3D支架搭载间充质干细胞促进造血干细胞体外生产血小板的研究

3D支架搭载间充质干细胞促进造血干细胞体外生产血小板的研究

论文摘要

目的研究3D支架搭载间充质干细胞(MSC)对促进造血干细胞(HSC)体外生产血小板的影响。方法从本院本部干细胞临床研究中心购买种子细胞HSC及MSC。取适量生物材料,环氧乙烷消毒后使用伊思柯夫改良培养液(IMDM)浸泡过夜。将一定数量间MSC贴壁培养至生物材料中,待其长满。设置分组:对照组(24孔板内单独培养HSC)、MSC组(24孔板内单独接种MSC)、实验组(即HSC+3D-MSC+细胞因子),体外共培养7 d,分别于1~7 d时观察HSC的形态变化;比较三组不同时间点HSC活性细胞数量;采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法测定HSC扩增情况。结果荧光显微镜观察显示:对照组可见HSC细胞呈均一的圆形;MSC组可见MSC呈长梭形;实验组可见圆形细胞和长梭形细胞,在同一视野进行白光和荧光拍照,并经PS软件合成处理后,可见清晰细胞排列。实验组第1、3、5、7天时HSC活性细胞数量分别为(3.00±0.15)、(15.45±2.78)、(133.33±24.68)、(218.88±16.04)×104,明显高于对照组的(1.30±0.23)、(3.75±0.66)、(5.60±0.68)、(8.58±0.29)×104和MSC组的(1.35±0.60)、(10.18±0.99)、(36.51±2.77)、(56.67±1.88)×104,差异均有统计学意义(P<0.05)。对各组培养第1、3、5、7天HSC样本进行CCK-8法检测,从生长曲线可以看出各组HSC数量均随培养时间的延长而增加,第3天开始进入对数生长期,与骨髓MSC共培养对HSC增殖有促进作用, 3D支架搭载较对照组和MSC组对HSC增殖的促进作用更明显。结论 3D支架搭载MSC在体外能够有效促进HSC增殖,显著提高血小板产量。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料来源
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1细胞形态观察
  •     1.2.2细胞增殖能力分析
  •   1.3 观察指标
  •   1.4 统计学方法
  • 2 结果
  •   2.1 三组镜下HSC形态观察
  •   2.2 三组不同时间点HSC活性细胞数量比较
  •   2.3 CCK-8法检测HSC增殖情况
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张丽娜,刘相富,李远,叶艳玲,温力挽,刘家友,赖文辉

    关键词: 支架,间充质干细胞,造血干细胞,血小板

    来源: 中国实用医药 2019年24期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中山大学附属第三医院粤东医院输血科,中山大学附属第三医院输血科,中山大学附属第三医院粤东医院内分泌科

    基金: 梅州市社会发展科技计划项目(项目编号:2017B133)

    分类号: R329.2

    DOI: 10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.24.109

    页码: 195-197

    总页数: 3

    文件大小: 1315K

    下载量: 41

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