导读:本文包含了骨分化论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:骨形态发生蛋白9,周期性牵张力,人牙周膜成纤维细胞,PI3K,AKT
骨分化论文文献综述
张超,胡静,张君怡,魏克元,孙海豹[1]（2019）在《周期性牵张力介导BMP9通过PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞成骨分化》一文中研究指出目的研究在周期性牵张力介导下,骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)能否激活PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞(human periodontal ligament fibroblasts,hPDLFs)成骨分化。方法利用FlexCell系统对体外培养的hPDLFs加载正弦波、形变率10%、频率0.5Hz的周期性牵张力,免疫荧光法检测细胞骨架蛋白的表达及分布,qPCR检测RUNX2、OCN、OPN、OSX mRNA的表达情况,免疫印迹法检测成骨标志蛋白OCN、OPN的表达,加入PI3K信号抑制剂LY294002后AKT、P-AKT以及OCN、OPN的变化。结果与对照组比较,6 h、12 h组的细胞骨架蛋白表达增多且呈受力方向分布,OCN、OPN表达上调,差异有统计学意义(P<0.05),qPCR检测mRNA的表达趋势与蛋白检测结果一致。结论周期性牵张力介导BMP9可以通过PI3K/AKT信号通路调控hPDLFs成骨分化。(本文来源于《中国临床解剖学杂志》期刊2019年06期）
张放,孙怡芸,梁晓倩,杨爽[2]（2019）在《白细胞介素-23通过Smad4调控间充质干细胞成骨分化的机制研究》一文中研究指出目的研究白细胞介素23(interleukin-23,IL-23)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)成骨分化的作用,并探讨其机制。方法分离培养小鼠骨髓MSC,在IL-23刺激下进行成骨诱导分化,通过茜素红实验与碱性磷酸酶实验明确其成骨分化能力;通过全基因组表达谱芯片检测IL-23刺激下MSC成骨分化过程中的基因表达谱,筛选IL-23调控MSC成骨分化的关键基因,并通过荧光定量PCR加以验证;通过siRNA干扰关键基因Smad4表达,并用茜素红实验与碱性磷酸酶实验明确MSC成骨分化能力改变。结果在成骨诱导分化条件下,IL-23刺激的MSC茜素红实验与碱性磷酸酶实验结果均显着高于无IL-23刺激的对照组;全基因组表达谱芯片结果显示,IL-23刺激下MSC成骨分化过程中Smad4表达明显上调;siRNA干扰Smad4表达后,IL-23刺激引起的MSC成骨能力增强被明显抑制。结论 IL-23通过上调Smad4表达以促进MSC成骨分化。(本文来源于《骨科》期刊2019年06期）
韩耀伦,王璐,马欣[3]（2019）在《ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用》一文中研究指出目的:探讨ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用。方法:分离和培养牙周膜干细胞,将其分为对照组(成骨诱导液培养)、TNF-α组(成骨诱导液培养+TNF-α培养)和激动剂组(成骨诱导液培养+TNF-α+ERK培养)。ALP和茜素红染色测定成骨分化功能,采用Western blot测定牙周膜干细胞Osterix、OPN、ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白水平。结果:与对照组比较,TNF-α组ALP染色和茜素红染色程度低,ALP活性和矿化结节降低(P<0.05),Osterix和OPN蛋白水平降低(P<0.05),p-ERK1/2、Runx2蛋白水平降低(P<0.05);与TNF-α组比较,激动剂组ALP染色和茜素红染色程度介于对照组和TNF-α组之间,ALP活性和矿化结节升高(P<0.05),Osterix和OPN蛋白水平升高(P<0.05),p-ERK1/2、Runx2蛋白水平升高(P<0.05)。叁组牙周膜干细胞ERK1/2蛋白水平比较无明显差异(P>0.05)。结论:TNF-α可能通过影响ERK1/2-Runx2信号通路从而抑制牙周膜干细胞的成骨分化。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2019年21期）
