRNA表达水平与细胞活性状态的关系 ;应用钙离子内流实验验证其表达是否具有功能 ;通过趋化实验观察CXCR4特异性配件SDF 1α和裸鼠组织匀浆液对 95D细胞的趋化迁移作用 ;通过MTT法测定 95D细胞对SDF 1α作用的增殖反应。结果 :95D细胞功能性地高表达趋化因子受体CXCR4 ,且其表达水平与细胞活性状态有关 ;CXCR4特异性配件SDF 1α和裸鼠肺、淋巴结组织匀浆均可在体外趋化 95D细胞的迁移 ,SDF 1α还可促进 95D细胞的增殖。结论 :95D细胞功能性高表达趋化因子受体CXCR4可能与人肺癌细胞株 95D的体外高转移潜能有关
林安华[10]2007年在《基质细胞衍生因子-1α/趋化因子受体-4与糖尿病微血管病变关系的实验研究》文中进行了进一步梳理第一章基质细胞衍生因子-1α及其受体CXCR-4在糖尿病大鼠视网膜病变和心肌病变中的表达及意义目的:研究糖尿病大鼠视网膜病变和糖尿病心肌病变中基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)及趋化性细胞因子受体-4(CXCR-4)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法:雄性S-D大鼠,体重200±20g,标准化饲养,设糖尿病(DM)和正常对照(NC)两大组,每组分2周组(2wk)、4周组(4wk)、8周组(8wk)、12周组(12wk)、20周组(20wk)五个观察点,每个时点8只。用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔内注射诱导建立糖尿病大鼠模型,正常组以等体积柠檬酸盐缓冲液一次性腹腔内注射。处死前称大鼠体重、测空腹血糖,采用ELISA法测外周血SDF-1α浓度;取视网膜和心肌组织,采用逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测SDF-1α、CXCR-4和VEGF mRNA表达;经PBS和多聚甲醛灌注后取视网膜消化铺片和心肌切片,S-P免疫组化学染色半定量分析SDF-1α、CXCR-4和VEGF的表达变化,视网膜血管HE染色观察形态学改变,透射电镜观察视网膜微血管超微结构的变化、vWF染色观察心肌微血管数量变化;Western blot检测视网膜组织和心肌组织SDF-1α、CXCR-4和VEGF的表达,分析各指标的相关性。结果:(1)DM组大鼠均成模,与NC组比较,DM组食量、饮水量及尿量均显着增加,同时血糖显着增高且体重增长显着缓慢(P＜0.01)。(2)与NC组比较,DM组外周血SDF-1α水平于4wk即有升高,8wk增高明显(P＜0.01),DM组随病程延长逐渐增高,NC组随周龄无明显改变(P＞0.05)。(3)DM大鼠见视网膜微血管周细胞减少、无细胞毛细血管增多,心肌微血管密度降低;透射电镜可见视网膜周细胞和内皮细胞超微结构的病理改变。(4)与NC组比较,DM组视网膜组织SDF-1α、CXCR-4、VEGF在mRNA和蛋白水平均随病程延长而增高(P＜0.05),于20wk增高最明显;NC组随周龄延长SDF-1α、CXCR-4和VEGF在mRNA和蛋白水平表达均无明显改变(P＞0.05)。(5)与NC组比较,DM组心肌组织SDF-1α、CXCR-4在mRNA和蛋白水平表达均随病程延长而增高(P＜0.05),于20wk增高最明显,而VEGF在mRNA和蛋白水平均未见明显增高(P＞0.05);NC组随周龄延长SDF-1α、CXCR-4和VEGF mRNA和蛋白表达均无明显改变(P＞0.05)。结论:DM大鼠视网膜病变中SDF-1α、CXCR-4和VEGF表达均有增高,糖尿病性心肌病变中SDF-1α、CXCR-4表达增高而VEGF表达无明显增高,SDF-1α、CXCR-4和VEGF可能与糖尿病视网膜病变的发生发展有关。糖尿病视网膜病变缺血缺氧时易出现视网膜血管增生而糖尿病心肌病变缺血缺氧时心肌内代偿性血管增生不足的矛盾现象可能与VEGF在不同组织的表达差异有关。第二章基质细胞衍生因子-1α对牛视网膜内皮细胞CXCR-4和VEGF表达的影响目的:观察基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)对体外培养的牛视网膜内皮细胞(BREC)趋化性细胞因子受体-4(CXCR-4)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨SDF-1α对牛视网膜内皮细胞作用机制。方法:取第叁至七代选择性培养的BREC悬液接种于12孔培养板,常规培养条件下分别用不同浓度的糖和不同浓度的SDF-1α及糖+SDF-1α干预,收集上清ELISA检测VEGF的表达,收集细胞Westernblot检测CXCR-4表达。结果:(1)正常葡萄糖(5.6mM)对VEGF和CXCR-4的表达均无影响,高糖(25mM)刺激视网膜内皮细胞CXCR-4、VEGF的表达增加并呈时间依赖性。(2)SDF-1α促进视网膜内皮细胞VEGF和CXCR-4的表达增加并呈剂量和时间依赖性,SDF-1α的作用在100ng/ml达高峰,CXCR-4表达增加水平较VEGF为明显。(3)高糖+SDF-1α干预时,两者协同促进视网膜内皮细胞VEGF和CXCR-4的表达,且CXCR-4表达增加水平较VEGF为明显。结论:高糖和SDF-1α均能刺激视网膜内皮细胞CXCR-4、VEGF的表达,并且具有协同作用。
参考文献：
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[10]. 基质细胞衍生因子-1α/趋化因子受体-4与糖尿病微血管病变关系的实验研究[D]. 林安华. 中南大学. 2007
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