赖满香,廖利平,林基伟,谭玮璐,孙晓生[4]（2019）在《梓醇调控Hedgehog信号通路促进BMSCs向成骨分化的实验研究》一文中研究指出目的观察梓醇对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向成骨细胞分化的影响,并从Hedgehog信号角度探讨其可能的作用机制。方法体外分离培养BMSCs,并通过流式细胞仪对细胞加以鉴定。pNPP法筛选梓醇最佳促BMSCs骨向分化的浓度,以最佳梓醇浓度干预BMSCs的成骨性分化。后续实验分4组:对照组、梓醇组、经典组和联合组(梓醇组+经典组)。酶标法检测碱性磷酸酶(ALP)活性,茜素红染色法检测矿化结节数目,QPCR法检测Shh mRNA、Ihh m RNA水平,Western blot法检测Ptch1、Smo及Gli1蛋白的表达。结果梓醇促BMSCs骨向分化的最佳浓度为1×10-4mol/L;与对照组比较,梓醇组的ALP活性显着增强,矿化结节数目显着升高,Shh mRNA水平显着上升,Ptch1、Smo及Gli1蛋白表达均显着升高(P<0.05);与经典组比较,梓醇组的ALP活性、矿化结节数目、Shh m RNA水平、Ptch1、Smo和Gli1蛋白表达均低于经典组(P<0.05);各组中Ihh mRNA水平无明显变化。结论梓醇能够促进BMSC向成骨分化,可能与上调Hedgehog信号传导通路相关分子有关。(本文来源于《免疫学杂志》期刊2019年11期）
张士花,元宇,邹军[5]（2019）在《成骨分化过程中机械牵张力对成骨细胞相关成骨因子及血管生成因子的影响》一文中研究指出研究目的:近年来《nature》陆续有研究报道,骨质疏松症的发生与机体骨微环境血管生成能力的退化有关。小鼠的骨骼系统中存在H型及L型两种特殊的毛细血管亚型,其中H型血管是骨血管生成的关键。成骨细胞及其前体细胞主要分布在H型内皮细胞周围,通过分泌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、类表皮生长因子(epidermal growth factor-like,EGFL)家族等细胞因子调控骨微环境中血管内皮细胞的增殖及分化。在骨微环境中,血管内皮细胞増殖最主要的区域是长骨的干骺端,抑制血管内皮细胞生成将抑制成骨细胞分化,骨形成受阻,进而导致骨量丢失,长骨变短。而增强骨血管的生成能够促进成骨细胞的成骨分化,进而增强骨形成。因此,促进骨微环境中血管生成可能是预防及治疗骨质疏松的重要途径之一。运动促进成骨细胞的增殖及分化,提高机体骨密度,进而预防及治疗骨质疏松,但其确切机制仍尚未明确。目前,关于运动、骨形成及骨血管生成叁者关系的研究尚未见报道,为了进一步了解运动与骨形成及骨血管生成的关系,本研究通过离体实验,观察成骨细胞在成骨分化过程中相关成骨因子及血管生成因子的变化,并在此基础上对成骨细胞进行机械牵张力干预,观察成骨分化过程中不同周期的机械应力刺激对成骨细胞相关成骨因子及血管生成因子的影响,为运动促进骨血管生成的机制研究奠定基础。研究方法:成骨细胞21天分化实验:取用新生C57BL/6小鼠头盖骨提取成骨细胞,传至第3代后接种于6孔细胞培养板中,在培养液中加入成骨诱导分化剂,根据诱导分化的时间长度进行分组,细胞在成骨分化诱导剂的作用下培养21天、14天、7天、3天、0天,即21D组、14D组、7D组、3D组、0D组,诱导分化结束后提取各组RNA,逆转录后使用荧光定量PCR检测相关成骨因子及血管生成因子的表达;主要检测指标包括:骨钙素(osteocalcin,OCN)、Osterix、EGFL-6、VEGF、FGF1、FGF2、FGFR1、FGFR2以及ATF4等;(2)机械牵张成骨细胞实验:将第3代的C57BL/6小鼠成骨细胞以1×105/孔密度接种到BioFlex 6孔板,在培养液中加入成骨诱导分化剂,在进行成骨诱导分化的同时采用Flexcell-5000细胞应力加载系统对小鼠成骨细胞进行机械牵张干预,采用3%牵张强度,0.5 Hz,单次刺激,单次刺激时间为4小时的牵张方案对原代成骨细胞进行为期0、3、5、7天的牵张刺激,隔天机械牵张一次,干预结束后采用荧光定量PCR以及Western Blot检测相关成骨因子及血管生成因子的表达(主要检测指标同上),同时采用碱性磷酸酶染色试剂盒检测7天牵张刺激后成骨细胞ALP活性的变化;(5)所有实验结果用均数±标准差(x±SD)表示,使用SPSS 22.0软件对实验数据进行分析处理,主要采用的统计学方法为单因素方差分析或独立样本T检验,以P<0.05表示差异具有统计学意义。统计图采用Graphpad软件(Prism 5.0)制作。研究结果:在成骨细胞的成骨分化过程中,OCN及Osterix等成骨因子m RNA表达逐步上调,在成骨分化第7天时表达显着上调(P<0.05),在第14天及第21天m RNA表达上调幅度更为明显(P<0.01);EGFL-6以及VEGF等血管生成因子在成骨分化早期变化并不明显,在成骨分化的中后期表达开始逐渐上调;(2)在成骨细胞分化过程中,机械牵张力能够提高Osterix等成骨因子的m RNA表达,其中7天的机械牵张刺激效果最为明显。在机械牵张力的刺激下,EGFL-6及FGFR1等血管生成因子m RNA表达有逐步上调的趋势,在机械牵张的第7天,EGFL-6、VEGF、FGF1、FGF2、FGFR1以及FGFR2的m RNA表达均显着上调(P<0.01)。异。FGF1m RNA的表达在3d、7d、21d时均未出现显着变化,在14d时显着上调。(3)ALP染色的结果表明,7天的机械牵张干预能够显着提高成骨细胞的ALP活性,促进成骨分化。Western Blot的结果也表明,机械牵张力能够上调Osterix、ATF4等成骨因子以及VEFG、FGFR1等血管生成因子的蛋白表达。研究结论:(1)成骨细胞成骨分化过程中伴随着相关成骨因子及血管生成因子基因表达的上调,提示成骨分化与血管生成之间可能存在一定的联系;(2)在成骨细胞的分化过程中,机械牵张力能够促进成骨分化,同时促进相关血管生成因子的表达。提示机械牵张力能够通过调控成骨细胞促进相关血管生成因子的分泌,这为后期运动促进骨血管生成的机制研究奠定基础。(本文来源于《第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编》期刊2019-11-01）
刘向东,宋应亮[6]（2019）在《脂肪干细胞成骨分化机制的研究进展》一文中研究指出提高种植体骨结合,尤其是糖尿病患者的种植体骨结合是口腔种植医生正在面对且亟待解决的难题之一,脂肪干细胞为解决上述问题提供了新的思路,然而脂肪干细胞的成骨分化能力有待提高。本文总结促进脂肪干细胞成骨分化的有效手段以及具体机制,重点综述微小RNA (microRNA,miRNA)以及脑信号蛋白3a (Semaphorin3A,Sema3a)对脂肪干细胞成骨分化的影响及机制,并对未来研究进行展望。(本文来源于《口腔医学研究》期刊2019年10期）
魏坦军,胡昊,徐峰[7]（2019）在《琥珀酸调控小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞成骨分化的作用研究》一文中研究指出目的探讨琥珀酸调控小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1成骨分化的作用及其可能的机制研究。方法配置0.01、0.10、0.50、1、2 mmol/L琥珀酸,分别处理MC3T3-E1细胞48h,采用四甲基偶氮唑盐(methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)法检测各组细胞增殖能力。实验分为琥珀酸组和对照组,经成骨分化诱导7 d,采用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测细胞成骨分化能力。经成骨分化诱导14 d,采用茜素红染色分析钙结节沉积数量。经成骨分化诱导7 d,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot分别检测两组MC3T3-E1细胞成骨分化相关基因Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)的mRNA和蛋白的表达水平变化。结果低浓度(0.01 mmol/L和0.10 mmol/L)琥珀酸组MC3T3-E1吸光度值与对照组差异无统计学意义(P>0.05),高浓度(0.50 mmol/L、1 mmol/L、2 mmol/L)的琥珀酸组吸光度值均低于对照组(P<0.05或0.01)。琥珀酸处理组(1 mmol/L)ALP活性低于对照组[(0.55±0.11)vs.(0.96±0.11),P<0.05];两组矿化钙结节统计结果显示:琥珀酸处理组钙结节数目低于对照组[(8.32±0.83)vs.(14.22±2.10),P<0.05]。琥珀酸处理组MC3T3-E1成骨分化基因Runx2、OCN的mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05或0.01),琥珀酸处理组小鼠MC3T3-E1成骨分化基因Runx2、OCN的蛋白相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论琥珀酸可抑制小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞的增殖和成骨分化能力,其机制可能与抑制成骨分化相关Runx2和OCN基因表达相关。(本文来源于《华南国防医学杂志》期刊2019年10期）
陆嘉敏,闫明,李泽汉,吴潇,于金华[8]（2019）在《iRoot BP Plus对骨髓间充质干细胞成牙/成骨分化及自噬的影响》一文中研究指出目的研究iRoot BP Plus对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)成牙/成骨分化的影响,初步探讨其与自噬的关系。方法全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,制作iRoot BP Plus浸提液及条件培养基,Western blot筛选最佳作用浓度,碱性磷酸酶染色、qRT-PCR和Western blot观察细胞成牙/成骨相关指标的变化,Western blot检测自噬相关指标的变化。结果 0.2 g/L为iRoot BP Plus条件培养基的最佳作用浓度。用该浓度iRoot BP Plus条件培养基处理细胞后,细胞成牙/成骨相关指标上调。同时,自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,p62表达下调。结论 iRoot BP Plus可促进骨髓间充质干细胞成牙/成骨分化,其机制可能与激活细胞自噬水平有关。(本文来源于《口腔医学》期刊2019年10期）
李萌宇,俞叶佳,施越琦,戈旌,王绍义[9]（2019）在《高浓度唑来膦酸对人牙周膜干细胞凋亡及成骨分化影响的实验研究》一文中研究指出目的研究高浓度唑来膦酸对体外分离的健康人牙周膜干细胞增殖、凋亡和成骨分化的影响。方法体外分离培养健康人牙周膜干细胞,用不同浓度的唑来膦酸(5、10μmol/L)处理,不加药组为空白对照。以CCK8检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞凋亡,ALP、茜素红染色及半定量分析检测细胞体外成骨分化,荧光定量PCR检测成骨标志物Ⅰ型胶原(COL1A1)和骨钙素(OCN)基因的表达,免疫荧光检测OCN和COL1A1蛋白的表达。结果唑来膦酸可呈剂量依赖性抑制人牙周膜干细胞增殖;唑来膦酸处理后,人牙周膜干细胞的凋亡率高于对照组,且随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐上升(P<0.05);ALP和茜素红染色结果表示唑来膦酸用药组细胞的体外成骨分化能力较对照组下降(P<0.05);荧光定量RT-PCR和免疫荧光结果提示,药物处理后细胞的成骨相关基因OCN和COL1A1的基因表达和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论高浓度唑来膦酸显着抑制人牙周膜干细胞的增殖及体外成骨分化,并诱导其凋亡。(本文来源于《口腔医学》期刊2019年10期）
杨馥如,王学智,余四九[10]（2019）在《CRISPR系统促进脂肪干细胞成骨分化与抑制成脂分化的研究》一文中研究指出本研究旨在优化组织培养法分离小鼠脂肪间充质干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs),为研究成骨分化和成脂分化在间充质干细胞分化过程中的相互影响奠定基础。通过细胞形态学观察、细胞生长曲线和流式仪器检测所分离获得的间充质干细胞的特性,利用CRISPR-dCas9系统在快速促进间充质干细胞成骨分化的前提下观察其对成脂分化的影响,并通过生化染色、实时荧光定量PCR和免疫细胞学等手段进行分析。结果显示,接种3～5 d后可见细胞从组织块周围爬出,光镜下可见细胞形态多为成纤维细胞样的梭形细胞,且形态单一均匀,具有较高的爬出率,可以大大提高脂肪间充质干细胞的分离效率;通过CRISPR-dCas9系统激活Runx2和Osterix基因后可以促进间充质干细胞的成骨分化,实时荧光定量PCR及油红O染色结果显示,CRISPR-dCas9系统可以同时抑制间充质干细胞的成脂分化;通过CRISPR-dCas9-KRAB系统同时抑制成骨相关基因Runx2和Osterix后可以促进成脂分化。本研究利用组织贴壁法成功获得了高纯度的脂肪间充质干细胞,具有间充质干细胞的特性和分化能力;利用CRISPR系统可以同时过表达Runx2和Osterix两个基因,可以在进成骨分化的同时抑制成脂分化,表明成脂分化和成骨分化的相关性,为基因编辑在间充质干细胞诱导分化和临床应用方面提供了新的思路和方法。(本文来源于《中国畜牧兽医》期刊2019年10期）
骨分化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的研究白细胞介素23(interleukin-23,IL-23)对间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)成骨分化的作用,并探讨其机制。方法分离培养小鼠骨髓MSC,在IL-23刺激下进行成骨诱导分化,通过茜素红实验与碱性磷酸酶实验明确其成骨分化能力;通过全基因组表达谱芯片检测IL-23刺激下MSC成骨分化过程中的基因表达谱,筛选IL-23调控MSC成骨分化的关键基因,并通过荧光定量PCR加以验证;通过siRNA干扰关键基因Smad4表达,并用茜素红实验与碱性磷酸酶实验明确MSC成骨分化能力改变。结果在成骨诱导分化条件下,IL-23刺激的MSC茜素红实验与碱性磷酸酶实验结果均显着高于无IL-23刺激的对照组;全基因组表达谱芯片结果显示,IL-23刺激下MSC成骨分化过程中Smad4表达明显上调;siRNA干扰Smad4表达后,IL-23刺激引起的MSC成骨能力增强被明显抑制。结论 IL-23通过上调Smad4表达以促进MSC成骨分化。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
骨分化论文参考文献
[1].张超,胡静,张君怡,魏克元,孙海豹.周期性牵张力介导BMP9通过PI3K/AKT信号通路调控人牙周膜成纤维细胞成骨分化[J].中国临床解剖学杂志.2019
[2].张放,孙怡芸,梁晓倩,杨爽.白细胞介素-23通过Smad4调控间充质干细胞成骨分化的机制研究[J].骨科.2019
[3].韩耀伦,王璐,马欣.ERK1/2-Runx2信号通路在TNF-α对牙周膜干细胞成骨分化影响中的作用[J].中国免疫学杂志.2019
[4].赖满香,廖利平,林基伟,谭玮璐,孙晓生.梓醇调控Hedgehog信号通路促进BMSCs向成骨分化的实验研究[J].免疫学杂志.2019
[5].张士花,元宇,邹军.成骨分化过程中机械牵张力对成骨细胞相关成骨因子及血管生成因子的影响[C].第十一届全国体育科学大会论文摘要汇编.2019
[6].刘向东,宋应亮.脂肪干细胞成骨分化机制的研究进展[J].口腔医学研究.2019
[7].魏坦军,胡昊,徐峰.琥珀酸调控小鼠MC3T3-E1成骨前体细胞成骨分化的作用研究[J].华南国防医学杂志.2019
[8].陆嘉敏,闫明,李泽汉,吴潇,于金华.iRootBPPlus对骨髓间充质干细胞成牙/成骨分化及自噬的影响[J].口腔医学.2019
[9].李萌宇,俞叶佳,施越琦,戈旌,王绍义.高浓度唑来膦酸对人牙周膜干细胞凋亡及成骨分化影响的实验研究[J].口腔医学.2019
[10].杨馥如,王学智,余四九.CRISPR系统促进脂肪干细胞成骨分化与抑制成脂分化的研究[J].中国畜牧兽医.2019